青蒿素類抗瘧藥與磷酸哌喹、本芴醇體外代謝相互作用研究.pdf

1、青蒿素類抗瘧藥是目前僅有的一類在人體內(nèi)尚未發(fā)現(xiàn)明顯耐藥性的強(qiáng)效抗瘧藥，為降低復(fù)發(fā)率、防止耐藥性的發(fā)生，世界衛(wèi)生組織(WHO)推薦使用以青蒿素類抗瘧藥為主的聯(lián)合用藥方案。但受分析方法等的限制，該類藥物的藥動(dòng)學(xué)性質(zhì)、代謝機(jī)理等尚不完全明確，存在機(jī)制不明的時(shí)間依賴性藥動(dòng)學(xué)與自身誘導(dǎo)代謝現(xiàn)象，因而可能易發(fā)生藥物相互作用。鑒于復(fù)方制劑已在臨床廣泛使用，研究其聯(lián)合用藥的相互作用機(jī)理已迫在眉睫，本論文采用高效液相—柱后衍生化—紫外檢測(cè)法建立了青蒿素類

2、抗瘧藥與磷酸哌喹的體外分析方法，同時(shí)采用高效液相色譜—紫外檢測(cè)法建立了本芴醇的體外分析方法，采用肝微粒體孵化法對(duì)青蒿素類抗瘧藥的代謝情況進(jìn)行了考察，同時(shí)還考察了青蒿素、雙氫青蒿素與磷酸哌喹、本芴醇單獨(dú)孵化和共同孵化的藥物代謝相互作用情況。 一、青蒿素類抗瘧藥與其它抗瘧藥體外分析方法研究 采用高效液相—柱后衍生化—紫外檢測(cè)法建立了：(1)同時(shí)檢測(cè)雙氫青蒿素和磷酸哌喹的含量測(cè)定方法；(2)同時(shí)檢測(cè)青蒿素與磷酸哌喹的含量測(cè)定方

3、法；(3)同時(shí)檢測(cè)青蒿琥酯及其代謝物雙氫青蒿素的含量測(cè)定方法；采用高效液相色譜—紫外檢測(cè)法建立了本芴醇在體外的含量測(cè)定方法。雙氫青蒿素的線性范圍為3.0-300μmol/L，r=0.9999，同時(shí)，磷酸哌喹的線性范圍為6.8-680μmol/L，r=0.9996，雙氫青蒿素的定量下限3.0μmol/L，檢測(cè)限為0.6μmol/L；青蒿素的線性范圍為3-300μmol/L，r=0.9998，同時(shí)，磷酸哌喹的線性范圍為6.8-680μmol

4、/L，r=0.9997，青蒿素的定量下限3.0μmol/L，檢測(cè)限為0.3μmol/L；青蒿琥酯的線性范圍為5-500μmol/L，r=0.9997，同時(shí)雙氫青蒿素的線性范圍為5-500μmol/L，r=0.9999，以雙氫青蒿素確定的濃度定量下限為5μmol/L，檢測(cè)限為1μmol/L；本芴醇的線性范圍為3.78-378μmol/L，r=0.9998，濃度定量下限為3.78μmol/L。本文建立的分析方法靈敏度高，重現(xiàn)性好，適用于青蒿

5、素、青蒿琥酯、雙氫青蒿素、磷酸哌喹、本芴醇的質(zhì)量控制及體外代謝動(dòng)力學(xué)研究。 二、青蒿素及其衍生物在人肝微粒體中的代謝研究 考察了青蒿素、青蒿琥酯、雙氫青蒿素在人肝微粒體中的代謝動(dòng)力學(xué)。以WinNonlin藥動(dòng)學(xué)程序，根據(jù)酶催化反應(yīng)動(dòng)力學(xué)Michealis—Menten方程，自行編寫程序，擬合藥物濃度—時(shí)間曲線，并擬合得到主要藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)。青蒿素在人肝微粒體中孵化60 min，Km、Vmax、Clint值分別為99.

6、99±39.29(μmol·L-1)、2.73±0.56(μmol·L—1·min-1)、(2.70±0.54)×10-2(ml·min-1)；雙氫青蒿素在人肝微粒體中孵化60 min，Km、Vmax、Clint值分別為99.73±50.94(μmol·L-1)、1.12±0.30(μmol·L—1·min-1)、(1.10±0.20)×10-2(ml·min-1)；青蒿琥酯在人肝微粒體中孵化60min，Km、Vmax、Clint值分別

7、為49.47±18.75(μmol·L-1)、7.16±0.56(μmol·L—1·min-1)、(0.14±0.04)×10-2(μmol·L—1·min-1)。以上結(jié)果可知，青蒿琥酯在人肝微粒體中的代謝速度快于雙氫青蒿素和青蒿素。同時(shí)對(duì)這幾種青蒿素類抗瘧藥在失活微粒體中的孵化情況進(jìn)行了考察，結(jié)果證明青蒿素類抗瘧藥在人肝微粒體中確實(shí)發(fā)生了生物代謝，而非化學(xué)降解。 三、青蒿素類抗瘧藥聯(lián)合用藥在人源肝微粒體中的代謝研究 考

8、察了青蒿素類抗瘧藥聯(lián)合用藥在人肝微粒體中的代謝差異情況，以WinNonlin藥動(dòng)學(xué)程序，根據(jù)酶催化反應(yīng)動(dòng)力學(xué)Michealis—Menten方程，自行編寫程序，擬合藥物濃度—時(shí)間曲線，并擬合得到主要藥物代謝動(dòng)力學(xué)參數(shù)。通過(guò)比較藥物單獨(dú)孵化和共同孵化后代謝參數(shù)的變化情況得出藥物相互作用情況，結(jié)果如下：磷酸哌喹和本芴醇均使青蒿素在人肝微粒體中的代謝減慢；磷酸哌喹使雙氫青蒿素在人肝微粒體中的代謝加快，但是本芴醇對(duì)雙氫青蒿素在人肝微粒體中的代謝