加工處理?xiàng)l件及來源對(duì)乳鐵蛋白及乳鐵蛋白素在脾淋巴細(xì)胞增殖中的影響.pdf

1、嬰幼兒配方乳粉作為一種母乳替代品，是非母乳喂養(yǎng)嬰幼兒的首選食物。嬰幼兒配方乳粉的研制，從宏量營(yíng)養(yǎng)素到微量營(yíng)養(yǎng)素都盡可能的接近人乳。目前配方乳粉在營(yíng)養(yǎng)成分上已滿足嬰幼兒的生長(zhǎng)需要，但其中缺少能夠提高嬰幼兒免疫能力的免疫活性物質(zhì)。人乳鐵蛋白(human lactoferrin，LFH)作為人乳中主要的免疫活性成分蛋白質(zhì)之一，占普通母乳總蛋白含量的10％，是嬰幼兒增強(qiáng)免疫系統(tǒng)能力的重要物質(zhì)，是嬰幼兒配方奶粉“母乳化”的重要參數(shù)。乳鐵蛋白(la

2、ctoferrin，LF)在經(jīng)胃蛋白酶作用下會(huì)釋放生物活性部位乳鐵蛋白素(lactoferricin，Lfcin)。研究表明，LF與Lfcin在抵抗真菌、炎癥以及病菌感染，抗癌及提高機(jī)體的免疫調(diào)節(jié)能力促進(jìn)傷口愈合等方面具有顯著作用?，F(xiàn)階段包括我國(guó)在內(nèi)的許多國(guó)家均已將LF加到嬰幼兒配方奶粉中，但用量不明確，且LFH來源受限，價(jià)格昂貴，限制了其的添加使用。牛乳鐵蛋白(bovine lactoferrin，LFB)分子量與LFH分子量相近，且

3、LFH與LFB順序同源性高達(dá)69％，LFB原料來源便捷、價(jià)廉，尤其是小肽LfcinB的生產(chǎn)更節(jié)約成本。如何以低價(jià)等效成分替代母乳活性成分，降低嬰幼兒配方奶粉中免疫活性物質(zhì)的成本具有重要的意義。
　　本研究以牛乳清乳鐵蛋白(bovine whey lactoferrin，LFW)、牛初乳乳鐵蛋白(bovinecolostrum lactoferrin，LFC)與LFH及LfcinB與LfcinH為原料，采用CCK-8試劑測(cè)定不同來源

4、的LF與Lfcin分別作用小鼠脾淋巴細(xì)胞24 h、48 h、72 h后的細(xì)胞存活率，及其在絲裂原刺激下T、B淋巴細(xì)胞增殖作用的影響，并采用ELISA法測(cè)定其對(duì)細(xì)胞分泌細(xì)胞因子IL-2、IL-4、IL-10及TNF-α的影響。探究其作用的最佳劑量及相互替代的用量比例關(guān)系，并以63℃/30 min、72℃/15 min、72℃/15 s、85℃/15 min、85℃/15 s、95℃/10 min、模擬消化處理LF，探討不同處理?xiàng)l件對(duì)LF作

5、用效果的影響情況，為濕法處理LF及為L(zhǎng)FB替代LFH在配方奶粉中的添加提供科學(xué)理論依據(jù)。結(jié)果表明：⑴對(duì)于未處理的兩種牛乳鐵蛋白可替代LFH應(yīng)用于嬰幼兒配方產(chǎn)品中以提高嬰幼兒免疫能力，LF作用濃度在0.50-2.00 mg/mL范圍內(nèi)，Lfcin作用濃度為75-125μg/mL。⑵不同溫度處理及消化處理可以改變LF的作用效果，處理后的LFW、LFC及LFH均可在一定濃度范圍內(nèi)對(duì)淋巴細(xì)胞及在ConA與LPS刺激下的淋巴細(xì)胞的增殖均有促進(jìn)作用