腎臟病檢測項目知識講解

1、營銷篇,腎病類檢測項目知識講解寶雞東林體外診斷試劑有限公司李林 主管檢驗師,目錄,腎臟結構及腎臟疾病檢測方法簡介尿微量白蛋白知識介紹尿微量白蛋白簡介尿微量白蛋白主要臨床意義及應用尿微量白蛋白檢測步驟及要點胱抑素C知識介紹胱抑素C簡介胱抑素C主要臨床意義及應用胱抑素C檢測步驟及要點,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),？,腎臟結構簡介,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),腎病的實驗室檢查方法,尿液檢查：常

2、規(guī)檢查、特殊生化檢查（蛋白、酶學）、細菌學檢查。腎功能檢查：腎小球濾過功能；腎小管功能檢查；腎血流量測定。腎臟內(nèi)分泌功能檢查。腎臟活體組織病理檢查。,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),1982年Viberti首次提出（Microalbuminuria），英文簡稱mALB,又稱MA或MAU，中文名為微量白蛋白尿或尿微量白蛋白。微量白蛋白尿是指尿中含有少量但屬于不正當情況下分泌出的白蛋白。白蛋白(Alb)占血漿總蛋白量的60%

3、，分子量為69KD，是一種帶負電荷的非糖化大分子蛋白。正常情況下可有少量Alb被濾過，但95%的Alb又在近曲小管被重吸收,故尿中Alb含量很低。范圍：20-200mg/L（健康成人的 mAlb<20㎎/L，所用標本為患者新鮮的尿液）。在尿常規(guī)試紙條的尿蛋白定性通常為陰性或弱陽性。,尿微量白蛋白的命名,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),尿微量白蛋白的命名,,,,,,正常白蛋白含量,微量白蛋白,大量白蛋白,20mg/L,200

4、mg/L,,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),尿微量白蛋白的濃度范圍,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),mALB成因可能是腎小球性的（如：糖尿病性微血管病；高血壓腎小球損害）、腎小管性的（如重吸收障礙）或者腎后性的。白蛋白和微量蛋白同時升高則見于腎小球-腎小管性蛋白尿，病因可能是腎小球疾?。I病綜合癥）時腎小管重吸收負擔過重，腎小球腎小管間質(zhì)性腎病，或者糖尿病腎病所致的腎功能衰竭。,尿微量白蛋白成因,首批國家高新技術企業(yè)及深圳

5、市軟件企業(yè),,被公認為早期腎損傷的金指標！尿微量白蛋白的含量不僅反應腎小球濾過功能的早期損傷程度，而且也反映腎小管重吸收功能的早期損傷。對糖尿病腎病的早期診斷和改善預后具有劃時代的意義！對抗高血壓的療效監(jiān)控和防止腎損傷是一項有效方法！在腎毒性藥物的的應用、心血管事件的早期診斷及預測具有重要價值！,尿微量白蛋白臨床意義,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),,慢性腎臟病目前已成為繼心腦血管病、腫瘤、糖尿病之后又一威脅人類健康的重要

6、疾?。∈澜缟铣^5億人口患有不同的腎臟疾病。慢性腎臟病在成人中的發(fā)生率大約為10%，早期知曉率不到10%！每年超過百萬人口死于與慢性腎臟病相關聯(lián)的心腦血管疾病！超過150萬人依賴腎臟替代治療而生存！臨床治療表明：慢性腎臟病可防、可治，關鍵是早發(fā)現(xiàn)、早治療（效果好且醫(yī)療費用少）！,尿微量白蛋白臨床意義,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),尿微量白蛋白臨床發(fā)生率,糖尿?。杭s為18-32%原發(fā)性高血壓輕微：12-15%中度：1

7、5-30%重度：50%普通人群：約為4-7%,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),？用于高危人群的篩查,糖尿病患者1型糖尿病，5年或12歲后每年測1-3次。2型糖尿病，診斷明確以后每年測1-3次。首次陽性則應在3-6個月內(nèi)再測2次以上，如其中2次陽性則為早期糖尿病腎病，應進行干預治療。在12-20ug/min者，每隔3個月重測一次。<12ug/min者，每年重測一次。高血壓患者急性腎炎史患者長期用藥患者,首批

