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文檔簡介
1、MTBE(Methyl tert-Butyl Ether,甲基叔丁基醚)是一種添加劑,用以提高汽油的辛烷值和燃燒效率,但由于其強水溶性和難降解性,使其成為潛在的地下水污染物質(zhì),而引起了世界各國的重視。 本文試圖通過考察MTBE降解菌株Methylibium petroleiphilum PM1(PM1)的全細(xì)胞蛋白差異,尋找MTBE降解途徑的特異蛋白。另外,試圖通過考察菌藻混合工藝對該菌降解MTBE效率的影響,尋求PM1高效降
2、解新工藝。 首先,考察了該菌以不同碳源底物(MTBE,TBA和丙酮)培養(yǎng)的全細(xì)胞蛋白SDS-PAGE電泳圖譜,結(jié)果發(fā)現(xiàn)以MTBE和TBA為底物培養(yǎng)的PM1菌全細(xì)胞蛋白電泳圖譜無明顯差別,而以丙酮為底物培養(yǎng)的PM1全細(xì)胞蛋白電泳圖譜與前兩者有明顯差異,分別在28 KD,42 KD以及66.2 KD處的有特異蛋白條帶。選取最明顯的差異條帶,即28 KD處蛋白條帶切割,并經(jīng)過水平電泳,透析,丙酮沉淀等步驟回收。利用銀染和雙向電泳檢測
3、,發(fā)現(xiàn)通過該方法能回收到較為單一的蛋白。通過肽質(zhì)量指紋譜鑒定后發(fā)現(xiàn)回收蛋白與弧菌的連接轉(zhuǎn)移蛋白最為接近。 考慮到PM1為好氧菌,氧氣的供給會對該菌降解MTBE起重要作用。故設(shè)計進(jìn)行了密閉系統(tǒng)中PM1菌與小球藻Chlorella ellipsoidea混合光照培養(yǎng)降解MTBE試驗,混合培養(yǎng)系統(tǒng)中小球藻的光合作用可為PM1提供氧氣,而PM1降解MTBE最終產(chǎn)生CO2可為小球藻生長提供碳源。結(jié)果顯示密閉光照培養(yǎng)系統(tǒng)中小球藻的存在確實
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