Hg2+、Pb2+、Cd2+對(duì)中華哲水蚤(Calanussinicus)總超氧化物歧化酶(T-SOD)及線粒體COI基因影響的初步研究.pdf

1、本文研究了Hg2+、Pb2+、Cd2+的毒性效應(yīng)對(duì)中華哲水蚤(Calanus sinicus)總超氧化物歧化酶(T-SOD)的影響，并對(duì)重金屬影響下的中華哲水蚤線粒體COI基因做了初步研究，全文共分三個(gè)部分：
　　 第一部分研究了Hg2+、Pb2+、Cd2+對(duì)中華哲水蚤的急性毒性效應(yīng)。通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)確定中華哲水蚤在實(shí)驗(yàn)室的最佳馴化條件，然后進(jìn)行三種重金屬離子對(duì)中華哲水蚤的96h急性毒性實(shí)驗(yàn)，得出3種重金屬對(duì)中華哲水蚤的急性毒性由強(qiáng)至

2、弱依次為Hg2+>Cd2+>pb2+。Hg2+對(duì)中華哲水蚤96h-LC50是0.0106mg/L，Cd2+對(duì)中華哲水蚤96h-LC50是0.0551mg/L，pb2+對(duì)中華哲水蚤96h-LC50是3.7439 mg/L。
　　 第二部分采用亞致死毒性實(shí)驗(yàn)研究了3種重金屬離子Hg2+、Vb2+、Cd2+對(duì)中華哲水蚤總超氧化物歧化酶(T-SOD)活性的影響。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，隨著重金屬離子暴露時(shí)間的延長(zhǎng)，中華哲水蚤T-SOD活性變化顯著

3、。Hg2+濃度為0.0013mg/L～0.0053mg/L時(shí)，T-SOD的活性在12h時(shí)達(dá)到最大；Pb2+濃度為0.4680mg/L、0.9360mg/L、1.8720mg/L時(shí)，T-SOD的活性分別在36h、24h、12h時(shí)達(dá)到最大。Hg2+和Pb2+對(duì)中華哲水蚤T-SOD活性的影響均表現(xiàn)為隨暴露時(shí)間延長(zhǎng)，呈先上升后下降的趨勢(shì)。Cd2+對(duì)中華哲水蚤T-SOD活性影響呈先上升后下降，再上升再下降的趨勢(shì)，12h時(shí)0.0069 mg/L、0

4、.0138mg/L和0.0276mg/L三個(gè)濃度組T-SOD值均達(dá)到最大。
　　 第三部分初步研究了Hg2+對(duì)中華哲水蚤線粒體COI基因的影響。通過(guò)對(duì)對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的中華哲水蚤進(jìn)行DNA提取、目的片段PCR擴(kuò)增、基因克隆和測(cè)定目的基因片段序列，對(duì)比不同濃度Hg2+對(duì)中華哲水蚤mtCOI基因堿基組成的影響。結(jié)果顯示，10μg/LHg2+處理后中華哲水蚤mtCOI基因片段的堿基序列與GenBank accessionno.AF332

5、093的序列相似度為99％，共發(fā)現(xiàn)5個(gè)變異點(diǎn)，分別位于第33、36、212、365和368位點(diǎn)上，變異類型：33位點(diǎn)為顛換，其余四個(gè)位點(diǎn)均為轉(zhuǎn)換。20μg/L Hg2+處理后中華哲水蚤mtCOI基因片段的堿基序列與GenBank accession no.AF332093的序列相似度為98％，共發(fā)現(xiàn)6個(gè)變異點(diǎn)，分別位于第34、50、64、365、368和705位點(diǎn)上，變異類型：34、365和368為轉(zhuǎn)換，50和64為缺失，705為插入。

6、40μg/L Hg2+處理后中華哲水蚤mtCOI基因片段的堿基序列與GenBank accession no.AF332093的序列相似度為98％，共發(fā)現(xiàn)8個(gè)變異點(diǎn)，分別位于第33、35、41、365、368、660、663和670位點(diǎn)上，變異類型：33為缺失，35為插入，41、663和670為顛換，365、368和660為轉(zhuǎn)換。
　　 由本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果可知，中華哲水蚤對(duì)重金屬離子毒性非常敏感，較低濃度就會(huì)引起T-SOD的大幅變化