樣品前處理技術(shù)在色譜分析中的應(yīng)用.pdf

1、色譜分析已成為當(dāng)今分析化學(xué)領(lǐng)域應(yīng)用最廣泛的一種分析測試手段，應(yīng)用范圍涉及醫(yī)藥、環(huán)保、生命科學(xué)、石油化工等幾乎所有基礎(chǔ)和研究領(lǐng)域。由于色譜分析常常用于各種復(fù)雜的基體以及低含量組分的分析，消除基體干擾，提高分析靈敏度，延長儀器壽命是一個普遍需要解決的問題，因此，對樣品進行色譜分析前處理變得非常重要。迄今為止，樣品前處理的方法很多，本質(zhì)上可分為兩大類：一類是對檢測器響應(yīng)弱(或無信號)的樣品，通過衍生技術(shù)改變其物理和化學(xué)性質(zhì)，使之成為可被檢測的

2、化合物。另一類是通過對復(fù)雜基體樣品中低含量組分進行分離、純化和富集以獲得同樣效果。這主要包括液一液萃取(LLE)、超臨界流體萃取、微波輔助萃取、固相萃取(SPE)、固相微萃取(SPME)和液相微萃取(LPME)等。本論文在綜述前人工作的基礎(chǔ)上，圍繞樣品前處理技術(shù)進行研究，開展了如下具有原始創(chuàng)新性的工作。 (1)以NBD-CL為衍生試劑，建立了柱前衍生高效液相色譜法測定胰島素的靈敏分析新方法； (2)以NBD-CL為衍生試

3、劑，建立了柱前衍生高效液相色譜法測定胰島細(xì)胞中游離氨基酸的分析方法； (3)建立了液相微萃取-高效液相色譜測定血槳中的防己諾靈堿和粉防己堿的分析新方法； (4)混合傳統(tǒng)吸附劑，采集小體積空氣樣品，以固相萃取和熱解吸濃縮進樣裝置兩種方式解吸被吸附物質(zhì)，利用GC-MS對空氣中污染物進行定性分析。 本論文共分為五個部分： 第一章：從兩個方面，針對樣品前處理技術(shù)在色譜分析中的應(yīng)用進行了綜述。 (1)衍生技

4、術(shù)分別從紫外衍生技術(shù)和熒光衍生技術(shù)兩個方面進行了總結(jié)?？偨Y(jié)了衍生試劑的選擇、衍生反應(yīng)條件等方面情況； (2)分離、純化和富集技術(shù)該內(nèi)容總結(jié)了液相微萃取、固相微萃取、固相萃取三種萃取技術(shù)的原理、發(fā)展和實際應(yīng)用。其中，以液相微萃取為重點內(nèi)容進行了詳細(xì)介紹。 第二章：提出了以NBD-Cl為衍生試劑，利用柱前衍生高效液相色譜技術(shù)測定胰島素的靈敏分析方法。對該衍生反應(yīng)的條件進行了優(yōu)化，得到了以0.1M的磷酸鹽緩沖溶液(pH 9.0

5、)為衍生介質(zhì)、反應(yīng)溫度50℃、反應(yīng)時間2h，避光下進行的最優(yōu)條件。色譜分析在利用C18柱和流動相為乙腈.水體系(含有0.1％的TFA)(v/v：30/70)的條件下完成。該分析方法靈敏準(zhǔn)確。 第三章：同樣以NBD-Cl為衍生試劑，建立了柱前衍生高效液相色譜技術(shù)測定胰島細(xì)胞中游離氨基酸的新方法。該工作分離并檢測了白鼠胰島中15種游離氨基酸的含量，并對基體效應(yīng)和衍生反應(yīng)條件進行了考察。氨基酸衍生物的分離通過HPLC二元梯度模式實現(xiàn)。

6、方法準(zhǔn)確，靈敏，重復(fù)性好。 第四章：建立了液相微萃取一高效液相色譜法測定血槳中防己諾靈堿和粉防己堿的新方法。該工作利用中空纖維支撐三相微萃取和高效液相色譜分析測定血漿中的粉防己堿和防己諾靈堿，以探索高疏水性化合物利用中空纖維支撐三相微萃取的適用性，各種影響萃取的參數(shù)被優(yōu)化，并與其它樣品前處理方法進行比較。結(jié)果表明，與其它萃取方法相比，三相微萃取具有更高的預(yù)濃縮能力和有效的樣品凈化能力。該方法具有低的檢測限，良好的重現(xiàn)性和線性。