牡丹籽粕中芍藥苷類成分的分析及大孔吸附樹脂提取工藝研究.pdf

1、分類號：TS2012密級：公玨單位代碼：學(xué)號：!QQ墨魚2011121牡丹籽粕中芍藥苷類成分的分析及大孑L吸附樹脂提取工藝研究ResearchesontheComposition，DeterminationandMacroporousAdsorptionResinExtractionofPaeoniflorinsinSeedCakesofPeony學(xué)位申請人：秦愛霞指導(dǎo)教師：崔同教授學(xué)科專業(yè)：食品科學(xué)學(xué)位類別：工學(xué)碩士授予單位：河北農(nóng)業(yè)

2、大學(xué)答辯日期：二。一四年五月三十一日摘要牡丹是我國的著名花卉，不僅極具觀賞價(jià)值，也有很多的保健功能。牡丹籽富含油脂，其中亞麻酸等不飽和脂肪酸含量豐富，已成為一種名貴新食品資源，得到規(guī)?；拈_發(fā)利用。牡丹籽粕為牡丹籽油的生產(chǎn)剩余物，以往未見較系統(tǒng)的研究，本文以這一生物資源為材料，對其化學(xué)成分進(jìn)行了分析，成功分離鑒定出6種主要成分；再以此為對照品，建立了這些成分的高效液相色譜(HPLC)分析方法，最后采用大孔吸附樹脂法等步驟開發(fā)出牡丹籽粕中

3、芍藥苷類成分的提取純化方法，為牡丹籽天然產(chǎn)物資源的綜合開發(fā)利用提供科學(xué)根據(jù)。采用30％乙醇對1kg的牡丹籽粕中的有效成分進(jìn)行提取，先經(jīng)大孔吸附樹脂初步純化，再以甲醇為流動(dòng)相經(jīng)制備HPLC精制得到6種主要成分，質(zhì)量分別為142、310、61、549、127、71mg，峰面積百分比法檢測其純度均在95％以上，結(jié)合LcMS和1H核磁共振的方法對其進(jìn)行了結(jié)構(gòu)鑒定，分別為6’0伊D葡萄糖芍藥內(nèi)酯苷、芍藥內(nèi)酯苷、flgentiobiosylpaeo

4、niflorin、芍藥苷、苯甲酸和芍藥苷元。以純化的6種成分為對照品，建立了一種可用于牡丹籽粕中芍藥苷類成分定量分析的梯度洗脫HPLC方法，6種芍藥苷類物質(zhì)在17min內(nèi)實(shí)現(xiàn)良好分離。色譜條件為：色譜柱：KromasilC18(20046inln，5rtrn)；流動(dòng)相：A500p饑甲酸水溶液；B甲醇含500“饑的甲酸；梯度洗脫程序：(min／B％)0／40，4／40，8／60，15／60，16／40，20／40；流速：08mL／min；

5、溫度：30℃；DAD檢測器，檢測波長：230nlTI；進(jìn)樣量：10nL；峰面積外標(biāo)法定量。用該方法對牡丹籽粕進(jìn)行分析，各成分分離良好，重復(fù)測定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差在191％一272％之間，最低檢出限為28ng—161ng之間，在進(jìn)樣量125ng一10000ng范圍內(nèi)，線性回歸方程的相關(guān)系數(shù)，介于09992～09999之間，加標(biāo)回收率在93O％～100O％之間。以牡丹籽粕中的4種主要成分(芍藥苷、芍藥內(nèi)酯苷、6’D伊D一葡萄糖芍藥內(nèi)酯苷和flg

6、entiobiosylpaeoniflorin)為指標(biāo)，優(yōu)化了大孔吸附樹脂法的純化工藝。選用HPD200A型樹脂，最優(yōu)的吸附條件為樣液濃度80mg／mL，上樣速度1／16BV(柱床體積)／min，上樣量45BV，洗脫液乙醇濃度50％，洗脫流速1／16BV／min，洗脫體積為4BV。在此條件下純化的產(chǎn)物中含有芍藥苷323％，芍藥內(nèi)酯苷165％，6’o伊D葡萄糖芍藥內(nèi)酯苷802％，flgentiobiosylpaeoniflorin6。63