診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告

1、實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告紅細(xì)胞計(jì)數(shù)試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^紅細(xì)胞計(jì)數(shù)實(shí)驗(yàn)1、掌握紅細(xì)胞計(jì)數(shù)方原理、方法及注意事項(xiàng)。2、掌握血細(xì)胞計(jì)數(shù)板的結(jié)構(gòu)試驗(yàn)器材：血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、顯微鏡、蓋玻片、試管、血紅蛋白吸管、生理鹽水實(shí)驗(yàn)原理：一定量的血液經(jīng)一定量等滲性稀釋液稀釋后，充入血細(xì)胞計(jì)數(shù)池中顯微鏡下計(jì)數(shù)一定容積內(nèi)的細(xì)胞，再換算成每升標(biāo)本的細(xì)胞數(shù)報(bào)告。操作步驟：1、取紅細(xì)胞稀釋液2.0ml毫升，放入一小試管內(nèi)。2、用血紅蛋白吸管吸血至l0ul處。3、擦去管尖外部余血

2、將血液迅速輕輕吹入盛有紅細(xì)胞稀釋液的試管內(nèi)，上清液嗽洗吸管23次，立即搖勻。4、將計(jì)數(shù)池與蓋玻片用軟布料擦凈，將蓋玻片覆蓋于計(jì)數(shù)池上。5、用吸管吸取混勻的紅細(xì)胞懸液，充入計(jì)數(shù)池中。6、待2—3分鐘，讓紅細(xì)胞完全下沉后，將計(jì)數(shù)板平放在顯微鏡臺(tái)上，用低倍鏡觀察，如紅細(xì)胞分布均勻即可換高倍鏡進(jìn)行計(jì)數(shù)。紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的區(qū)域：中心大方格中的5個(gè)中方格(正中一個(gè)和四角各一個(gè))。計(jì)數(shù)原則：數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右的計(jì)數(shù)原則即凡壓在中方格邊線(雙線)上的紅細(xì)

3、胞，只計(jì)上側(cè)與左側(cè)線上的細(xì)胞，而壓在下側(cè)與右側(cè)線上者不計(jì)入。計(jì)算：紅細(xì)胞數(shù)l=5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)510201106或紅細(xì)胞數(shù)l=5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)1001012式中55個(gè)中方格換算成1個(gè)大方格101個(gè)大方格容積為0.1ul，換算成1.0ul。201血液的稀釋倍數(shù)106由u1換算成l數(shù)據(jù)處理：rbc:l0l12參考值男:(4～5.5)10l12女：（3.5～5）10l12新生兒：（6～7）10l12答案不唯一，言之有理即可注意事項(xiàng)：1

4、、吸管、試管要注意清潔、干燥以防溶血，操作迅速避免血液凝固，如有血凝塊應(yīng)重新采血。2充液前，紅細(xì)胞復(fù)液要充分搖勻，紅細(xì)胞懸液注入計(jì)數(shù)池內(nèi)要求分布均勻，不可有氣泡，亦不可有多余液體外溢。3、中方格內(nèi)紅細(xì)胞分布應(yīng)均勻，健康成人每中方格紅細(xì)胞數(shù)約為80—100個(gè)，各中方格內(nèi)之紅細(xì)胞相近，如懸殊過大(超過10個(gè)細(xì)胞以上的)應(yīng)重混勻再充填。實(shí)驗(yàn)診斷學(xué)實(shí)驗(yàn)報(bào)告血紅蛋白測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^血紅蛋白測(cè)定1、氰化高鐵血紅蛋白比色法原理及技術(shù)。2、掌握紅血紅

5、蛋白測(cè)定的原理、方法及注意事項(xiàng)。試驗(yàn)儀器：試管、微量吸管、分光光度計(jì)6、待2—3分鐘，讓紅細(xì)胞完全下沉后，將計(jì)數(shù)板平放在顯微鏡臺(tái)上，用低倍鏡觀察，如紅細(xì)胞分布均勻即可換高倍鏡進(jìn)行計(jì)數(shù)。紅細(xì)胞計(jì)數(shù)的區(qū)域：中心大方格中的5個(gè)中方格(正中一個(gè)和四角各一個(gè))。計(jì)數(shù)原則：數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右的計(jì)數(shù)原則即凡壓在中方格邊線(雙線)上的紅細(xì)胞，只計(jì)上側(cè)與左側(cè)線上的細(xì)胞，而壓在下側(cè)與右側(cè)線上者不計(jì)入。計(jì)算：紅細(xì)胞數(shù)l=5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)5102011

6、06或紅細(xì)胞數(shù)l=5個(gè)中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)1001012式中55個(gè)中方格換算成1個(gè)大方格101個(gè)大方格容積為0.1ul，換算成1.0ul。201血液的稀釋倍數(shù)106由u1換算成l數(shù)據(jù)處理：rbc:l0l12參考值男:(4～5.5)10l12女：（3.5～5）10l12新生兒：（6～7）10l12答案不唯一，言之有理即可注意事項(xiàng)：1、吸管、試管要注意清潔、干燥以防溶血，操作迅速避免血液凝固，如有血凝塊應(yīng)重新采血。2充液前，紅細(xì)胞復(fù)液要充分搖勻

7、，紅細(xì)胞懸液注入計(jì)數(shù)池內(nèi)要求分布均勻，不可有氣泡，亦不可有多余液體外溢。3、中方格內(nèi)紅細(xì)胞分布應(yīng)均勻，健康成人每中方格紅細(xì)胞數(shù)約為80—100個(gè)，各中方格內(nèi)之紅細(xì)胞相近，如懸殊過大(超過10個(gè)細(xì)胞以上的)應(yīng)重混勻再充填。血紅蛋白測(cè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)康模和ㄟ^血紅蛋白測(cè)定1、氰化高鐵血紅蛋白比色法原理及技術(shù)。2、掌握紅血紅蛋白測(cè)定的原理、方法及注意事項(xiàng)。試驗(yàn)儀器：試管、微量吸管、分光光度計(jì)實(shí)驗(yàn)原理：血紅蛋白中的亞鐵離子（fe2）被高鐵氰化鉀氧化成高離

8、子（fe3），血紅蛋白轉(zhuǎn)化成高鐵血紅蛋白，高鐵血紅蛋白與氰離子（cn）結(jié)合，生成穩(wěn)定的氰化高鐵血紅蛋白。用光電比色計(jì)在540nm波長(zhǎng)比色。從hicn參考液制作的標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀取血紅蛋白克數(shù)。操作步驟：1、取試劑5毫升加入血液20ul混勻置5分鐘2、用721光電比色儀，540nm波長(zhǎng)，試劑為空白調(diào)0點(diǎn)比色，讀取光密度，查標(biāo)準(zhǔn)曲線得結(jié)果。計(jì)算：血紅蛋白（gl）=測(cè)定管吸光度367.7數(shù)據(jù)處理：答案不唯一，言之有理即可hb：g／l參考值男0.4