8、國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),mAlb特別適用于糖尿病患者的早期腎損害的監(jiān)測和療效判斷。mAlb癥的出現(xiàn)是糖尿病腎病和終未腎病的早期預測指標。絕大部分醫(yī)院已經(jīng)把mAlb和 HbA1c作為糖尿病人定期監(jiān)測的指標，其目的就在于觀察糖尿病病人血糖水平控制的好壞程度和由于長期服藥而對腎臟的損傷程度，從而提早采取有效的措施降低糖尿病合并腎病的機會。,糖尿病腎病的早期監(jiān)測和療效判斷,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),糖尿病腎病的早期診斷

9、和療效判斷,微量白蛋白尿是糖尿病腎病并發(fā)癥的早期指標。,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),病例組1—定期服藥 病例組2—非定期服藥,高血壓腎病的早期診斷,尿微量白蛋白陽性者血壓的增高程度與靶器官損傷密切相關。尿微量白蛋白陽性者必須強化高血壓治療，其血壓最好控制在130/80mmHg。原發(fā)性高血壓患者尿微量白蛋白明顯增高，主要與收縮壓相關，是中風的獨立危險因素。,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),腎毒性藥

10、物的的應用指導,mAlb也是在慢性病的長期用藥的患者中醫(yī)生要考慮到的一項指標，盡量優(yōu)選一些副作用小和對腎臟損害程度輕的藥物。,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),全身內(nèi)皮細胞損害的標志,？,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),心血管事件的早期診斷及預測,我國高血壓患者mALB的檢出率為18.6%。（引自孫寧玲，王鴻懿，朱鼎良等.白蛋白尿與高血壓水平的關系[J].中華腎臟病雜志，2010，26（10）：762-765）,首批國家高新技

11、術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),尿微量蛋白（mALB）項目測前準備開機10分鐘左右，使之處于工作最佳狀態(tài)。從冰箱取出抗血清試劑，放置適宜溫度（15-35攝氏度，10分鐘左右），使之處于備用最佳狀態(tài)。取出移液器（0.5-10uL）并將其調(diào)至2uL取液容量位置。取出移液器（20-200uL）并將其調(diào)至60uL取液容量位置。準備好標本（類型：全血、血清、血漿；用量：2uL或20uL兩種模式）。取出預裝試劑（600uL）的比色杯。樣品加

12、入用移液器（0.5-20uL）套上相應型號吸嘴，吸取樣本（按移液器頂端至卡塞感時即可）加入（斜拿測量杯且吸嘴放入液面按移液器頂端至卡塞感時即可時反復2次，第3次壓至極限）到預分裝好的比色杯內(nèi)。注意勿用手捏比色杯中下端透光面（共兩面）。之后將比色杯放在測量通道。,尿微量白蛋白檢測步驟及要點,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),尿微量蛋白（mALB）項目抗體加入用移液器（20-200uL）套上相應型號吸嘴，取抗血清（壓移液器頂端至

13、卡塞感時即可）加入（吸嘴斜放近液面杯壁壓移液器頂端壓至極限）到已放置在測量通道的比色杯內(nèi)。噴射抗血清時動作稍快。按測量通道側(cè)測量開關。自動測量儀器測量通道自動加熱并振動。（時長90s）儀器自動進行測量。獲取結果測量完成時儀器屏幕和聲音提示撕下打印出的測量結果。（檢測范圍：10-200mg/L）將比色杯棄入垃圾箱。注意事項更換不同批次試劑時，或變換不同檢測項目時，需刷定標磁卡后方能檢測（刷定標磁卡時須按出批號界面且測量

14、槽為空）。將測量通道用比色杯（用過或待用均可）覆蓋，防止測量通道覆蓋灰塵,尿微量白蛋白檢測步驟及要點,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),尿微量蛋白（mALB）項目質(zhì)控測試與標本測試同，差異處在于用質(zhì)控液代替樣本。僅在裝機后、懷疑或擔心測試結果不準時進行質(zhì)控測試。質(zhì)控測試結果應在100±20,尿微量白蛋白檢測步驟及要點,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),目錄,胱抑素知識介紹是什么？有何用？有何優(yōu)勢？如何

