腺病毒載體介導(dǎo)共刺激分子b7.1基因?qū)和文讣?xì)胞瘤體外生物學(xué)特性的影響

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文腺病毒載體介導(dǎo)共刺激分子B7.1基因?qū)和文讣?xì)胞瘤體外生物學(xué)特性的影響姓名：王斌申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：小兒外科指導(dǎo)教師：劉磊20070401中文論著摘要·腺病毒載體介導(dǎo)共刺激分子B 7 ．1 基因?qū)和文讣?xì)胞瘤體外生物學(xué)特性的影響實(shí)驗(yàn)背景和目的人體的抗腫瘤免疫以T 細(xì)胞介導(dǎo)的細(xì)胞免疫為主，T 細(xì)胞的活化需雙信號刺激：第一信號由T 細(xì)胞抗原受體( T C R ) 與抗原提呈細(xì)胞( AP C ) 上的

2、抗原肽- M H C 分子復(fù)合物結(jié)合提供，第二信號由A P C 上的共刺激分子與T 細(xì)胞上的相應(yīng)配體結(jié)合提供。只有雙信號共同刺激才能有效激活特異性的T 細(xì)胞，缺乏第二信號造成T 細(xì)胞克隆凋亡，使腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生免疫逃避。AP C 上的共刺激分子主要是一些粘附分子，其中B 7 ．1 分子是重要的粘附分子。肝母細(xì)胞瘤被認(rèn)為是一種弱免疫原性的惡性腫瘤，腫瘤細(xì)胞表面缺乏足夠的可以與淋巴細(xì)胞表面結(jié)合的配體，主要是指B 7 一I ( C D 8 0 )

3、 和B 7 - 2 ( C D 8 6 ) ，其中缺乏B 7 ．1 分子的表達(dá)是其無法提供第二信號的重要原因。我們希望通過基因轉(zhuǎn)染的技術(shù)手段達(dá)到提高肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞表面的B 7 ．1 分子抗體表達(dá)水平，恢復(fù)其傳導(dǎo)第二信號刺激的能力，從而誘導(dǎo)特異性抗腫瘤免疫反應(yīng)的目的。為此，我們進(jìn)行了以下的實(shí)驗(yàn)研究。1 ．檢測肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞中B 7 ．1 分子的表達(dá)水平。2 通過含h B 7 ．1 基因的重組腺病毒載體轉(zhuǎn)染肝母細(xì)胞瘤細(xì)胞株，建立B 7 ．1

4、 分子高表達(dá)的陽性克隆。3 ．觀察轉(zhuǎn)染后腫瘤細(xì)胞B 7 ．1 分子的表達(dá)水平及細(xì)胞生物學(xué)特性的變化4 ．觀察轉(zhuǎn)染含h B 7 ．1 基因的瘤苗對T 淋巴細(xì)胞增殖的影響。實(shí)驗(yàn)方法通過含h B 7 ．1 基因的重組腺病毒載體轉(zhuǎn)入H e p G 2 細(xì)胞，流式細(xì)胞儀( F C M )檢測H e p G 2 和H e p G 2 ／h B 7 ．1 細(xì)胞表面B T - 1 分子的表達(dá)水平。觀察H e p G 2 和H e p G 2 ／b _