痰涂片鏡檢操作規(guī)范

1、痰涂片鏡檢操作規(guī)范,寧波市疾病預(yù)防控制中心 平國華,一、標(biāo)本的來源與收集,初診時留取標(biāo)本數(shù)量,以三份標(biāo)本的陽性檢出例數(shù)作為100％，留取一份標(biāo)本的陽性檢出例數(shù)占全部陽性例數(shù)的80％，留取兩份標(biāo)本的陽性檢出例數(shù)占全部陽性檢出例數(shù)的95％。,,不同痰液涂片陽性率表（僅供示例） 性質(zhì) 例數(shù) 陽性數(shù) 陽性率 干酪樣痰 55 36 65.5% 血性痰 46

2、 16 34.8% 粘液性痰 529 56 10.6% 水樣痰 92 7 7.6%,二、痰標(biāo)本制作前的準(zhǔn)備,（一）、脫脂玻片（95%乙醇浸泡）（二）、竹簽（三）、痰涂片模板,,脫脂玻片95%的乙醇浸泡后晾干備用,,,痰涂片摸板10mm×20mm的橢圓 于玻片右2/3的中心,,使用鉛筆在磨砂面上標(biāo)記,www.themeg

3、allery.com,三、痰涂片的制作,標(biāo)本靜置消毒確保標(biāo)本編號一致（初診3個、治療或隨訪2個）輕輕打開蓋子挑取標(biāo)本中膿樣或可疑部分按照模板，從橢圓形中心開始，從里→外→里，反復(fù)多次涂抹，稍晾，待痰膜水分揮發(fā)部分，視痰膜厚薄程度，再次挑取適量痰液，涂至滿意為止（循環(huán)覆蓋）,不得使用火焰加熱的方法加速痰膜干燥,×,太厚 適宜

4、 太薄,,,痰膜的厚薄,,,,水樣痰的涂法 可用反復(fù)多次覆蓋法，實(shí)在挑取不到什么東西，先用吸管吸取適量標(biāo)本（標(biāo)本一定要靜置），稍晾（時間較長），再用竹簽涂抹均勻致滿意涂抹完的標(biāo)本自然干燥后，再火焰固定（5秒內(nèi)來回4次）,四、抗酸染色原理,初染時堿性復(fù)紅與細(xì)胞壁的分枝菌酸結(jié)合脫色時脫色液不能將堿性復(fù)紅從抗酸菌細(xì)胞壁上洗脫抗酸菌的染色保持初染的顏色復(fù)染提供背景對比,五、注意事項,加熱固定后待徹底冷卻染液覆蓋整

5、個痰膜染架要平衡玻片間保持一定距離沖洗用背面沖洗法脫色時人不能離開,,,,背面沖洗,,脫色,討論（1）：痰盒正確否？right?,那一種可以接受？,討論（2）滴加染液和加熱,討論（2）滴加染液和加熱,討論（2）滴加染液和加熱,附件（僅供參考）,六、評價痰涂片,位置大?。?0mm×20mm）厚?。▌偤猛高^報紙的5號字體，鏡下每個視野20個左右細(xì)胞）染色（肉眼看天藍(lán)色,無紅/紫色斑塊）脫落（＜10%痰膜面積）,單一

6、的抗酸菌,,,,,“V”- 字形,成簇的抗酸菌,復(fù)染太濃造成的影響,,,,適宜的復(fù)染,涂片檢查視野順序,鏡檢：在淡藍(lán)色背景下，抗酸桿菌呈紅色，其它細(xì)菌和細(xì)胞呈藍(lán)色 涂片結(jié)果報告標(biāo)準(zhǔn)(萋－尼氏抗酸菌染色法)陰性 300 視野 0條報告菌數(shù) 300 視野 1～8條 陽性1＋ 100視野 3～9條 陽性2＋

7、10視野 1～9條陽性3＋ 每視野 1～9條陽性4＋ 每視野 >10條,如何進(jìn)行痰涂片質(zhì)量控制,痰標(biāo)本收集:標(biāo)本性狀的控制（加強(qiáng)于醫(yī)生溝通）3份痰標(biāo)本（1即時痰、2夜間痰、3晨間痰）痰標(biāo)本保存（不能當(dāng)日檢查的保存于冰箱防液化）染液控制用之前過濾一下（一周一次）,如何進(jìn)行痰涂片質(zhì)量控制,室內(nèi)質(zhì)控抽查復(fù)檢當(dāng)日10%的涂片，自查或互查選取結(jié)果可疑的涂片復(fù)查，

8、尤其是只看到一條的或只在一處視野看到細(xì)菌選擇痰陽病人有陰性結(jié)果的涂片記錄結(jié)果1-8條涂片,玻片的保存,使用顯微鏡附帶的鏡油，或者是購買的鏡油（immersion oil）,而不是香柏油（cedar oil）,則不需使用二甲苯，直接使用鏡頭紙擦拭即可干燥后的玻片，按實(shí)驗室序號及涂片編號放置在玻片盒中，存放在陰涼干燥環(huán)境中。處于潮濕炎熱的環(huán)境中抗酸菌易于褪色。,痰細(xì)菌學(xué)檢查工作經(jīng)常被忽視,人員不穩(wěn)定，培訓(xùn)不足實(shí)驗室設(shè)備不足，更新較慢

9、不注意總結(jié)與提高,如何提高痰細(xì)菌學(xué)檢查在專業(yè)人員心目中地位,加強(qiáng)自身專業(yè)技術(shù)素質(zhì)保證痰細(xì)菌學(xué)檢查工作質(zhì)量應(yīng)用標(biāo)準(zhǔn)、統(tǒng)一的技術(shù)規(guī)范注意積累、總結(jié)工作經(jīng)驗不斷加強(qiáng)實(shí)驗室的規(guī)范化建設(shè)（人員配備、實(shí)驗室設(shè)備、安全操作、質(zhì)量控制）,質(zhì)控范圍,評價標(biāo)準(zhǔn)痰片鏡檢：陽性片符合率≥98%, 陰性片符合率≥96%制片質(zhì)量：痰細(xì)胞，痰膜面積、厚薄、脫落合格率≥90%，染色合格率≥95%,,歡迎提出寶貴意見！,謝