醫(yī)療機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室生物安全概要

1、醫(yī)療機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室生物安全,,定義,生物危害（Biohazard） 一種對(duì)人體能產(chǎn)生有害因子的生物源性的力量，例如：由植物和動(dòng)物傳播的微生物、毒素和過(guò)敏原感染和毒害人。實(shí)驗(yàn)室生物安全（Biosafety） 是指為避免微生物和醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室各種活動(dòng)中生物因子（例如：細(xì)菌、病毒、真菌、毒素以及含有感染性病毒的各種樣本）可能對(duì)人、環(huán)境和社會(huì)造成的危害，而采取的防護(hù)措施（硬件）和管理措施（軟件），以達(dá)到對(duì)人、環(huán)境和社會(huì)的安全防護(hù)目的的

2、一種綜合行為。,生物安全的目的,主要是對(duì)人的保護(hù)工作人員同事及家人后勤服務(wù)人員環(huán)境,主要內(nèi)容,1. 實(shí)驗(yàn)室生物安全發(fā)展歷史回顧2. 實(shí)驗(yàn)室生物安全國(guó)內(nèi)外現(xiàn)狀3. 醫(yī)療機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室生物安全隱患與對(duì)策4. 生物安全實(shí)驗(yàn)室的設(shè)施和設(shè)備要求5. 生物安全柜的種類及選購(gòu)6. 結(jié)語(yǔ),一、實(shí)驗(yàn)室生物安全發(fā)展歷史回顧,實(shí)驗(yàn)室感染事故實(shí)驗(yàn)室生物安全的提出實(shí)驗(yàn)室生物安全發(fā)展的主要事件,歷史,1941年美國(guó)發(fā)生74例實(shí)驗(yàn)室相關(guān)的吸入性布氏

3、桿菌感染事故1949年 222 個(gè)病毒實(shí)驗(yàn)室中83%沒(méi)有防護(hù)1976年英國(guó)某醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的工作人員體檢時(shí)發(fā)現(xiàn)結(jié)核菌感染者比其他人員高5倍1978年英國(guó)報(bào)告一個(gè)商業(yè)洗衣房因清洗來(lái)自一Q熱實(shí)驗(yàn)室的內(nèi)衣褲及外衣時(shí)發(fā)生6例雇員和1例參觀者感染Q熱,1974年丹麥某醫(yī)院臨床生化檢驗(yàn)室的工作人員肝炎發(fā)病率比普通人群高出 7倍1992年美國(guó)報(bào)告因工作感染愛(ài)滋病的人員13例，其中有1例是實(shí)驗(yàn)室工作者，12例是臨床醫(yī)生或護(hù)士1993年國(guó)內(nèi)某醫(yī)院報(bào)

4、告225名醫(yī)院工作人員HBV檢測(cè)結(jié)果：醫(yī)生、護(hù)士、食堂工作人員、檢驗(yàn)人員。其中檢驗(yàn)人員感染率最高，陽(yáng)性率為81.2%。多為主觀估計(jì)錯(cuò)誤及操作失誤引發(fā)。,近年實(shí)驗(yàn)室感染相關(guān)事故,2003年 新加坡、臺(tái)灣SARS實(shí)驗(yàn)室 感染事件2004年 北京SARS實(shí)驗(yàn)室感染事件,問(wèn)題的提出,過(guò)去主要注重的是： （1）新技術(shù)、新方法、新項(xiàng)目的開(kāi)展； （2）經(jīng)濟(jì)效益；過(guò)去較少注意的是： （1）生物安全及防護(hù)；

5、 （2）出現(xiàn)問(wèn)題：醫(yī)護(hù)人員（檢驗(yàn)人員）的感染，尤其是“非典”,“非典” 給我們留下的教訓(xùn)與思考： 叢玉隆教授在健康報(bào)上撰文說(shuō)：“過(guò)去，中國(guó)檢驗(yàn)界在學(xué)科建設(shè)的理念上，更多的是重視質(zhì)量管理，相對(duì)忽視生物安全管理……在與SARS的斗爭(zhēng)中，我國(guó)醫(yī)療機(jī)構(gòu)的檢驗(yàn)人員已經(jīng)付出了沉重的代價(jià)?！?幾個(gè)急需解決的問(wèn)題：① SARS病人確診之前或疑似病人的一系列檢驗(yàn)如何進(jìn)行生物防范。② 在現(xiàn)有條件下，綜合性醫(yī)院檢驗(yàn)科能否做SARS病源

6、學(xué)檢測(cè)（包括免疫學(xué)與分子生物學(xué)方法）。③根據(jù)目前的實(shí)驗(yàn)條件，綜合性醫(yī)院檢驗(yàn)科的其他傳染性標(biāo)本怎樣進(jìn)行生物防范。,實(shí)驗(yàn)室感染事故,1980年以前的實(shí)驗(yàn)室感染事故的特點(diǎn)發(fā)生頻率高1951年，Sulkin和Pike對(duì)5000個(gè)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行了問(wèn)卷調(diào)查，結(jié)果發(fā)現(xiàn)有1342例實(shí)驗(yàn)室感染事故,僅1/3的事例在文獻(xiàn)中報(bào)告過(guò)； 1974年Skinhoj報(bào)告丹麥一個(gè)臨床實(shí)驗(yàn)室雇員的肝炎發(fā)病率比普通人群高7倍； 1976年Harrington和Sha

