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1、正交法測(cè)幾種因素對(duì)酶活力的影響一、實(shí)驗(yàn)原理1、酶反應(yīng)受到多種因素的影響,如底物濃度、酶濃度、溫度、pH值、激活劑和抑制劑等都能影響酶反應(yīng)速度,并且各因素之間也相互影響(交互作用)。1)底物濃度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響2)酶濃度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響3)溫度對(duì)酶反應(yīng)速度的影響最適溫度不是一個(gè)固定的常數(shù),它受底物的種類、濃度;溶液的離子強(qiáng)度、pH、反應(yīng)時(shí)間等的影響。Ⅱ選擇合適的正交表Ⅲ根據(jù)正交表進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)Ⅳ實(shí)驗(yàn)并收集數(shù)據(jù)Ⅴ分析數(shù)據(jù),得出結(jié)論5)結(jié)果
2、分析Ⅰ利用各因素同一水平試驗(yàn)指標(biāo)之和及平均數(shù),可比較因素不同水平對(duì)試驗(yàn)的影響程度。Ⅱ計(jì)算極差,可比較不同因素的影響程度。Ⅲ找出最佳試驗(yàn)條件(理論值)。3、本實(shí)驗(yàn)選取四個(gè)因素,即底物濃度[S]、酶濃度[E]、溫度、pH值,每個(gè)因素選三個(gè)水平,選擇正交表設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn),實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)如下表:9表1因素水平1[S]ml2[E]ml3溫度℃4pH10.20.237720.50.550830.80.86094、本實(shí)驗(yàn)測(cè)定的是胰蛋白酶的活力,以血紅蛋白為底物,
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