中藥成分分析研究的生長點

1、現(xiàn)代中藥分析方法的連續(xù)化、自動化、最優(yōu)化、智能化等特征已成為中藥成分分析科學(xué)發(fā)展的必然趨勢，它推動了一種分離手段和一種檢測手段相結(jié)合組成的多種聯(lián)用技術(shù)的誕生。,概述,,高分離性能的色譜與高鑒別能力的分析儀器聯(lián)用，在進(jìn)樣方式、分離模式、檢測手段等方面具有獨特的優(yōu)越性，提高了分析的準(zhǔn)確度、靈敏度和選擇性。色譜聯(lián)用分析技術(shù)已成為中藥成分分析學(xué)科領(lǐng)域中最重要和最基本的研究手段和方法，成為中藥成分分析研究的新的“生長點”。,,,,液質(zhì)聯(lián)用,毛細(xì)管

2、電泳質(zhì)譜聯(lián)用,高效液相熒光檢測法,氣質(zhì)聯(lián)用,,,,,色譜聯(lián)用技術(shù),高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（HPLC-MS）,高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)具有高分離能力、高靈敏度、和極強(qiáng)的專屬性等特點。隨著串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)和高分辨質(zhì)譜技術(shù)的迅猛發(fā)展, 質(zhì)譜在中藥成分分析、中藥指紋圖譜研究等方面得到了廣泛的應(yīng)用, 占高效液相色譜法的9. 4%, 其中90% 以上均為聯(lián)用單重四級桿質(zhì)譜檢測器, 與離子阱、飛行時間和三重四級桿等高級質(zhì)譜檢測器聯(lián)用相對較少。,LC

3、--MS的難點:MS要求較高的真空度,LC流動相為液體有一定的壓力，因此聯(lián)用時的關(guān)鍵是接口技術(shù)的研制與發(fā)展。,（1）高選擇性/高靈敏度 對選擇的離子進(jìn)行檢測（SIM）靈敏度為ppb級或者更低通過質(zhì)譜，分子量或特定的離解反應(yīng)進(jìn)行定性分析更加準(zhǔn)確。（2）適用化合物范圍廣泛低或非揮發(fā)性，極性與離子性化合物熱不穩(wěn)定性化合物,特點：,梁明金等用LC-MS 法對川芎有效部位中藁本內(nèi)酯和亞丁烯鄰苯二甲內(nèi)酯等22種化學(xué)成分進(jìn)行了研究與指紋圖

4、譜分析，通過測定不同產(chǎn)地和不同批次的川芎藥材樣品，利用NIST譜庫分析樣品，參照相對峰面積分析確定了指紋圖譜中的16個共有峰。,,,液質(zhì)聯(lián)用,毛細(xì)管電泳質(zhì)譜聯(lián)用,高效液相熒光檢測法,氣質(zhì)聯(lián)用,,,,,色譜聯(lián)用技術(shù),氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用（GC-MS）,GC-MS可同時完成待測組分的分離和鑒定，特別適用于多組分混合物中未知組分的定性定量分析、化合物的分子結(jié)構(gòu)辨別、化合物的分子量測定和元素組成分析。對可揮發(fā)性未知成分與微量成分的結(jié)構(gòu)分析更是

5、具有獨到之處。,但是， GC-MS的應(yīng)用范圍有限，因為所研究的藥物樣品必須氣化，故難以用于極性、熱不穩(wěn)定和大分子化合物的測定。,,,液質(zhì)聯(lián)用,毛細(xì)管電泳質(zhì)譜聯(lián)用,高效液相熒光檢測法,氣質(zhì)聯(lián)用,,,,,色譜聯(lián)用技術(shù),毛細(xì)管電泳-質(zhì)譜聯(lián)用（CE-MS）,CE-MS 聯(lián)用技術(shù)集毛細(xì)管電泳的柱效高、消耗時間短、消耗緩沖液少、可自動化、污染少等優(yōu)點和MS的高靈敏度、專屬性強(qiáng)于一體，可對復(fù)雜成分進(jìn)行分離和鑒定，且在每次分析時都可同時得到遷移時間

6、、分子量和碎片特征信息，是一種對復(fù)雜樣品既可定性分析又可定量分析的強(qiáng)有力手段。,目前常見的與質(zhì)譜連接的接口有與單四極桿質(zhì)譜連接的接口、與離子阱串聯(lián)質(zhì)譜連接的接口及與電噴霧飛行時間質(zhì)譜連接的接口等。當(dāng)前，CE-MS法最大的問題是方法的重現(xiàn)性不好且分析成本高。,陳軍輝等建立了快速定性分析黃連中生物堿類化合物的高效毛細(xì)管電泳-電噴霧飛行時間質(zhì)譜（HPCE-ESI-TOF-MS）聯(lián)用分析方法。使用未涂層石英毛細(xì)管，以50mmol/L 醋酸銨-0

7、.5%甲醇溶液(用氨水調(diào)pH=7.2) 為運行緩沖液，分離電壓為25KV；鞘液組成為50%甲醇-49.5% 水-0.5% 醋酸，鞘液流速為4μL/min ；質(zhì)譜選用正離子模式，碰撞電壓為100V。結(jié)果通過各色譜峰紫外光譜和質(zhì)譜可測得精確分子量。該法簡便、快速，是黃連中生物堿類化合物快速分離、鑒別的有效方法。,,,液質(zhì)聯(lián)用,毛細(xì)管電泳質(zhì)譜聯(lián)用,高效液相熒光檢測法,氣質(zhì)聯(lián)用,,,,,色譜聯(lián)用技術(shù),高效液相色譜法- 熒光檢測法（H

8、PLC-FLD）,高效液相色譜法結(jié)合熒光檢測法具有的較高的靈敏度, 檢出限非常低。同時, 由于其只能適用于可發(fā)出熒光的物質(zhì)或成分的檢測, 可以避免不發(fā)熒光的物質(zhì)、成分的干擾, 因此具有良好的選擇性, 這成為熒光檢測的獨特優(yōu)點,但適用性較差。,例：熒光檢測高效液相色譜法測定 ——茶葉中的五種菊酯類農(nóng)藥殘留,,采用梯度洗脫后熒光檢測λex為221nmλem為320nm,隨著分析科學(xué)的不斷發(fā)展，色譜聯(lián)用技術(shù)已成為一種常規(guī)應(yīng)用的現(xiàn)