7、nnon 報(bào)告在英國(guó)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室的工作人員結(jié)核病感染率比普通人群高5倍；,實(shí)驗(yàn)室感染事故,1980年以前的實(shí)驗(yàn)室感染事故的特點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室以外人員的感染1973 年和1978年，英國(guó)兩個(gè)實(shí)驗(yàn)室發(fā)生了兩起三例天花二代感染;一個(gè)商業(yè)洗衣房在清洗來(lái)自Q熱實(shí)驗(yàn)室的內(nèi)衣褲和制服時(shí)發(fā)生了6個(gè)雇員感染Q熱；在實(shí)驗(yàn)室參觀者中有一例Q熱感染和兩例與立克次體的患者接觸的家庭成員。,實(shí)驗(yàn)室感染事故,1980年以前的實(shí)驗(yàn)室感染事故的特點(diǎn)大多數(shù)感染的原因不明確

8、80% 是不明原因的感染。20% 感染的原因是明確的。,實(shí)驗(yàn)室感染事故,近期實(shí)驗(yàn)室感染事故的特點(diǎn)同一實(shí)驗(yàn)室的交叉污染實(shí)驗(yàn)操作失誤導(dǎo)致感染違規(guī)操作導(dǎo)致感染,實(shí)驗(yàn)室生物安全的提出,1971年體外重組DNA的成功,引起了生物安全風(fēng)波；1975年2月24～27日在美國(guó)加利福利亞的Asilomar召開(kāi)了第一次國(guó)際生物安全會(huì)議，劍橋分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室Sydney Brenner在會(huì)議上提出，生物危害不僅僅在于會(huì)引起實(shí)驗(yàn)人員何種疾病，也不是

9、看看上周做的實(shí)驗(yàn)對(duì)今天有何害處。生物危害是一種綜合的、長(zhǎng)期的效應(yīng)，它可能對(duì)其他生物和環(huán)境帶來(lái)一些潛在的、間接的影響，也可能在近期并不表現(xiàn)出來(lái)，而經(jīng)過(guò)一個(gè)潛伏期后才表現(xiàn)危害。從而“實(shí)驗(yàn)室生物安全”引起人類的高度重視。1979年美國(guó)學(xué)者Pike.R.M在他的一篇評(píng)論中指出“生物安全知識(shí)、防護(hù)技術(shù)和設(shè)備對(duì)防止絕大多數(shù)實(shí)驗(yàn)室感染的發(fā)生是非常有用的"。,國(guó)際實(shí)驗(yàn)室生物安全發(fā)展的主要事件,,我國(guó)實(shí)驗(yàn)室生物安全發(fā)展的主要事件,二、實(shí)驗(yàn)室生

10、物安全的現(xiàn)狀,國(guó)外實(shí)驗(yàn)室生物安全現(xiàn)狀建立了系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范；建立了有效的生物安全管理機(jī)制；定期的實(shí)驗(yàn)室生物安全學(xué)術(shù)交流和人員培訓(xùn),有專業(yè)學(xué)術(shù)期刊；定期修改、補(bǔ)充和完善生物安全指南；建立了生物安全柜標(biāo)準(zhǔn)，生物安全柜廣泛使用。,二、實(shí)驗(yàn)室生物安全的現(xiàn)狀,國(guó)內(nèi)實(shí)驗(yàn)室生物安全現(xiàn)狀尚沒(méi)有建立系統(tǒng)的實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)范；尚沒(méi)有建立有效的生物安全管理機(jī)制；無(wú)實(shí)驗(yàn)室生物安全學(xué)術(shù)交流和有專業(yè)學(xué)術(shù)期刊，人員培訓(xùn)不系統(tǒng)、不規(guī)范；生物安

11、全柜沒(méi)有廣泛使用，有相當(dāng)一部分實(shí)驗(yàn)室使用超凈工作臺(tái)。,實(shí)驗(yàn)室生物安全存在的問(wèn)題,缺乏有效的實(shí)驗(yàn)室生物安全評(píng)價(jià)體系沒(méi)有對(duì)BSL－3以上實(shí)驗(yàn)室的生物安全評(píng)價(jià)體系；沒(méi)有實(shí)驗(yàn)室特殊操作環(huán)節(jié)、技術(shù)和方法的生物安全評(píng)價(jià)方法； 寄生蟲(chóng)實(shí)驗(yàn)室感染呈上升趨勢(shì)；實(shí)驗(yàn)室病原微生物交叉污染，導(dǎo)致感染是新的趨勢(shì)。,實(shí)驗(yàn)室生物安全存在的問(wèn)題,沒(méi)有系統(tǒng)的基礎(chǔ)理論和生物安全教育、培訓(xùn)機(jī)制實(shí)驗(yàn)室生物安全也越來(lái)越重要，但沒(méi)有系統(tǒng)的學(xué)科理論；缺乏有效的生物安全教

12、育。美國(guó)的少數(shù)大學(xué)剛剛開(kāi)始在大學(xué)開(kāi)設(shè)生物安全課程。,實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和管理體系,實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)WHO的《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》；USA的>(BMBL) USA的> USA的《生物危害主要防護(hù)：生物安全柜的選擇、安裝和使用》 USA的《II級(jí)生物安全柜――NSF國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)/美國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)》,實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和管理體系,實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)USA的42 CFR Part 73《選擇的病原微生物和毒

