青蒿素類抗瘧藥

1、?掌握青蒿素類抗瘧疾藥物的基本結(jié)構(gòu)和主要性質(zhì),第十二章 第二節(jié)青蒿素類藥物的分析,?熟悉青蒿素類抗瘧疾藥物的鑒別試驗和純度檢查方法,?了解青蒿素類抗瘧疾藥物的雜質(zhì)檢查方法,是繼乙氨嘧啶、氯喹、伯喹之后最有效的抗瘧特效藥，尤其是對于腦型瘧疾和抗氯喹瘧疾，具有高效、速效和低毒的特點，曾被世界衛(wèi)生組織稱做是“世界上唯一有效的瘧疾治療藥物”。,(3R,5aS,6R,8aS,9R,12S,12aR)-八氫-3,6,9-三甲基-3,12-

2、氧橋-12H-吡喃并[4,3-j]-1,2-苯并二塞平-10(3H)-酮,青蒿素簡介,2011年9月，中國女藥學(xué)家屠呦呦因創(chuàng)制新型抗瘧藥———青蒿素和雙氫青蒿素的貢獻(xiàn)，獲得被譽為諾貝爾獎“風(fēng)向標(biāo)”的拉斯克獎。這是中國生物醫(yī)學(xué)界迄今為止獲得的世界級最高級大獎。,基本結(jié)構(gòu),基本性質(zhì),鑒別,含量測定,重點內(nèi)容,?倍半萜過氧橋內(nèi)酯,?氧化性?易水解?旋光性?無共軛,?碘化鉀-淀粉?羥戊酸鐵反應(yīng)?香草醛酸-硫酸,?水解后UV法?HPL

3、C,一、青蒿素類藥物的基本結(jié)構(gòu)與主要性質(zhì),青蒿素,將青蒿素結(jié)構(gòu)中C-10位羰基還原成羥基得到雙氫青蒿素(dihydroartemisinin)，進(jìn)一步烷氧基化得到蒿甲醚(artemether)，而進(jìn)行酯化可得到青蒿琥酯(artesunate)。,青蒿素類藥物的物理性質(zhì)、鑒別、檢查及含量測定,(一)典型藥物的結(jié)構(gòu)與物理性質(zhì),由于青蒿素類藥物分子結(jié)構(gòu)中母核，不具有共軛體系，其紫外吸收光譜的主要是末端吸收。但C-10由于取代基的不同具有一定吸

4、收特征。,(二)主要化學(xué)性質(zhì),由于青蒿素類是具有過氧橋的倍半萜內(nèi)酯類化合物，這類化合物具有氧化性。,青蒿素類藥物都均有旋光性，均為右旋體藥物。青蒿素其比旋度為 +75°～+78°，蒿甲醚其比旋度為+168°～+173°。,青蒿素結(jié)構(gòu)中由于有內(nèi)酯，在堿性條件下，發(fā)生水解，但其他藥物由于母核中沒有內(nèi)酯，沒法發(fā)生水解。,氧化性,旋光性,水解反應(yīng),UV吸收特性,二、鑒別試驗,(一)、呈色反應(yīng)(二)、吸收

5、光譜特征(三)、色譜法,(一) 呈色反應(yīng),ChP2010青蒿素的鑒別：取本品約5mg，加無水乙醇0.5ml溶解后，加碘化鉀試液0.4ml，稀硫酸2.5ml與淀粉指示液4滴，立即呈紫色。 ChP2010雙氫青蒿素片的鑒別：取本品的細(xì)粉適量(約相當(dāng)于雙氫青蒿素20mg)，加無水乙醇2ml使雙氫青蒿素溶解，濾過，濾液中加碘化鉀試液2ml與稀硫酸4ml，搖勻，加淀粉指示液數(shù)滴，溶液即顯藍(lán)紫色。,由于青蒿素類是具有過氧橋的倍半萜內(nèi)酯類

6、化合物，這類化合物具有氧化性。在酸性條件能將I-氧化成I2與淀粉指示液，生成藍(lán)紫色。,1. 碘化鉀試液-淀粉反應(yīng)(過氧橋的氧化反應(yīng)),含有內(nèi)酯的化合物、羧酸衍生物和一些酯類化合物在堿性條件與羥胺作用，生成羥肟酸；在稀酸中與高鐵離子呈色。ChP2010收載了青蒿素和青蒿琥酯的羥肟酸鐵鑒別反應(yīng)。,2. 羥肟酸鐵反應(yīng),ChP2010青蒿素的鑒別：取本品約5mg，加無水乙醇0.5ml溶解后，加鹽酸羥胺試液0.5ml與氫氧化鈉試液0.25ml，置

7、水浴中微沸，放冷后，加鹽酸2滴和三氯化鐵試液1滴，立即顯深紫紅色。 ChP2010青蒿琥酯的鑒別：取本品約50mg，加含7％鹽酸羥胺的乙醇溶液(80→100)1ml，再加乙醇制氫氧化鉀試液3ml，置水浴中加熱至沸，放冷，加稀鹽酸至呈酸性，再加三氯化鐵試液l滴，即顯紫紅色。,香草醛-硫酸溶液又稱硫酸香蘭素顯色劑，很多的物質(zhì)如有機酸、揮發(fā)油、甾醇、萜類等都可以顯色。,3.香草醛-硫酸反應(yīng),ChP2010青蒿琥酯的鑒別：取本品約50

