四川邊茶對(duì)脂肪酸合酶抑制作用的研究.pdf

1、脂肪酸合酶(E.C-2.1.3.85，F(xiàn)AS)是參與體內(nèi)能量代謝的一種重要的酶，它以FAS Ⅰ和FAS Ⅱ兩種形式存在。近期的研究發(fā)現(xiàn)FAS Ⅰ是治療肥胖癥和新的癌癥化療的潛在雙重靶點(diǎn)，而FAS Ⅱ(FabG)抑制劑則有可能成為新型的抗生素：3T3一L1前脂肪細(xì)胞是向脂肪細(xì)胞的形態(tài)轉(zhuǎn)變前體，抑制前脂肪細(xì)胞分化即可減少脂肪細(xì)胞的增殖。 四川邊茶(康磚)是黑茶的一個(gè)主要品種，本論文以對(duì)邊茶提取物對(duì)FAS I和FabG的抑制作用，對(duì)F

2、AS Ⅰ抑制動(dòng)力學(xué)特征、作用方式和部位，最佳提取條件及邊茶泡茶方式的效率，以及對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化的抑制等問(wèn)題進(jìn)行了探索研究，并進(jìn)行了相關(guān)的分析討論。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明： 1.邊茶最佳萃取劑為50％左右的乙醇，在常溫下2～3 h即可接近最佳萃取效果。雖然和紅茶及綠茶相似，但邊茶的純水萃取效果要好于綠茶和紅茶，且溫度較高的水提取效果更好； 2.開(kāi)水浸泡邊茶的方法1小時(shí)可獲得最佳萃取條件下29％的抑制能力，二次泡茶1小時(shí)還

3、可以得到類似的抑制能力，兩次即可得到超過(guò)50％的有效物，比綠茶的開(kāi)水浸泡效率高出1倍； 3.四川邊茶的提取物能夠抑制動(dòng)物脂肪酸合酶(FAS I)的活性，不同年份的邊茶提取物對(duì)FAS全反應(yīng)的抑制能力不同，1972年的邊茶提取物對(duì)FAS的抑制能力最低(IC<,50>值為14.85μg/ml)，2001年的邊茶對(duì)FAS的抑制作用最強(qiáng)(IC<,50>值為5.31μg/ml)，抑制能力約是1972年的3倍： 4.邊茶提取物對(duì)FAS

4、 I還表現(xiàn)出較強(qiáng)時(shí)間依賴性的不可逆失活作用，其一級(jí)失活速度常數(shù)分別為：0.127(min.mg tea/ml)<'-1>(快相)和12.1×10<'-3>。(min.mgtea/ml)<'-1>(慢相)。且對(duì)酮酰還原反應(yīng)(KR)有較強(qiáng)抑制，但對(duì)沒(méi)有全反應(yīng)顯著，說(shuō)明KR功能域不是邊茶提取物抑制FAS I的主要作用部位； 5.邊茶提取物與底物乙酰輔酶A和丙二酸單酰輔酶A的競(jìng)爭(zhēng)性質(zhì)都是競(jìng)爭(zhēng)性與非競(jìng)爭(zhēng)性的混合型，這與綠茶對(duì)底物的競(jìng)爭(zhēng)性關(guān)

5、系有所差異，這說(shuō)明兩大茶類對(duì)FAS I的抑制有效物有所不同； 6.邊茶提取物對(duì)FAS Ⅱ的β酮酰還原酶(FabG)的抑制作用較強(qiáng)，這與對(duì)FAS I中酮酰還原反應(yīng)(KR)的抑制效果相似；但對(duì)FabG的抑制和對(duì).FAS I中KR的抑制能力卻不一致，提l{)(物刈兩者失活的表現(xiàn)一級(jí)速度常數(shù)分別為0.126(min·mg tea/ml)<'-1>和0.164(nlin.mg lea/m)<'-1>。去掉抑制劑濃度的影響，其二級(jí)速度常數(shù)k

6、<,2>分別為5.48×10<'-3>(min.mg tea/ml)<'-1>和6.76x10<'-3>(min.mg tea/ml)<'-1>。這可能與它們結(jié)構(gòu)上的差異有關(guān)： 7.邊茶萃取液對(duì)抑制3T3-L1前脂肪細(xì)胞分化、抑制脂肪積累具有一定的作用。但對(duì)其抑制表現(xiàn)與對(duì)FAS I和對(duì).FabG的抑制有較大差異，在抑制fAS活性實(shí)驗(yàn)中效果較好的2001年、1985年等邊茶對(duì)3T3-L1前脂肪細(xì)胞的抑制能力與分化對(duì)照組差異卻不明顯