13、素的擁有、使用和運(yùn)輸》；USA的>加拿大的《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》；中國(guó)的GB19489－2004《實(shí)驗(yàn)室－－生物安全通用要求》；中國(guó)的WS233－2002《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求》等。,實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和管理體系,實(shí)驗(yàn)室生物安全管理體系（三級(jí)管理）國(guó)家生物安全專家委員會(huì)研究單位（或機(jī)構(gòu)）生物安全委員會(huì)實(shí)驗(yàn)室生物安全員,,上,下,實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和管理體系,國(guó)家生物安全管理專家委員會(huì)

14、：負(fù)責(zé)制定實(shí)驗(yàn)室生物安全管理的各種規(guī)范、指南或法律法規(guī)等；負(fù)責(zé)培訓(xùn)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理人員；負(fù)責(zé)全國(guó)BSL－3以上的實(shí)驗(yàn)室的建設(shè)、安全評(píng)價(jià)和驗(yàn)收；各種有害生物因子的生物危害評(píng)價(jià)等。,實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和管理體系,單位（或機(jī)構(gòu)）生物安全管理委員會(huì)，負(fù)責(zé)本單位所有實(shí)驗(yàn)室的生物安全工作：評(píng)估本單位涉及生物危害的各種活動(dòng)的生物安全防護(hù)措施；各種實(shí)驗(yàn)室生物安全管理制度的落實(shí)；實(shí)驗(yàn)室生物安全的日常管理；安全設(shè)施和設(shè)備的定期檢測(cè)和

15、維護(hù)、人員培訓(xùn)等。,實(shí)驗(yàn)室生物安全相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和管理體系,實(shí)驗(yàn)室生物安全管理員：具體負(fù)責(zé)實(shí)驗(yàn)室生物安全措施的落實(shí)、監(jiān)督、日常管理等。,新發(fā)傳染病對(duì)實(shí)驗(yàn)室生物安全需求,從1980年至今，各種新發(fā)和再發(fā)傳染病已有40多種，對(duì)人類健康構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅;特別是2003年的SARS和2004年高致病性禽流感的暴發(fā)流行再一次給人類提出了公共衛(wèi)生的安全防范的警告。,新發(fā)傳染病對(duì)實(shí)驗(yàn)室生物安全需求,在這些新發(fā)傳染病中，絕大多數(shù)病原體屬于危險(xiǎn)等級(jí)3或4

16、的，對(duì)它們的診斷、基礎(chǔ)研究和疫苗研制都必須在BSL－3實(shí)驗(yàn)室或－4實(shí)驗(yàn)室中，即實(shí)驗(yàn)室生物安全程度要求非常高。隨著國(guó)家公共衛(wèi)生體系、動(dòng)物疫病預(yù)防體系的建設(shè),實(shí)驗(yàn)室生物安全的硬件建設(shè)和軟件建設(shè)也將隨之加強(qiáng)。,新發(fā)傳染病對(duì)實(shí)驗(yàn)室生物安全需求,實(shí)驗(yàn)室生物安全的建設(shè)必須遵守國(guó)家的相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和管理?xiàng)l例：國(guó)務(wù)院的《病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全管理?xiàng)l例》（2004發(fā)布）；GB19489－2004《實(shí)驗(yàn)室－－生物安全通用要求》（認(rèn)可標(biāo)準(zhǔn)）WS233－2

17、002《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》；農(nóng)業(yè)部302號(hào)令《獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室生物安全管理規(guī)范》（2003）,三、醫(yī)療機(jī)構(gòu)實(shí)驗(yàn)室生物安全隱患與對(duì)策,血、尿、便、痰等各種“未知疾病標(biāo)本”是每個(gè)醫(yī)院檢驗(yàn)工作者每時(shí)每刻都面臨的生物安全隱患。據(jù)衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心調(diào)查了解，目前全國(guó)9萬(wàn)多家醫(yī)院的臨床實(shí)驗(yàn)室和檢驗(yàn)科幾乎都沒(méi)有配置最基本的生物安全防護(hù)設(shè)備——生物安全柜。,衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心主任申子瑜研究員在接受記者采訪時(shí)指出，醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)室和檢驗(yàn)

18、科與專業(yè)的疾病預(yù)防控制機(jī)構(gòu)、科研機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室有所不同，他們面對(duì)的是就診者未知疾病的標(biāo)本，既無(wú)法預(yù)先判斷標(biāo)本中所帶的致病微生物的高危程度，更難確定哪種類型的檢測(cè)應(yīng)該在哪級(jí)的生物安全實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。,根據(jù)世界衛(wèi)生組織《實(shí)驗(yàn)室生物安全手冊(cè)》和衛(wèi)生部行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)《微生物和生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》，醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)室和檢驗(yàn)科因接觸可能含有致病微生物的標(biāo)本，最低也應(yīng)達(dá)到二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室要求。但是，在這一高危環(huán)境工作的醫(yī)院臨床實(shí)驗(yàn)室和檢驗(yàn)科，目前

