毛細管電泳技術在玉米代謝組學中的應用研究.pdf

1、毛細管電泳作為一種快速、高效的分離分析技術,已應用于許多領域。但是由于毛細管進樣體積小以及在柱檢測光程短,極大地限制了毛細管電泳檢測靈敏度的提高。目前,為了改善毛細管電泳的檢測靈敏度,降低樣品的檢測限,各種樣品濃縮/富集的方法得以研究和發(fā)展,并且應用到了各種研究領域。本論文應用毛細管區(qū)帶電泳技術,并結(jié)合樣品在線富集的方法對玉米的代謝組分進行了分析測定。主要研究內(nèi)容如下:
　　1.用樣品堆積和動態(tài)pH連接兩種富集技術來提高水溶性維生

2、素的檢測靈敏度。當應用樣品堆積富集方法時,9種水溶性維生素都能得到富集并且達到基線分離。而當應用動態(tài)pH連接的富集方法時,只有煙酸和葉酸兩種維生素富集并分離。相比之下,樣品堆積比動態(tài)pH連接更適合用于多數(shù)水溶性維生素的富集。采用樣品堆積技術,所測維生素的檢測限為6-119ng/mL或2.7×10-8-53.4×10-8M(S/N=3),根據(jù)遷移時間和峰面積計算得到的RSD都小于3.5％,校準方程的線性相關系數(shù)都在0.9969以上。優(yōu)化好

3、的樣品堆積方法用于分析五種玉米樣品,成功檢測到吡哆醇和煙酸兩種水溶性維生素,其含量分別為2.5±0.11μg/g-6.67±0.17μg/g和0.25±0.01μg/g-0.67±0.08μg/g。兩種維生素的回收率為87%-106%,RSD都小于6.81%。
　　2.用樣品堆積和動態(tài)pH連接兩種富集技術來提高嘌呤堿和嘧啶堿的檢測靈敏度。應用兩種富集方法,7種嘌呤堿和嘧啶堿都能得到富集并且達到基線分離。但二者相比較,動態(tài)pH連接的