臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞注射液生產(chǎn)過(guò)程中部分單元的工藝優(yōu)化.pdf

1、為了克服冷藏在4℃或冷凍在-20℃的臍帶隨保存時(shí)間的延長(zhǎng)間充質(zhì)干細(xì)胞（UC-MSCs）分離成功率逐漸下降，分離成功后的間充質(zhì)干細(xì)胞數(shù)量減少、干性不足，造成采集成本、生產(chǎn)成本及檢測(cè)成本浪費(fèi)的問(wèn)題，本論文對(duì)保存工藝進(jìn)行了優(yōu)化。將新鮮采集的臍帶簡(jiǎn)單處理成臍帶組織塊，在凍存液中通過(guò)三步降溫法，保存于液氮中（-196℃），待生產(chǎn)需要時(shí)復(fù)蘇，組織塊爬片法分離臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞，成功率達(dá)到100％，且各項(xiàng)檢驗(yàn)指標(biāo)滿足生產(chǎn)要求。液氮保存新鮮臍帶的工藝，不

2、僅使臍帶的高廢棄率減低為0，而且還解決了臍帶采集不足時(shí)，臍帶供應(yīng)的問(wèn)題。
　　為了篩選間充質(zhì)干細(xì)胞注射液的生產(chǎn)配方，降低生產(chǎn)成本，通過(guò)對(duì)0.9%氯化鈉注射液、5%葡萄糖注射液、復(fù)方電解質(zhì)注射液在不同時(shí)間點(diǎn)及環(huán)境溫度下對(duì)UC-MSCs活率、貼壁能力和倍增時(shí)間的影響研究，發(fā)現(xiàn)復(fù)方電解質(zhì)注射液作為細(xì)胞保存液，保存UC-MSCs的生物學(xué)活性優(yōu)于其他2種輸注液。同時(shí)為了降低生產(chǎn)成本及輸注過(guò)程中的過(guò)敏反應(yīng)發(fā)生率，對(duì)含不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)人血白蛋白的復(fù)