19、幾乎都沒(méi)有配備必要的生物安全柜或其它物理遏制裝置，這對(duì)于當(dāng)前需要重點(diǎn)防控的SARS、人禽流感、鼠疫及艾滋病等傳染病是極為不利的。,尤其是對(duì)于檢驗(yàn)科內(nèi)風(fēng)險(xiǎn)級(jí)別較高的、接觸高危標(biāo)本幾率較大的區(qū)域，如微生物和分子生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室等更應(yīng)予以高度重視。為此，申子瑜主任呼吁，應(yīng)盡快制定切實(shí)符合醫(yī)院實(shí)際情況的《臨床實(shí)驗(yàn)室生物安全防護(hù)管理辦法》。,必須杜絕各類生物安全事故,2004年7月8日，在衛(wèi)生部召開(kāi)的全國(guó)疾病預(yù)防控制系統(tǒng)電視電話會(huì)議上，衛(wèi)生部常務(wù)

20、副部長(zhǎng)高強(qiáng)要求全國(guó)疾病預(yù)防控制系統(tǒng)和醫(yī)療機(jī)構(gòu)切實(shí)采取有效措施，加強(qiáng)生物實(shí)驗(yàn)室的安全管理工作。高強(qiáng)指出，這次實(shí)驗(yàn)室污染事件給衛(wèi)生系統(tǒng)的生物安全管理工作敲響了警鐘，加強(qiáng)生物實(shí)驗(yàn)室的安全是當(dāng)前衛(wèi)生系統(tǒng)面臨的一項(xiàng)重要而緊迫的任務(wù)。今后要做好以下工作：,一、堅(jiān)持依法管理，增強(qiáng)安全意識(shí)，落實(shí)管理責(zé)任 二、制定有效措施，切實(shí)維護(hù)科研人員健康： 1. 要努力改善科研條件，特別是從事高風(fēng)險(xiǎn)科研的崗位，要配備必要的設(shè)施和設(shè)備；

21、 2. 嚴(yán)格執(zhí)行有關(guān)科研人員健康監(jiān)測(cè)和報(bào)告制度，一旦出現(xiàn)情況，做到早發(fā)現(xiàn)、早報(bào)告、早隔離、早治療； 3. 落實(shí)有關(guān)人員定點(diǎn)醫(yī)院治療辦法，既保護(hù)科研人員有效治療，又防止向社會(huì)擴(kuò)散。,三、加強(qiáng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)的生物安全管理工作， 提高醫(yī)療機(jī)構(gòu)識(shí)別傳染病的能力： 1. 加強(qiáng)對(duì)醫(yī)務(wù)人員的培訓(xùn)，提高醫(yī)務(wù)人員對(duì)傳染病的警惕意識(shí)； 2. 二是要切實(shí)加強(qiáng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)醫(yī)院感染控制工

22、作； 3. 三是吸取這次事故的教訓(xùn)，加強(qiáng)醫(yī)療機(jī)構(gòu)檢驗(yàn)科和有關(guān)生物實(shí)驗(yàn)室的安全管理，對(duì)醫(yī)療機(jī)構(gòu)中病原微生物比較集中的區(qū)域和密切接觸病原微生物的部門(mén)，要配備必要的通風(fēng)櫥和二級(jí)生物安全柜，嚴(yán)格執(zhí)行管理制度和操作規(guī)程。,對(duì)策,硬件：設(shè)施、設(shè)備、儀器軟件：管理（制度、規(guī)章、SOP文件等，關(guān)鍵在執(zhí)行）、人員培訓(xùn),四、生物實(shí)驗(yàn)室設(shè)施及設(shè)備要求,依據(jù)傳染性實(shí)驗(yàn)室的生物防范分級(jí)及適用范圍實(shí)驗(yàn)室設(shè)施管理設(shè)備,依據(jù),中華人民共和

23、國(guó)衛(wèi)生行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)（WS233-2002，2003年8月1日實(shí)施）《微生物及生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全通用準(zhǔn)則》美國(guó)NIH及CDC（1999年第四版）《微生物及生物醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室生物安全》美國(guó)NIH及CDC （1993年第三版）《General Laboratory Health and Safety》WHO （2003年第二版） 《LABORATORY BIOSAFETY MANUAL （interim guidelines）》,傳染

24、性實(shí)驗(yàn)室的生物防范分級(jí) 及適用范圍,據(jù)所處理的微生物及其毒素的危害程度 分為四級(jí)，依次為： 一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-1相當(dāng)于P1） 無(wú)致病作用的微生物，如教學(xué)的普通微生物實(shí)驗(yàn)室等 二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-2相當(dāng)于P2 ) 具有中等潛在危害的微生物。,三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-3相當(dāng)于P3 ) 呼吸傳播，使人傳染嚴(yán)重甚至是致病

25、微生物及其毒素，傳播途徑明，目前已有疫苗 四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-4相當(dāng)于P4 ) 高度危險(xiǎn)性，通過(guò)氣溶膠傳播或傳播途徑不明，目前尚無(wú)疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。,一級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室 無(wú)須使用生物安全柜 應(yīng)穿工作服，手上有皮膚破損戴手套 實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)和建造無(wú)特殊要求： 有可開(kāi)啟的窗戶，應(yīng)設(shè)置紗窗，設(shè)洗手池， 圍護(hù)結(jié)構(gòu)內(nèi)表面應(yīng)易于清潔。 地面應(yīng)防滑、無(wú)縫

