葡萄穗霉基因在黑曲霉中的表達及酶學性質.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、纖維素類物質和木聚糖是自然界中最廉價、最豐富的可再生資源，葡聚糖酶和木聚糖酶是降解它們最關鍵的酶類。為了利用豐富的纖維素資源和木聚糖資源，就必須獲得性質優(yōu)良的葡聚糖酶和木聚糖酶。真菌來源的糖苷水解酶61家族(GH61)和木聚糖酶是目前纖維素酶和半纖維素酶研究的主要部分。
　　本實驗室已經(jīng)對葡萄穗霉的全基因組進行了測序，并對部分基因進行了功能注釋，為本實驗奠定了基礎。本實驗首先從葡萄穗霉中挖掘可能的葡聚糖酶GH61家族和木聚糖酶的基

2、因:gh2990、xya6205和xya4063，并根據(jù)其基因序列分別設計了引物，以葡萄穗霉基因組DNA為模板，通過PCR技術分別擴增到長度為1353bp、1699bp和753bp的片段，將片段克隆連接到穿梭載體pGAMDm上，結果表明，獲得的片段為需要的目的基因。最后通過原生質體-PEG轉化到黑曲霉G1上，SDS-PAGE結果顯示，2種基因均能夠重組表達，外源蛋白的分子量分別為48kDa和25kDa，與預期大小相符。將得到的目的轉化子

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