幾種因子對HaCaT細胞合成結合珠蛋白影響的研究.pdf

1、中國醫(yī)科大學博士學位論文幾種因子對HaCaT細胞合成結合珠蛋白影響的研究姓名：夏立新申請學位級別：博士專業(yè)：皮膚病與性病學指導教師：陳洪鐸20050401幾種因子對HaCaT細胞合成結合珠蛋白影響的研究目的在基因及蛋自質水平上研究白細胞介素一6，白細胞介素一4對人角質形成細胞：HaCaT細胞合成結合珠蛋白的影響。探討腫瘤壞死因子儀及干擾素1對HaCaT細胞合成結合珠蛋白的影響。探討免疫抑制劑地塞米松及甲氨喋呤對HaCaT細胞合成結合珠蛋

2、白的影響。材料和方法1細胞培養(yǎng)將HaCaT細胞接種于六孔板內，在含有t0％胎牛血清(fetalcalfBenim，F(xiàn)CS)，lmM丙酮酸鹽，2raM谷氨酰胺，青霉素(1001xg／mL)，鏈霉素(100pg／mL)的1640培養(yǎng)液中，5％CO：，37℃條件下培養(yǎng)。細胞形成單層后加入含有不同刺激因子的，含有或不含l斗M地塞米松的，不含有胎牛血清的1640培養(yǎng)液。所用刺激因子如下：白細胞介素一6(interleukin一6，50ng／mL)

3、，白細胞介素一4(interleukin一4，20ng／mL)，腫瘤壞死因子q(tumornecrosisfactor旺，20ng／mL)，干擾素1(interferon1，20ng／m1)，地塞米松(dexamethasone，10斗M，IOOI山M，10001上M)及甲氨喋呤(methotrexate，50ng／ml，500ng／ml，5000ng／m1)。分別作用12，24，48小時后，收集細胞及細胞上清，用于結合珠蛋白(Hapt