游離色氨酸的測(cè)定(高效液相色譜測(cè)定方法)

1、1八飲料中游離色氨酸的測(cè)定(高效液相色譜測(cè)定方法)本方法適合飲料中游離色氨酸的測(cè)定本方法檢測(cè)限：飲料中游離色氨酸為30μg100ml。（一）方法提要試樣的游離色氨酸經(jīng)處理后，在高效反相色譜C18柱上分離，紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器檢測(cè)，外標(biāo)法定量游離色氨酸的含量。（二）儀器1.高效液相色譜儀帶紫外檢測(cè)器或二極管陣列檢測(cè)器。2.超聲清洗儀（溶劑脫氣用）。3.天平（精確到0.0001g）。4.微孔濾膜（HF0.45μm）。（三）試劑1.1

2、.0molL氫氧化鈉溶液：稱取4.0g氫氧化鈉（分析純），加適量去離子水并稀釋到100ml。2.甲醇（色譜純）。3.0.1%(mV)磷酸溶液：1.0g磷酸（分析純）加水至1000mL，溶解混勻，過(guò)微孔濾膜0.45μm，待用。4.色氨酸對(duì)照品，F(xiàn)luka公司(純度≥99.5%)。5.色氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液：精密稱取色氨酸對(duì)照品約0.0300g，移入100ml容量瓶中，加入少許水，再加入50μL1.0molL氫氧化鈉溶液，超聲溶解并用水定容到100

3、mL，成濃度為300μgmL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液5.0mL用去離子水定容到50mL，成為濃度為30μgmL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。（四）測(cè)定步驟1.樣品處理：①汽水、可樂(lè)型飲料：取均勻試樣置于小燒杯中，微溫除去二氧化碳（或超聲脫氣10min），經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾后供進(jìn)樣用。②果汁類：取均勻試樣置于離心管中，5000rpmmin離心20min，上清液經(jīng)0.45μm微孔濾膜過(guò)濾后供進(jìn)樣用。2.標(biāo)準(zhǔn)工作曲線制作。精密吸取色氨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液1.0

4、，5.0，10.0ml，分別置于3，在氯仿中不溶，在甲酸中易溶，在氫氧化鈉試液或稀鹽酸中溶解。色氨酸是一種必需氨基酸，它的作用主要有兩個(gè)，即防止煙酸缺乏癥和增加血清素水平。在所有氨基酸中，色氨酸被認(rèn)為是特定食品中含量最少的。雖然稀少，色氨酸是非常必要的，因?yàn)樗鼤?huì)由肝臟轉(zhuǎn)換成維生素B3（煙酸和煙酰胺），這有助于防止煙酸缺乏癥。色氨酸的作用還包括負(fù)責(zé)神經(jīng)傳遞素的生產(chǎn)。色氨酸作為一種血清素的初期形式，這種神經(jīng)傳遞素負(fù)責(zé)控制睡眠模式，食欲和情緒