26、隙，不得鋪設(shè)地毯。 實(shí)驗(yàn)臺(tái)表面應(yīng)不透水，耐腐蝕、耐熱， 有專門(mén)放置生物廢棄物容器的臺(tái)（架）,二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-2） 1、適用于： (1) 含漱液、血清和血液等樣品的診斷檢測(cè) (2) 溶液、固定或用其他方法處理滅活的病毒 和/或無(wú)傳染性病毒基因片段 （3）常規(guī)的細(xì)菌和毒素檢測(cè) （4）能產(chǎn)生氣溶膠的樣品處理 （5）

27、臨床樣品的包裝、分裝 （6） 離心管和離心機(jī)轉(zhuǎn)頭的封閉與開(kāi)啟,2、如下情況使用生物安全柜： （1）致病微生物氣溶膠或?yàn)R出的操作應(yīng)在生物安全柜 （Ⅱ級(jí)生物安全柜為宜）（2）處理高濃度或大容量感染性材料均須在生物安全 柜 (Ⅱ級(jí)安全柜為宜）或物理抑制設(shè)備中進(jìn)行， 并使用個(gè)體防護(hù)設(shè)備。（3）上述材料的離心操作如果使用密封的離心機(jī)轉(zhuǎn)子 或安全離心杯，且它們只在生物

28、安全柜中開(kāi)閉和 裝載感染性材料，則可在實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。,3、二級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室的個(gè)人防護(hù)（1）當(dāng)操作不能在安全柜內(nèi)進(jìn)行，必須外部操作時(shí)， 必須使用面部保護(hù)（護(hù)目鏡、面罩、個(gè)體呼吸保護(hù) 用品或其他防濺出保護(hù)設(shè)備）。（2）應(yīng)穿工作服或罩衫，離開(kāi)時(shí)，不得穿著外出， 應(yīng)先在實(shí)驗(yàn)室中消毒，然后統(tǒng)一洗滌或丟棄。（3）當(dāng)手可能接觸感染材料，應(yīng)戴手套。如可能發(fā)生

29、 溢出或?yàn)R出，應(yīng)戴兩副手套，一次性手套不得清洗 和再次使用。,4、二級(jí)生物安全實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)和建造的特殊要求。 （1）應(yīng)設(shè)置實(shí)施各種消毒方法的設(shè)施，如高壓滅菌 鍋、化學(xué)消毒裝置等對(duì)廢棄物進(jìn)行處理。 （2）應(yīng)設(shè)置洗眼裝置 （3）實(shí)驗(yàn)室出口應(yīng)有發(fā)光指示標(biāo)志 （4）實(shí)驗(yàn)室有不少于每小時(shí)3－4次的通風(fēng)換氣次數(shù)5、其他同一級(jí)實(shí)驗(yàn)室,三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室 （BSL- 3）或相當(dāng)于P3實(shí)驗(yàn)室

30、 1、適用于： 主要通過(guò)呼吸途徑使人傳染上嚴(yán)重的甚至是致死疾病的致病微生物及其毒素，通常已有預(yù)防傳染的疫苗。艾滋病病毒的研究（血清學(xué)實(shí)驗(yàn)除外）應(yīng)在三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行。,SARS標(biāo)本的病原學(xué)檢測(cè)要求在三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行，包括：（1）細(xì)胞培養(yǎng)的方法分離病毒（2）收集或濃縮病毒或其他培養(yǎng)產(chǎn)物（3）用活病毒或病毒的全基因接種動(dòng)物（4）咽拭子樣品的診斷檢測(cè),2、三級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備

31、和個(gè)體防護(hù) （1）必須安裝Ⅱ級(jí)或以上生物安全柜，感染性材料的 操作應(yīng)在生物安全柜中進(jìn)行。 （2）當(dāng)操作不得不在柜外進(jìn)行時(shí)，必須個(gè)體防護(hù)與使 用物理抑制設(shè)備綜合防護(hù)措施。 （3）在進(jìn)行感染性組織培養(yǎng)、有可能產(chǎn)生感染性氣溶 膠的操作時(shí)，必須使用個(gè)體防護(hù)設(shè)備。,（4）當(dāng)不能安全有效地將氣溶膠限定在一定范圍內(nèi) 時(shí)，應(yīng)

32、使用呼吸保護(hù)裝置。（5）人員在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室工作區(qū)前，穿背開(kāi)式防護(hù)服。（6）工作時(shí)戴手套（兩副為宜），一次性手套先 消毒后丟棄。（7）在實(shí)驗(yàn)室中必須配備有效的消毒劑、眼部清 洗劑或生理鹽水，且易取用，可配備應(yīng)急藥品。,3、實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)和建造的特殊要求（1）選址：可與其他用途房屋設(shè)在一棟建筑物中，但必 須自成一區(qū)。（2）平面布局（圖1）（3）緩沖間是進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室必經(jīng)通道，必須設(shè)兩道連門(mén)，當(dāng)其中一