8、mg，加三氯甲烷1ml溶解后，取3～4滴置白瓷板上，待三氯甲烷揮發(fā)后，加2％香草醛硫酸溶液1滴，顯紅色。,硫酸香草醛溶液顯色原理:使羧基脫水，增加雙鍵結(jié)構(gòu)，再經(jīng)雙鍵位移，雙分子縮合等反應(yīng)生成共軛雙鍵系統(tǒng)，又在酸作用下形成陽碳離子鹽而顯色。是一種通用顯色劑。,(二)、吸收光譜特征,青蒿素類抗瘧原料藥在ChP2010中均采用紅外光譜的方法進(jìn)行鑒別。,1. 紅外吸收光譜特征,ChP2010青蒿琥酯片的鑒別：取本品的細(xì)粉適量(約相當(dāng)于青蒿琥酯0

9、.1g)，加15ml丙酮振搖使溶解，濾過，濾液揮干，殘渣用硅膠為干燥劑減壓干燥。殘渣的紅外光吸收圖譜應(yīng)與青蒿琥酯的對照圖譜一致。,但是制劑的紅外光吸收圖譜鑒別須經(jīng)提取分離，殘渣干燥后，進(jìn)行紅外光吸收圖譜與對照的圖譜比較。,要求所得的紅外光吸收圖譜應(yīng)與對照的圖譜一致。,由于青蒿素類藥物分子結(jié)構(gòu)中母核，不具有共軛體系，其紫外吸收光譜的主要是末端吸收。但C-10由于取代基的不同具有一定吸收特征。ChP2010均未采用本法鑒別所收載青蒿素類藥物

10、。,2. 紫外吸收光譜特征,(三)、色譜法,1.利用比較供試品溶液主峰與對照品溶液主峰的保留時間(tR)是否一致或比較供試品溶液所顯主斑點的位置和顏色與對照品溶液主斑點的位置和顏色是否相同進(jìn)行鑒別。2.HPLC法一般都規(guī)定在含量測定項下記錄的色譜圖中，供試品溶液主峰的保留時間應(yīng)與對照品溶液主峰的保留時間一致。3.青蒿素類抗瘧原料藥在ChP2010中均采用HPLC的方法進(jìn)行鑒別。但制劑中也有采用TLC法進(jìn)行鑒別。,三、純度檢查,

11、目前青蒿素的制備仍以天然藥材分離提取為主，并用于其衍生藥物的生產(chǎn)，所以藥品中通常都存在結(jié)構(gòu)類似的有關(guān)物質(zhì)，主要通過TLC和HPLC進(jìn)行檢查控制。,ChP2010青蒿素有關(guān)物質(zhì)的TLC檢查： 取本品適量，加丙酮溶解制成每1ml中含15mg的溶液，作為供試品溶液；精密量取供試品溶液0.5ml，置100ml量瓶中，加丙酮稀釋至刻度，作為對照溶液(1)；精密量取對照溶液(1)5ml，置10ml量瓶中，加丙酮稀釋至刻度，作為對照溶液(2)

12、；另取青蒿素對照品和雙氫青蒿素對照品，加丙酮溶解并釋稀制成每1ml 中含青蒿素10mg和雙氫青蒿素0.1mg的混合溶液，作為對照品溶液。吸取上述四種溶液各10μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(沸程60～90℃)-丙酮-冰醋酸(8:2:0.1)為展開劑，展開15cm以上，取出，晾干，噴以含2%香草醛的20%硫酸乙醇溶液，在85℃加熱10～20分鐘至斑點清晰，對照品溶液應(yīng)顯青蒿素與雙氫青蒿素各自的清晰斑點。供試品溶液如顯雜質(zhì)斑點，

13、顏色深于對照溶液(2)主斑點(0.25%)且不深于對照溶液(1)主斑點(0.5%)的斑點不得多于1個，其他雜質(zhì)斑點的顏色均不得深于對照溶液(2)的主斑點(0.25%)。,四、含量測定,ChP2010雙氫青蒿素片的紫外分光光度法測定：取本品10片，精密稱定，研細(xì)，精密稱取適量(約相當(dāng)于雙氫青蒿素10 mg)，置50ml量瓶中，加乙醇，振搖使溶解，并稀釋至刻度，搖勻，靜置2小時，濾過，取續(xù)濾液，作為供試品溶液；另精密稱取雙氫青蒿素對照品約1

14、0mg，置50ml量瓶中，加乙醇溶解并稀釋至刻度，搖勻后，靜置2小時，作為對照品溶液。精密量取對照品溶液與供試品溶液各1ml，分別置10ml量瓶中，各精密加入乙醇1ml，搖勻，加2%氫氧化鈉溶液至刻度，搖勻，置60℃恒溫水浴中反應(yīng)30分鐘，同時取出，迅速冷至室溫，以2%氫氧化鈉溶液-乙醇(4:1)為空白，在238nm的波長處分別測定吸收度，計算，即得。,目前青蒿素類原料藥物ChP2010中均采用HPLC法進(jìn)行含量測定，雙氫青蒿素片中采用