hbv核心蛋白和b7.1分子嵌合質(zhì)粒的構(gòu)建及體外表達(dá)的初步研究

1、同濟(jì)醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文HBV核心蛋白和B7.1分子嵌合質(zhì)粒的構(gòu)建及體外表達(dá)的初步研究姓名：焦志勇申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：傳染病學(xué)指導(dǎo)教師：楊東亮;沈漢馨2000.5.1同濟(jì)醫(yī)科大學(xué) 碩士生畢業(yè)論文( 2 0 0 0 )T h e C o n s t r u c t i o no f C h i m e r i cP | a s m i dp c D N A 3 ／H B c ／B 7 ．1a n d I t sE x p r e s

2、s i o n i nV i t r oP o s t g r a d u a t e ： J i a oZ h i y o n gT u t o r s ：P r o f Y a n g D o n g l i a n gP r o fS h e n H a n x i nA b s t r a c tA i m ：T o c o n s t r u c t t h e c h i m e r i c p l a s m i d p

3、c D N A 3 ／H B c ／B 71 a n d d e t e c t t h ee x p r e s s i o no f t h ep l a s m i d i nv i t r oM e t h o d s ：U s i n gs u b c l o n i n gt e c h n i q u e ，t h ec D N A f r a g m e n t so fH B V c o r eg e n ea n d

4、m o u s ec o —s t i m u l a t o r y m o l e c u l eB 7 1 g e n e w e r ec o n s t r u c t e d i n t o t h e e u k a r y o t i ce x p r e s s i o np l a s m i d v e c t o r p c D N A 3T h e i n s e r t e dt a r g e tg e n

5、 e s i nt h e c h i m e r i cp l a s m i dw e r e v e r i f i e db yn u c l e o t i d es e q u e n c i n g B H K 一2 I c e l l l i n e sw a st r a n s f e c t e dw i t ht h i sc l l i m e r i cp l a s m i d u s i n gL i p

6、 o f e c t A M I N r e a g e n t T h e e x p r e s s i o no f H ] 3 c A ga n dB 7 1m o l e c u l e s w a s d e t e c t e db yi n d i r e c ti m m u n o f l u o r e s c e n c et e c h n i q u eR e s u l t s ：T h e c h i m

7、 e r i c p l a s m i d p c D N A 3 ／H B c ／B 71 w a s o b t a i n e d b y s u b c l o n i n gt e c h n i q u e T h e n u c l e o t i d es e q u e n c e so f H B V c o r eg e n ea n dc o —s t i m u l a t o r ym o l e c u

8、l eB 71 g e n e i nt h i sc h i m e r i cp l a s m i dh a dh i g hh o m o l o g yw i t hH B V a d rs t a n d a r ds t r a i n( 9 818 ％) a n d m o u s e B 71 ( 9 98 9 ％) r e s p e c t i v e l y A f t e r t r a n s f e c t

9、 i o n w i t h t h i sc h i m e r i cp l a s m i d ，t h e1 - m c A g a n d B 71 m o l e c u l e s w e r e e x p r e s s e d i nB t - I K 一2 1 c e l l sC o n c l u s i o n ：T h ec h i m e r i cp l a s m i dp c D N A 3 ／H

10、B c ／B 71 w a s c o n s t r u c t e ds u c c e s s f u l l yT h e I - m c A g a n d B 71 g e n e s i nt h i sp l a s m i de x p r e s s e dw e l l i nv i t r o O u r e x p e r i m e n t a lr e s u l t sc o u l dp r o v i

11、 d e ar e s e a r c ht o o lf o re n h a n c i n g D N A —m e d i a t e d i m m u n e r e s p o n s e sa n d t h ed e v e l o p m e n t o f n e w d e s i g n e dg e n e v a c c i n e s f o r t h ec o n t r o lo f H B V i