33、道門(mén)打開(kāi)時(shí)，另一道門(mén)自動(dòng)處于關(guān)閉狀態(tài)，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)所有的門(mén)均可自動(dòng)關(guān)閉。墻交角均為圓弧形 。（4）通風(fēng)：控制實(shí)驗(yàn)室氣流方向和壓強(qiáng)梯度。室內(nèi)空氣經(jīng)高效過(guò)濾后排出外，確保氣流由“清潔”區(qū)向“污染”域。不得安裝分體空調(diào)器。,圖1,4、安全裝置及特殊設(shè)備必須設(shè)置Ⅱ級(jí)或Ⅲ級(jí)生物安全柜 排風(fēng)必須經(jīng)過(guò)高效過(guò)濾器過(guò)。 不產(chǎn)蒸汽高壓滅菌鍋消毒裝置 傳遞窗雙門(mén)不得同時(shí)打開(kāi) 壓力顯示報(bào)警裝置 雙路供電洗手池必須為腳踏、肘動(dòng)或自動(dòng)開(kāi)關(guān)。實(shí)驗(yàn)

34、室內(nèi)外必須設(shè)置通訊系統(tǒng)，,四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室（BSL-4） （分安全柜型實(shí)驗(yàn)室和穿著正壓服型實(shí)驗(yàn)室）1、適用于高度危險(xiǎn)性，氣溶膠傳播或途徑不明，目前尚無(wú)疫苗或治療方法的致病微生物及其毒素。,2、個(gè)體防護(hù)要求（l）所有操作都必須在Ⅲ級(jí)生物安全柜中進(jìn)行。 如穿整體由生命維持系統(tǒng)供氣正壓工作服， 則相關(guān)操作可在Ⅱ級(jí)生物安全柜中進(jìn)行。（2）所有人員進(jìn)實(shí)驗(yàn)室，須換上全套實(shí)驗(yàn)室服，

35、 包括內(nèi)衣、內(nèi)褲、襯衣、鞋和手套等。 離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室，所有這些保護(hù)服在更衣室內(nèi)脫 光，淋浴后離開(kāi)。,3、四級(jí)生物安全防護(hù)實(shí)驗(yàn)室安全設(shè)備（1）獨(dú)立的建筑物或區(qū)域，通訊系統(tǒng)，閉路電視。（2）在三級(jí)防護(hù)實(shí)驗(yàn)室的要求上提高一個(gè)級(jí)別。（3）所有操作均在Ⅲ級(jí)生物安全柜中進(jìn)行、 如穿正壓工作服，則可在Ⅱ級(jí)柜中進(jìn)行。（由于一般醫(yī)院不可能設(shè)置四級(jí)生物安全

36、 防護(hù)實(shí)驗(yàn)室，故詳細(xì)資料省略）,生物安全實(shí)驗(yàn)室分級(jí),,一 實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人職責(zé),組織編寫(xiě)安全手冊(cè)檢查督促執(zhí)行情況培訓(xùn)工作人員根據(jù)需要更正完善政策購(gòu)置必要的設(shè)備,二 操作要求,標(biāo)準(zhǔn)微生物操作：進(jìn)出實(shí)驗(yàn)室有限制不準(zhǔn)在實(shí)驗(yàn)室進(jìn)食、飲水和抽煙不準(zhǔn)用嘴吸吸管尖銳物處理制度實(shí)驗(yàn)室清潔、消毒制度垃圾處理制度防止昆蟲(chóng)、嚙齒類動(dòng)物進(jìn)入的措施特殊操作：特殊方法的特定的操作要求,三 人員防護(hù),一級(jí)防護(hù)：穿工作服、戴工作帽

37、和口罩。每次實(shí)驗(yàn)后立即進(jìn)行手清洗和消毒。 手消毒用0.3—0.5%碘伏消毒液或快速手消毒劑（洗必泰醇、新潔爾滅醇、75%酒精等）揉搓１—３分鐘。,人員防護(hù),二級(jí)防護(hù)： 穿工作服、隔離衣、鞋套，戴手套、工作帽。對(duì)病人實(shí)施近距離操作時(shí)，戴防護(hù)眼鏡。 注意呼吸道及粘膜防護(hù)。 每次實(shí)驗(yàn)后立即進(jìn)行手清洗和消毒。 手消毒用0.3—0.5%碘伏消毒液或快速手消毒劑（洗必泰醇、新潔爾滅醇、75%酒精等）揉搓１—３分鐘。,人員防

38、護(hù),三級(jí)防護(hù)： 除二級(jí)防護(hù)外，還應(yīng)當(dāng)加戴全面型呼吸防護(hù)器。,實(shí)驗(yàn)室設(shè)置,NIH CDC 病源 操作 一級(jí)屏障 二級(jí)屏障P1 BSL—1 不會(huì)經(jīng)常引發(fā) 標(biāo)準(zhǔn)的 不要求 開(kāi)放實(shí)驗(yàn)臺(tái)、NOTICE 健康成人疾病 微生物

39、 洗手池 操作,實(shí)驗(yàn)室設(shè)置,NIH CDC 病原 操作 一級(jí)屏障 二級(jí)屏障P2 BSL –2 人類病原菌 BSL—1操作 1級(jí)、2級(jí) BSL

40、-1加： CAUTION 因皮膚傷口、 加： 生物安全柜， 高壓滅菌鍋 吸入、黏膜曝 1、  限制進(jìn)入 實(shí)驗(yàn)服、手套、 露而發(fā)生危險(xiǎn) 2、有生物危險(xiǎn) 若需要?jiǎng)t采取

