15-生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)--琥珀酸脫氫酶的作用及丙二酸的抑制作用

1、琥珀酸脫氫酶的作用及丙二酸的抑制作用琥珀酸脫氫酶的作用及丙二酸的抑制作用【目的】【目的】1掌握琥珀酸脫氫酶作用及丙二酸抑制作用的實(shí)驗(yàn)技術(shù)與原理。2深化理解酶的競爭性抑制作用的特點(diǎn)?！驹怼俊驹怼考∪饨M織含有的琥珀酸脫氫酶是一種結(jié)合蛋白酶，以FAD為輔基。它能催化琥珀酸脫氫生成延胡索酸，F(xiàn)AD接受氫生成FAD2H。體外實(shí)驗(yàn)以美藍(lán)(甲烯藍(lán))為受氫體，使美藍(lán)還原生成美白(甲烯白)。其反應(yīng)如下：琥珀酸脫氫酶活性越高，美藍(lán)脫色所需的時間越短，由

2、于美白易被空氣中的氧氧化成美藍(lán)。故實(shí)驗(yàn)需在無氧條件下進(jìn)行，可加一層液體石蠟以隔絕空氣。丙二酸與琥珀酸的化學(xué)結(jié)構(gòu)很相似，能和琥珀酸競爭與琥珀酸脫氫酶結(jié)合，從而抑制琥珀酸的脫氫作用。其抑制程度與抑制劑和底物二者的濃度有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)通過不同濃度的琥珀酸和丙二酸來觀察丙二酸對琥珀酸脫氫酶的抑制作用?！酒鞑摹俊酒鞑摹?研缽與剪刀2漏斗3紗布4恒溫水浴【試劑】【試劑】10.2molL琥珀酸溶液20.02molL琥珀酸溶液30.2molL丙二酸溶液美藍(lán)