孔雀石綠膠體金免疫層析試紙條研制 及在水產(chǎn)品中的應(yīng)用.pdf

1、孔雀石綠殘留在水產(chǎn)品中和環(huán)境中存在時間長，具有毒性高，殘留高及潛在的致畸、致癌、致突變等危險性，美國、歐盟對水產(chǎn)品中孔雀石綠的使用都有明確的規(guī)定，我國已將孔雀石綠列在禁用獸藥名單中，禁止用于全部食品動物中。
　　目前，孔雀石綠的含量一般都是使用儀器進行測定，但這些方法測定流程復(fù)雜、耗時長、成本高。試紙條測定具有易操作，費時短，成本低等優(yōu)點，適于現(xiàn)場檢測和篩查。本試驗以孔雀石綠為研究對象，利用膠體金免疫層析技術(shù)，研制出用于檢測孔雀石

2、綠的免疫層析試紙條，并將其用于水產(chǎn)品檢測。
　　采用磁力攪拌器加熱方法，用檸檬酸三鈉還原氯金酸，制備出了不同粒徑的膠體金溶液，粒徑在26 nm左右的膠體金標記孔雀石綠抗體的顯色效果較好，最適pH為0.2 mol/LK2CO3添加量為4μL/mL，抗體加入量為15μg/mL，穩(wěn)定劑加入量為30μL/mL的10％ BSA。選用樣品墊GL-b01、金標墊GL0194、吸水墊H5076和Millipore公司135硝酸纖維素膜為試紙條材料

3、，金標抗體稀釋4×包被于金標墊上，檢測線和質(zhì)控線上分別用2.5 mg/mL的孔雀石綠-BSA結(jié)合物和0.1 mg/mL的羊抗鼠IgG平行定量噴涂于硝酸纖維素膜上。
　　試紙條對孔雀石綠標準品用目測比色法的檢出限為10 ng/mL。試紙條對無色孔雀石綠、氯霉素、甲基藍、四環(huán)素等物質(zhì)無交叉反應(yīng)，與結(jié)晶紫交叉反應(yīng)率為66.7％，特異性和穩(wěn)定性較好。應(yīng)用試紙條檢測水產(chǎn)品陰性樣品，假陽性率為0％;陰性樣本不同加標量的測定結(jié)果與液相色譜-串聯(lián)