15、操作？,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的發(fā)現(xiàn)和命名,1983年Anastasi等首次在雞蛋清中分離純化得到高純度的半胱氨酸蛋白酶抑制劑（cysteine proteinase inhibitor，CPI），后被命名為胱抑素C(Cystatin C，簡稱Cys C)。又名γ-微量蛋白（γ2痕跡堿性蛋白）及γ-后球蛋白（后γ球蛋白）。是半胱氨酸蛋白酶抑制劑蛋白質(zhì)中的一種。,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的

16、結構,是一種低分子量（為13.3KD）、堿性非糖化蛋白質(zhì)，由122個氨基酸殘基組成。,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的特性,廣泛存在于各種組織的有核細胞和體液中，可由機體所有有核細胞產(chǎn)生，產(chǎn)生率恒定。編碼Cys C的基因?qū)儆诠芗一颍茉谒械挠泻思毎麅?nèi)以恒定速度持續(xù)轉(zhuǎn)錄與表達，無組織特異性，故Cys C可在體內(nèi)以恒定速度產(chǎn)生，并存在于各種體液之中，尤以腦脊液和精漿中含量為高，尿液中最低，不受年齡、性別、體重、炎癥等因

17、素影響，研究表明Cys C自1歲后到60歲前在血液中濃度恒定。有研究結果顯示，健康成人血清胱抑素C隨著年齡的增長其平均水平呈上升趨勢，,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的特性,生理條件下帶正電荷，能自由從腎小球濾過，完全被腎小管上皮細胞重吸收并于細胞內(nèi)降解，不重新回到血液中，同時腎小管上皮細胞也不分泌Cys C至管腔內(nèi)。因此，其血清濃度主要由GFR（腎小球濾過率）決定，而不依賴任何外來因素，如性別、年齡、飲食的影響，是一

18、種反映腎小球濾過率變化的理想內(nèi)源性標志物。正常情況下，Cys C在血清和血漿中的濃度為0.51-1.09mg/L (參考范圍)，血漿胱抑素C參考值0.6-1.03。當腎功能受損時，Cys C在血液中的濃度隨腎小球濾過率變化而變化。腎衰時, 腎小球濾過率下降，Cys C在血液中濃度可增加10多倍;若腎小球濾過率正常，而腎小管功能失常時，會阻礙Cys C在腎小管吸收并迅速分解，使尿中的濃度增加100多倍。,首批國家高新技術企業(yè)及深圳

19、市軟件企業(yè),胱抑素C的臨床意義,Cys C是迄今基本滿足理想內(nèi)源性GFR標志物要求的內(nèi)源性物質(zhì)。是新近發(fā)展起來的評估腎功能的一種敏感性好、特異性高的指標。可以代替：復雜的全血檢測；24小時小便收集；體表面積和肌酐清除率的計算；患者受放射物質(zhì)的照射。Cys C與其他腎功能檢測項目組合（Scr（肌酐），Urea（尿素），UA（尿酸）），可顯著提高檢測的靈敏度和特異性。,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),腎臟功能檢測指標對比分析

20、,腎臟功能包括腎小球的濾過功能、腎小管的重吸收及分泌功能。血中肌酐和尿素氮通過腎小球濾過進入尿液排出體外，因此傳統(tǒng)習慣一般把血清尿素氮、肌酐作為常規(guī)腎功能的檢測項目，但都不是評價腎功能的理想指標。,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),腎臟功能檢測指標對比分析,Cys C比血清尿素氮（BUN）、肌酐（CREA-M）有更高的敏感性和特異性，對于評價腎小球濾過率有非常重要的價值。因腎臟有強大的儲備能力和代償能力，在腎小球受損早期或輕度受

21、損時，血中尿素氮、肌酐仍可維持在正常水平，只有在嚴重腎小球損害，一般腎小球濾過率降低50%以下時，血尿素氮、肌酐濃度才明顯升高。血清尿素氮首先被作為腎功能的評價指標，但它不符合內(nèi)源性腎小球濾過率（glomerular filtration rate，GFR）標志物的要求，當GFR減少到正常值的40%以前，尿素氮濃度升高緩慢，并且與外源性（蛋白質(zhì)攝入量）與內(nèi)源性（感染、腎上腺皮質(zhì)激素的應用、胃腸出血等）尿素負荷的大小有關，更重要的是腎小

