弓形蟲SAG1-ROP2復合基因疫苗與免疫佐劑大腸埃希菌腸毒素B亞基對小鼠的免疫保護性研究.pdf

1、弓形蟲是一種廣泛寄生于人和動物有核細胞內的寄生原蟲,可以感染包括人類在內的所有哺乳動物,此蟲呈世界性分布,人群感染率相當高,許多國家的平均感染率在25％～50％。弓形蟲侵襲的細胞種類多,累及器官廣泛,臨床表現復雜。在免疫抑制或免疫缺陷患者中(如器官移植、惡性腫瘤、AIDS、長期使用免疫抑制劑等)可引起嚴重的器官損害(多見于腦和眼)。先天性感染是弓形蟲通過母嬰傳播的,可引起胎兒流產、死胎或畸胎,是造成兒童先天畸形、弱智及智力發(fā)育遲緩的重要

2、原因之一。此外,弓形蟲病也給畜牧業(yè)生產造成嚴重的經濟損失。迄今尚無治療弓形蟲病的特效藥物,因此研制安全有效的疫苗極為迫切。
　　 大量的動物和人體實驗表明,DNA疫苗不僅可以預防,還可以治療病原生物的感染。由于弓形蟲生活史較復雜,抗原成分具有發(fā)育階段的特異性或差異性。因此在研究有關弓形蟲疫苗的過程中,發(fā)展多種抗原組合、針對不同生活史發(fā)育階段的復合多價疫苗是研究弓形蟲疫苗過程中的一個發(fā)展方向與共識,這有助于克服單一抗原成分作為候選

3、疫苗的不足。
　　 SAG1抗原作為弓形蟲速殖子表面的主要抗原之一,具有高度的免疫原性和免疫保護性,是迄今應用最多的弓形蟲疫苗候選抗原。SAG1蛋白分布于弓形蟲速殖子表膜、速殖子內以及納蟲泡的管狀結構中,是誘導宿主免疫應答的主要靶抗原。能夠誘導機體產生IgG,IgM,IgE,IgA及sIgA,并可誘導細胞因子產生。
　　 ROP2蛋白是弓形蟲棒狀體分泌的一種蛋白,存在于弓形蟲速殖子、緩殖子及包囊期,它可誘導機體產生以Ig

4、A,IgM,IgG為主的體液免疫,還可被人特異性T細胞克隆識別而產生高水平的IFN-γ。SAG1和ROP2在蟲體入侵宿主的過程中相互促進,其相應的抗體可有效拮抗弓形蟲感染。
　　 DNA疫苗誘導體液免疫和細胞免疫的效率相對較低,尤其是在大型動物和人類中,影響了它的實際應用。我們選用大腸埃希菌腸毒素B亞基(LTB)真核表達質粒作為基因佐劑,以增強弓形蟲復合抗原基因SAG1-ROP2的免疫效果。
　　 LT是由產腸毒素E.c

5、oli分泌并存在于菌體周質中的一種外毒素,由A、B兩種亞單位組成,其中B亞單位既有較強的免疫原性,又有較強的黏膜佐劑效應,且毒力小、安全性高,是最有潛力的黏膜免疫佐劑之一?？诜捅莾冉臃NLT均可誘導黏膜和全身性的免疫應答,有效增強抗原蛋白的免疫原性。
　　 該研究選用弓形蟲復合抗原基因SAG1-ROP2及基因佐劑LTB通過黏膜方式免疫小鼠,觀察并研究其免疫保護性。結果表明復合基因疫苗的免疫效果明顯優(yōu)于單基因疫苗SAG1及ROP2