elisa實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的采集、處理和保存

1、ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的采集、處理和保存實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的采集、處理和保存發(fā)布時(shí)間:20091019ELISA實(shí)驗(yàn)標(biāo)本的采集、處理和保存能夠應(yīng)用ELISA實(shí)驗(yàn)的樣本種類很多，有血清，血漿，細(xì)胞上清，細(xì)胞裂解液，尿液，關(guān)節(jié)滑液，腦脊液，肺泡灌洗液，各種組織的組織勻漿；采集和處理的方式都不相同。下面就列出了biotnt收集的給類樣本的采集、處理和保存方式。方法大多出自文獻(xiàn)和試劑盒說(shuō)明書，部分方法經(jīng)Biotnt驗(yàn)證過(guò)，但有的方法并沒(méi)有實(shí)際操作過(guò)，所以，以

2、下方法僅供參考。一、一、ELISAELISA實(shí)驗(yàn)中血清的采集、處理和保存；實(shí)驗(yàn)中血清的采集、處理和保存；1、真空采血針采集2ml新鮮血液，加入無(wú)菌試管中；2、采血后室溫靜置1小時(shí)；3、將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心10min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。4、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?8℃下，可放置保存2448小時(shí)；20℃下，可放置保存1個(gè)月；70℃下，可放置保存6個(gè)月；5、根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELIS

3、A測(cè)定。大部分ELISA檢測(cè)均以血清為標(biāo)本。血清標(biāo)本可按常規(guī)方法采集，應(yīng)注意避免溶血，紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì)，以HRP為標(biāo)記的ELISA測(cè)定中，溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。此外還應(yīng)避免細(xì)菌污染，因?yàn)榫w中可能含有含有內(nèi)源性HRP，也會(huì)產(chǎn)生假陽(yáng)性反應(yīng)。血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè)。如在冰箱中保存過(guò)久，其中的可發(fā)生聚合，在間接法ELISA中可使本底加深。二、二、ELISAELISA實(shí)驗(yàn)中血漿的采集、處理和保存；實(shí)驗(yàn)中血漿

4、的采集、處理和保存；1、真空采血針采集2ml新鮮血液，加入無(wú)菌試管中；2、按1:9加入抗凝劑（EDTA、草酸鈉、肝素、枸櫞酸鈉），30分鐘內(nèi)于冰上分離血漿以減少血小板的污染；（也可以直接用抗凝管采集）；3、將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心5min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。4、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?0℃下，可放置保存6個(gè)月；4、根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。六、六、ELISAELISA實(shí)驗(yàn)中

5、細(xì)胞裂解液的采集、處理和保存；（需要測(cè)蛋白濃度）實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞裂解液的采集、處理和保存；（需要測(cè)蛋白濃度）1、取細(xì)胞培養(yǎng)板或細(xì)胞懸液，用PBS（PH7.27.4）洗滌細(xì)胞培養(yǎng)板12次。2、通過(guò)反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑（裂解液），使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。3、將采集血液用離心機(jī)4℃，2500rpm離心20min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。4、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?8℃下，可放置保存2448小時(shí)；20℃下，可放置保存1個(gè)月；

6、70℃下，可放置保存6個(gè)月；5、根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。七、七、ELISAELISA實(shí)驗(yàn)中肺泡灌洗液的采集、處理和保存；實(shí)驗(yàn)中肺泡灌洗液的采集、處理和保存；1、10%水合氯醛溶液，腹腔麻醉。2、打開腹腔，另取10ml注射器行下腔靜脈采血，盡可能將血放盡。3、在冰面上對(duì)左肺進(jìn)行肺灌洗。取37℃生理鹽水5ml，分三次灌洗：2ml、1.5ml、1.5ml灌洗?；厥章试?0%以上。4、將肺泡灌洗液用離心機(jī)4℃，15

7、00rpm離心10min。5、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?8℃下，可放置保存2448小時(shí)；20℃下，可放置保存1個(gè)月；70℃下，可放置保存6個(gè)月；6、根據(jù)你的實(shí)驗(yàn)需要，取適量上清夜進(jìn)行各種ELISA測(cè)定。八、八、ELISAELISA實(shí)驗(yàn)中關(guān)節(jié)滑液的采集、處理和保存；實(shí)驗(yàn)中關(guān)節(jié)滑液的采集、處理和保存；1、口腔關(guān)節(jié)：口腔關(guān)節(jié)：患者取坐位，常規(guī)消毒后，作皮下及關(guān)節(jié)后區(qū)局部浸潤(rùn)麻醉。然后囑患者大張口，采用裝有2ml生理鹽水的注射器（5號(hào)針頭）作關(guān)節(jié)