22、管對尿素氮有明顯的被動重吸收性。肌酐基本符合內(nèi)源性GFR標志物的要求，國內(nèi)外仍用血清肌酐作為臨床常規(guī)評估腎小球濾過功能受損的指標．但只有當GFR下降1/3-1/2時．血清肌酐才有明顯變化，而且受性別、飲食、肌肉量等因素的影響。血漿胱抑素C的含量較穩(wěn)定，不易受其它因素的影響，它的濃度不但不受年齡、性別、肌肉量等因素的影響，而且也不受大多數(shù)藥物以及炎癥的影響。胱抑素c的診斷準確性明顯優(yōu)于血清肌酐。有研究結果顯示，健康成人血清胱抑素C隨

23、著年齡的增長其平均水平呈上升趨勢，從而推斷胱抑素C在評估老年人腎功能時較肌酐更有意義。,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的臨床應用,高血壓病的早期腎損害的發(fā)現(xiàn)、干預高血壓發(fā)病逐年增加，所致腎損害是常見并發(fā)癥之一，早期干預，對改善高血壓患者預后有重要意義。高血壓病通過引起良性小動脈腎硬化而導致高血壓慢性腎損害，在良性小動脈腎硬化出現(xiàn)臨床癥狀以前，常規(guī)血液及尿液檢查都正常的情況下，通過應用比較靈敏的檢查手段仍能發(fā)現(xiàn)一些異常

24、，這些可視為高血壓病的早期腎損害。,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的臨床應用,糖尿病腎病的早期發(fā)現(xiàn)、盡早干預糖尿病腎損害是糖尿病嚴重的慢性微血管并發(fā)癥，也是糖尿病患者的主要死因之一，有超過30%的患者發(fā)展為腎功能衰竭及需要腎透析。與其他指標相比，CysC檢出糖尿病腎病的靈敏度為40%，特異性為100%，因此有必要在診斷糖尿病而無證據(jù)有腎病患者中定期檢測CysC濃度變化以觀察其與糖尿病微血管病變的關系。,首批國家高新技

25、術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的臨床應用,腎移植手術后腎功能損傷程度/恢復情況的較早檢出、干預胱抑素C不但能快速的反映腎臟受損的情況，而且可以及時的反映腎功能的恢復情況，特別是移植腎功延遲的患者。急慢性排斥反應或免疫抑制劑治療的副作用是腎移植手術后的最大危害，較早檢出腎功能的損傷程度，有利于及時采取干預措施，當移植腎發(fā)生急性腎排斥時，血清CysC的增高比血清肌酐更明顯也更早。在對腎移植后三個月的患者研究發(fā)現(xiàn)，胱抑素C與GFR的相

26、關性比肌酐和肌酐清除率都大，比肌酐和肌酐清除率都敏感，可以快速診斷出急性排斥反應或藥物治療可能造成的腎損害。,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的臨床應用,心血管疾病中應用大量研究認為，在老年患者尤其心血管疾病患者Cys C水平明顯升高，往往提示預后不良，是可靠的死亡預測風險因子。,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的臨床應用,肝硬化患者中應用？與妊娠的相關性研究結果顯示Cys C與血清尿酸鹽和肌酐相比，

27、對先兆子癇有較好的診斷準確性。,首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的檢測方法,胱抑素C測定方法學進展單向免疫擴散(SRID)放射免疫測定法(RIA)熒光免疫測定法(FIA)時間分辨熒光免疫測定法(TRFIA)酶聯(lián)免疫測定法(ELISA)溶膠顆粒免疫分析（SPIA）顆粒增強透射免疫比濁法(PETIA)顆粒增強散射免疫比濁法(PENIA ),首批國家高新技術企業(yè)及深圳市軟件企業(yè),胱抑素C的檢測方法,較多采用的顆粒

28、增強免疫比濁法，技術已趨于成熟，操作簡便，干擾因素少。顆粒增強透射免疫比濁法(PETIA)、顆粒增強散射免疫比濁法(PENIA )都能夠在自動生化分析儀上測定胱抑素C，而且快速穩(wěn)定。1994年Kyhse Andersen J等報道的顆粒增強透射免疫比濁法（particle enhanced turbidmetric immunoassay）。1997年Finney H等報道的顆粒增強散射免疫比濁法（particle enhanced