傳統(tǒng)發(fā)酵酸乳中抗氧化乳酸菌的篩選與功能評價.pdf

1、本文以云南香格里拉地區(qū)10份傳統(tǒng)發(fā)酵酸乳為研究對象，對其中乳酸菌進(jìn)行分離、鑒定，獲得可在食品中使用的乳酸菌。通過體外實驗對乳酸菌的體外抗氧化特性和耐酸耐膽鹽特性進(jìn)行評價。結(jié)合其抗氧化特性和消化道抗性，篩選出抗氧化活性較高且具有較強(qiáng)抗性的目標(biāo)乳酸菌。同時，利用API50CH生理生化鑒定方法及16S rDNA序列同源性分析對目標(biāo)菌株進(jìn)行了鑒定。構(gòu)建D-半乳糖誘導(dǎo)的衰老小鼠模型對乳酸菌體內(nèi)抗氧化活性進(jìn)行評價。本文主要研究成果如下：
　　

2、（1）從云南香格里拉地區(qū)10份傳統(tǒng)發(fā)酵酸乳中共獲得18株菌株，其中10株為植物乳桿菌（Lactobacillus plantarum），4株為副干酪乳桿菌（Lactobacillus paracasei），4株為發(fā)酵乳桿菌（Lactobacillus fermentum）。12株乳酸菌與GeneBank數(shù)據(jù)庫中已知乳酸菌具有高達(dá)100％的同源性；6株有99%的同源性。
　?。?）對乳酸菌的完整細(xì)胞和無細(xì)胞提取物（菌體濃度均為109

3、 CFU/mL）體外抗氧化活性進(jìn)行研究，綜合比較發(fā)現(xiàn)編號為L4、L5、L8、L14、L18的乳酸菌抗氧化活性較高，具有潛在的應(yīng)用價值。L4無細(xì)胞提取物羥基自由基清除能力較強(qiáng)，高達(dá)34.89%，相當(dāng)于0.40 mg/mL維生素C；L8完整細(xì)胞超氧陰離子自由基清除能力最強(qiáng)，為22.89%，L12無細(xì)胞提取物的超氧陰離子自由基清除率最高，達(dá)到了28.78%，相當(dāng)于0.20 mg/mL維生素C；L5完整細(xì)胞和無細(xì)胞提取物的還原力均最強(qiáng)，分別高達(dá)

4、86.18%、89.69%，此外，乳酸菌完整細(xì)胞和無細(xì)胞提取物的還原力表現(xiàn)出一定關(guān)聯(lián)性。L14完整細(xì)胞抗脂質(zhì)過氧化能力最強(qiáng)，為62.48%，L13、L14無細(xì)胞提取物抗脂質(zhì)過氧化能力較強(qiáng)，分別為48.04%和46.21%，均相當(dāng)于0.30~0.40 mg/mL維生素C。
　?。?）對18株乳酸菌在pH=3.0的人工胃液中存活率和對不同濃度膽鹽、NaCl的耐受力進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)編號為L6、L14的乳酸菌具有較好的抗性能力。
　　

5、（4）綜合18株菌株的抗氧化活性和抗性能力，確定L14為目標(biāo)菌株。經(jīng)生理生化特性鑒定和16S rDNA序列同源性分析，確定L14為Lactobacillus paracasei subsp.paracasei，將其命名為Lactobacillus paracasei subsp.paracasei L14。
　?。?）通過動物實驗探討Lactobacillus paracasei subsp.paracasei L14對D-半乳糖

6、誘導(dǎo)的衰老小鼠抗氧化系統(tǒng)的影響。研究發(fā)現(xiàn)，Lactobacillus paracasei subsp.paracasei L14在機(jī)體內(nèi)有較好的抗氧化效果，能增強(qiáng)血清中超氧化物歧化酶（SOD）、總抗氧化能力（T-AOC）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）的活力，降低血清中脂質(zhì)過氧化物丙二醛（MDA）含量，有效的提高衰老小鼠血清的抗氧化水平；此外，Lactobacillus paracasei subsp.paracasei L14具有