環(huán)狀氨基酸的合成及在生物活性肽中的應(yīng)用.pdf

1、文獻(xiàn)調(diào)研發(fā)現(xiàn)，LHRH拮抗劑肽鏈骨架中，5～8位或3～6存在一個(gè)Ⅱ型β-轉(zhuǎn)角，它的存在有利于提高拮抗劑與受體之間的親和作用，使體內(nèi)和體外活性得到提高。環(huán)狀氨基酸的引入可以增加結(jié)構(gòu)的剛性，限制構(gòu)象而產(chǎn)生不同的結(jié)構(gòu)或生物效應(yīng)。當(dāng)側(cè)鏈中有體積較大的Acc<'>(n≥5)團(tuán)時(shí)，更易于與受體的疏水性口袋結(jié)合，還可以穩(wěn)定肽鏈的折疊構(gòu)象和螺旋結(jié)構(gòu)。因此，提出將環(huán)狀氨基酸引入LHRH拮抗劑的7位，介入構(gòu)象限制性因素，迫使肽鏈形成β-轉(zhuǎn)角，更好地與受體結(jié)

2、合，而且，這種既有D型又有L型的內(nèi)消旋式氨基酸可能會抑制蛋白酶對肽鍵的水解，從而延長LHRH拮抗劑在體內(nèi)的作用時(shí)間。 基于此假設(shè)，首先合成了10個(gè)保護(hù)的非天然氨基酸，最終產(chǎn)物通過旋光測試，達(dá)到多肽合成中光學(xué)純的要求，以環(huán)酮為起始原料，與氰化鈉反應(yīng)實(shí)現(xiàn)了環(huán)狀氨基酸的合成，部分化合物結(jié)構(gòu)經(jīng)過<'1>H NMR或MS確證；然后以LHRH拮抗劑為先導(dǎo)化合物，采用固相多肽合成法，選用MBHA樹脂，采用Boc合成策略，DCC/HOBt法和B

3、OP/DIEA縮合法，茚三酮指示法檢測，氨基酸的α-氨基用Boc保護(hù)，側(cè)鏈氨基則用對酸(4M HCl/Diox)穩(wěn)定但可用堿(25％哌啶/DMF)或強(qiáng)酸(無水HF)脫除的保護(hù)基保護(hù)，對LHRH拮抗劑的5位、6位、7位、10位氨基酸進(jìn)行合理修飾或替換，設(shè)計(jì)并合成了8個(gè)十肽化合物，成功地將1-氨基環(huán)戊基羧酸(Acc<'5>)和1-氨基環(huán)己基羧酸(Acc<.6>)引入到LHRH拮抗劑的7位，此替換尚屬首次報(bào)道。合成后的LHRH拮抗劑類似物經(jīng)過