不同佐劑與惡性瘧疾疫苗m.rcag1相配伍后的免疫原性研究

1、北京協(xié)和醫(yī)學院碩士研究生學位論文學校代碼：1 0 0 2 3學 號：$ 2 0 1 3 0 0 5 0 5 7碩士學位論文不同佐劑與惡性瘧疾疫苗M ．R C A g 一1 相配伍后的免疫原性研究所 院 ：姓 名 ：指導(dǎo)教師：導(dǎo)師小組：學科專業(yè)：研究方向：完成日期：北京協(xié)和醫(yī)學院基礎(chǔ)學院張佳佳王恒教授劉力、許雪梅病原生物學蛋白質(zhì)疫苗2 0 1 6 年5 月北京協(xié)和醫(yī)學院碩士研究生學位論文不同佐劑與惡性瘧疾疫苗M ．R C A g ．1 相

2、配伍后的免疫原性研究張佳佳( 中國醫(yī)學科學院基礎(chǔ)醫(yī)學研究所，北京協(xié)和醫(yī)學院基礎(chǔ)學院，1 0 0 0 0 5 北京)中文摘要瘧疾作為世界三大傳染病之一仍然嚴重威脅著人類的健康。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計，2 0 1 5 年在全球大約有3 2 億人( 約占世界總?cè)? 3 的一半) 面臨著感染瘧疾的風險，其中大約有2 ．1 4 億人患病， 4 3 ．8 萬人死亡。近幾年，由于瘧原蟲耐藥性蟲株的不斷出現(xiàn)，以及介導(dǎo)瘧原蟲傳播的蚊媒對殺蟲劑逐漸產(chǎn)生抗性，使

3、得一些傳統(tǒng)的針對惡性瘧疾的防控措施和手段都面臨著嚴峻的挑戰(zhàn)。對于控制和消除瘧疾最有希望和最有效的工具就是引進一種高度有效的瘧疾疫苗。根據(jù)相關(guān)文獻報道，惡性瘧原蟲紅內(nèi)期疫苗多種候選抗原單獨或簡單的聯(lián)合使用時，其免疫效果并不理想，因此構(gòu)建多抗原多表位的重組蛋白疫苗成為紅內(nèi)期瘧疾疫苗研究的方向之一。本課題組前期通過“表位重組”技術(shù)構(gòu)建了瘧原蟲隨機重組抗原．1 ( m a l a r i a r a n d o mc o n s t r u c

4、 t e da n t i g e n ．1 ，M ．R C A g ．1 ) ，將其作為惡性瘧疾紅內(nèi)期多表位人工隨機重組蛋白抗原M ．R C A g ．1 在B A L B ／c 小鼠、新西蘭兔、非人靈長類動物模型中證實其具有良好的免疫原性和體內(nèi)外免疫保護性，顯示其具有研發(fā)前景。通過與中國科學院過程工程研究所的合作，己研發(fā)出穩(wěn)定的純化工藝，建立了穩(wěn)定簡便可行的中試規(guī)模制備工藝。本研究在前期工作基礎(chǔ)上選用了在臨床上經(jīng)常用于治療骨質(zhì)疏松的

5、藥物．雙性膦酸鹽．A L D 、Z L D 和P M D 與M ．R C A g ．1 相配伍，并在B A L B ／c 小鼠模型和新西蘭兔體內(nèi)評價其免疫效果，進而篩選出最佳佐劑和免疫劑量，為今后進行的M ．R C A g ．1的臨床前研究奠定基礎(chǔ)。目前主要取得以下進展：1 ．從與M ．R C A g ．1 以不同劑量和不同免疫方式相配伍的雙性膦酸鹽免疫B A L B ／c 小鼠，確定佐劑Z L D ( 0 ．0 5 m g s ．C

6、．) 組為最佳配伍劑量組。并通過免疫新西蘭兔，獲得瘧原蟲體外生長抑制率最高達7 6 ．7 ％。2 ．從與M ．R C A g ．1 以不同劑量相配伍的1 5 t 服佐劑A L D 免疫B A L B ／c 小鼠，確定A L D ( 0 ．1 m g ) 組為最佳配伍劑量組。并通過免疫新西蘭兔，獲得瘧原蟲體外生長抑制率最高達4 8 ．6 ％。3 ．從與M ．R C A g ．1 以不同劑量相配伍的Z L D 和M F 5 9 聯(lián)合免疫B