41、 警告標(biāo)志 面部保護(hù)措施 3、“銳器” 安全措施

42、 4、生物安全 手冊(cè)，其中規(guī) 定廢物消毒和

43、 醫(yī)療觀察,實(shí)驗(yàn)室設(shè)置,NIH CDC 病源 操作 一級(jí)屏障 二級(jí)屏障P3 BSL-3 內(nèi)源性和 BSL-2操作 1級(jí)、2級(jí) BSL-2加：WARNING 外源性病源， 加： 生物安全柜 1和進(jìn)入走廊隔開(kāi)

44、 可通過(guò)氣溶 1、控制進(jìn)入 保護(hù)性實(shí)驗(yàn)服、 2雙門(mén)進(jìn)入， 膠傳播，能 2、所有廢物消毒 手套、若需要 門(mén)自動(dòng)關(guān)閉 導(dǎo)致嚴(yán)重后 3、洗滌前， 則采取呼吸 3排出的空氣

45、 果或生命危險(xiǎn) 實(shí)驗(yàn)服消毒 保護(hù)措施 循環(huán) 4、有基礎(chǔ)血清 4實(shí)驗(yàn)室內(nèi)負(fù)壓,實(shí)驗(yàn)室設(shè)置,NIH CDC 病原 操作 一級(jí)屏障 二級(jí)屏障P3 BS

46、L-3 內(nèi)源性和 BSL-2操作 1級(jí)、2級(jí) BSL-2加：WARNING 外源性病原， 加： 生物安全柜 1和進(jìn)入走廊隔開(kāi) 可通過(guò)氣溶 1、控制進(jìn)入 保護(hù)性實(shí)驗(yàn)服、 2雙門(mén)進(jìn)入， 膠傳播，能

47、2、所有廢物消毒 手套、若需要 門(mén)自動(dòng)關(guān)閉 導(dǎo)致嚴(yán)重后 3、洗滌前， 則采取呼吸 3排出的空氣不 果或生命危險(xiǎn) 實(shí)驗(yàn)服消毒 保護(hù)措施 循環(huán)

48、 4、有基礎(chǔ)血清 4實(shí)驗(yàn)室內(nèi)負(fù)壓,生物安全柜空氣過(guò)濾能力分1、2、3級(jí)2級(jí)為HEPA（高效微粒子空氣，能99.99%地去除0.3微米以上顆粒)；3級(jí)為UEPA盡量選擇使用 空氣100%外排, 壓縮機(jī)功率大,五、如何選購(gòu)生物安全柜,生物安全設(shè)備分類,1.超凈臺(tái) 2. CLASS I 一級(jí)生物安全柜 3.

49、CLASS II 二級(jí)生物安全柜 4. CALSS III三級(jí)生物安全柜（又稱手套柜）,超凈臺(tái),正壓柜氣流從頂部或底部經(jīng)過(guò)過(guò)濾器后從操作區(qū)正面流向工作臺(tái)面，被樣品污染的氣流排出柜外，沒(méi)有循環(huán)氣流。超凈臺(tái)保護(hù)樣品不受污染，適用于普通實(shí)驗(yàn)室或1級(jí)生物安全水平中對(duì)人員和環(huán)境無(wú)保護(hù)要求的實(shí)驗(yàn)。,生物安全柜與超凈工作臺(tái) 超凈工作臺(tái)是潔凈的工作環(huán)境，無(wú)菌操作，生物安全柜除超凈臺(tái)具備的功能外，主要是高效過(guò)濾和全排式空氣流向，使傳染性標(biāo)

50、本對(duì)空氣的污染不會(huì)危害操作者，達(dá)到生物防護(hù)的目的。因此超凈工作臺(tái)不能代替生物安全柜。,CLASS I一級(jí)生物安全柜,負(fù)壓柜氣流經(jīng)操作人員向內(nèi)進(jìn)入工作臺(tái)面，被污染的氣流通過(guò)HEPA過(guò)濾器外排出柜外，沒(méi)有循環(huán)氣流。CLASS I級(jí)BSC保護(hù)操作人員和環(huán)境不受污染，適用于生物安全水平中對(duì)實(shí)驗(yàn)樣品無(wú)保護(hù)要求的實(shí)驗(yàn)。,CLASS II 二級(jí)生物安全柜,層流負(fù)壓柜 生物安全柜的II級(jí)標(biāo)準(zhǔn) ——垂直層流氣流：起保護(hù)操作人員作用；氣

51、流向內(nèi)、經(jīng)過(guò)HEPA過(guò)濾的流向工作臺(tái)面保護(hù)實(shí)驗(yàn)樣品 ——外排氣流：經(jīng)過(guò)HEPA過(guò)濾保護(hù)環(huán)境CLASSII級(jí)生物安全柜適用于1、2、3級(jí)生物安全水平的實(shí)驗(yàn)。它們可以安全的保護(hù)樣品、人員和環(huán)境。CLASS II 級(jí)生物安全柜根據(jù)結(jié)構(gòu)以及氣流分配的不同，主要是外排氣流，分為A型（30%排在室內(nèi) ） 、B型B型中又分為 B1 （70%接管道外排） B2 （100%接管道外排）

52、 B3 （30% 接管道外排）,CLASS II A生物安全柜,（1）從工作臺(tái)開(kāi)口處向內(nèi)進(jìn)入的氣流最低流速平均為0.38米/秒(0.75ft/min)；（2）由向下的氣流和從開(kāi)口處向內(nèi)進(jìn)入的氣流混合后部分經(jīng)HEPA高效過(guò)濾形成向下的氣流進(jìn)入工作區(qū)，部分（30%氣流）經(jīng)HEPA過(guò)濾后外排在室內(nèi)；（3）允許經(jīng)HEPA過(guò)濾的外排氣流在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)排放；（4）被污染的管道和氣流通道為正

53、壓狀態(tài)。（5）A型BSC適合用于符合BSL1、BSL2、BSL3級(jí)中揮發(fā)性毒性的化學(xué)品和揮發(fā)性放射核物質(zhì)試劑的實(shí)驗(yàn)。這類化學(xué)物或核放射物隨循環(huán)氣流回到工作區(qū)時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)不產(chǎn)生影響的實(shí)驗(yàn)。,CLASS II B1生物安全柜,（1）從工作臺(tái)開(kāi)口處向內(nèi)進(jìn)入的氣流最低流速平均為0.5米/秒(100ft/min)；（2）經(jīng)過(guò)HEPA高效過(guò)濾的向下氣流大部分由未經(jīng)污染的向內(nèi)進(jìn)入的氣流和循環(huán)氣流組成（3）大部分被污染的向下的氣流（70%）通過(guò)專用

54、的管道經(jīng)HEPA過(guò)濾后接管道排至室外（4）所有受生物污染的管道和氣流通道均在負(fù)壓狀態(tài)下或被負(fù)壓的管道或氣流通道包圍。（5）B1 型BSC適用于符合BSL1、BSL2、BSL3級(jí)中的只有極微量揮發(fā)性毒性化學(xué)物或有痕跡量放射核物質(zhì)做添加物的微生物研究，這類化學(xué)物或核放射物隨循環(huán)氣流回到工作區(qū)時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)不產(chǎn)生影響的實(shí)驗(yàn)。,CLASS II B2生物安全柜,（1）從工作臺(tái)開(kāi)口處向內(nèi)進(jìn)入的氣流最低流速平均為0.5米/秒（100ft/min）

55、；（2）來(lái)自實(shí)驗(yàn)室內(nèi)或室外的經(jīng)過(guò)HEPA過(guò)濾的向下氣流 （即：向下的氣流中沒(méi)有在安全柜內(nèi)循環(huán)的氣流）；（3）所有向內(nèi)進(jìn)入的氣流和向下的氣流均通過(guò)HEPA過(guò)濾后排到室外而不在柜內(nèi)循環(huán)，也不能排入實(shí)驗(yàn)室；100%接管道外排。（4）所有的被污染的管道和氣流通道都在負(fù)壓狀態(tài)下或被直接外排的負(fù)壓管道或氣流管道所包圍。（5）B2型BSC適用于符合BSL1、BSL2、BSL3中的使用少量的揮發(fā)性化學(xué)品和用痕跡量核放射物做添加劑的微生物實(shí)驗(yàn)研究

56、。,CLASS II B3生物安全柜,（1） 通過(guò)工作區(qū)開(kāi)口處進(jìn)入的氣流最低流速為0.5米/秒（100ft/min）；（2） 經(jīng)過(guò)HEPA過(guò)濾后的向下氣流是由共用外排風(fēng)道中的向下的氣流和內(nèi)向氣流組成；（3）全部外排到室外的氣流（30%）均經(jīng)過(guò)HEPA高效過(guò)濾；（4）所有經(jīng)生物污染的管道和氣流通道均為負(fù)壓狀態(tài)或被負(fù)壓管道或氣流通道包圍。（5）適用于符合BSL1、BSL2、BSL3中帶有極微量揮發(fā)性毒性的化學(xué)品和用痕跡量核放射物

57、做添加劑、同時(shí)當(dāng)上述化學(xué)物隨循環(huán)氣流回到工作區(qū)時(shí)對(duì)實(shí)驗(yàn)不產(chǎn)生影響的實(shí)驗(yàn)。（6）它與CLASS II A型氣流方向相同，但與CLASS A型不同的是，它30%外排氣是接管道排到室外的。,CLASS III生物安全柜（手套柜）,--全封閉的、氣密結(jié)構(gòu)的通風(fēng)柜 通過(guò)與柜體聯(lián)結(jié)的橡膠手套進(jìn)行操作；柜內(nèi)保持至少120Pa的負(fù)壓(0.50wg)；供氣通過(guò)HEPA抽入內(nèi)；外排的氣流經(jīng)過(guò)雙層HEPA過(guò)濾或經(jīng)HEPA后再經(jīng)燃燒處理。

58、 CLASS III 型BSC適用于符合BSL1、 BSL2、BSL3、BSL4的生物實(shí)驗(yàn)。,生物安全柜異同,生物安全柜的分型：,Class I 級(jí)生物安全柜 Class II 級(jí)生物安全柜，其又具體分為： 1. Class II Type A 型生物安全柜(無(wú)外排裝置） 2. Class II Type B1 型生物安全柜（70%空氣外排） 3. Class II Type B2 型生物安全柜（1