液相色譜中樣品前處理技術(shù)

1、1液相色譜中樣品前處理技術(shù)綜述液相色譜中樣品前處理技術(shù)綜述在復(fù)雜基體中低濃度甚至是痕量的有機(jī)化合物的分離和測(cè)定是分析化學(xué)所面臨的一個(gè)挑戰(zhàn)。在樣品前處理方面，現(xiàn)代色譜分析樣品制備技術(shù)的發(fā)展趨勢(shì)是使處理樣品的過(guò)程要簡(jiǎn)單、處理速度快、使用裝置小、引進(jìn)的誤差小，對(duì)欲測(cè)組分的選擇性和回收率高。目前國(guó)際上液相色譜通常采用的樣品處理技術(shù)有：固相萃取（MXPD）、超臨界萃取（SFE）、固相微萃取技術(shù)。而我國(guó)目前主要采用傳統(tǒng)的溶劑萃取，液液分配、柱層析凈

2、化，前處理方法自動(dòng)化程度低，提取凈化的效率不高，速度慢，環(huán)境污染嚴(yán)重。新開(kāi)發(fā)的前處理技術(shù)其目的和結(jié)果就是要實(shí)現(xiàn)快速、有效、簡(jiǎn)單和自動(dòng)化的完成分析樣品制備過(guò)程。下以就簡(jiǎn)單介紹幾個(gè)主要的樣品處理技術(shù)：1溶劑萃取溶劑萃取在色譜分析樣品制備中，溶劑萃取方法主要有液液萃取、液固萃取和液氣萃取，它們都是屬于兩相間的傳質(zhì)過(guò)程，即物質(zhì)從一相轉(zhuǎn)入另一相的過(guò)程。溶劑萃取技術(shù)在我們液相色譜分析的樣品制備過(guò)程中，是用到最為廣泛的一種技術(shù)。關(guān)于其原理和方法，在此

3、不再贅述。在液液萃取中非常重要的操作是急速的振動(dòng)樣品，這樣可以確保兩相的完全接觸，有助于質(zhì)量傳遞。由于物質(zhì)劇烈的振動(dòng)，使得乳化現(xiàn)象經(jīng)常發(fā)生，特別是那些含有表面活性劑和脂肪的樣品。為了防止乳化形成，常采用加熱或加鹽的方法破乳。通過(guò)改變KD值，改變?nèi)軇┗蚧瘜W(xué)平衡作用的添加劑，如使用緩沖劑調(diào)節(jié)PH，鹽調(diào)節(jié)離子強(qiáng)度等。常用于破乳的技術(shù)有：（1）加鹽；（2）使用加熱冷卻萃取容器；（3）通過(guò)玻璃棉塞過(guò)濾乳化液樣品；（4）通過(guò)相過(guò)濾紙過(guò)濾乳化液樣品（

4、5）通過(guò)離心作用；（6）加少量的不同的有機(jī)溶劑。溶劑萃取的方式在現(xiàn)代水產(chǎn)品檢測(cè)技中應(yīng)用十分廣泛，因其實(shí)驗(yàn)器材簡(jiǎn)便，經(jīng)濟(jì)，容易操作。在魚(yú)體的孔雀石綠，環(huán)丙沙星等藥物殘留的檢測(cè)中，都有用到溶劑萃取的方式。在孔雀石綠殘留的檢測(cè)中，為了防止乳化現(xiàn)象的產(chǎn)生，也用到了二甘醇這進(jìn)行破乳。2固相萃?。ü滔噍腿。╯olidphaseextractionSPE）3柱如C18柱，陽(yáng)離子交換柱，及氧化鋁柱等，都能對(duì)樣品進(jìn)行凈化及濃縮。在魚(yú)體中已烯雌酚殘留量的檢

5、測(cè)中，用到的C18小柱即是應(yīng)用固相萃取的一個(gè)應(yīng)用案例。利用C的吸附性，除去提取中的多余脂肪，及其他大分子物質(zhì)，以達(dá)到凈化提取液的做用，同時(shí)進(jìn)行濃縮，以提高檢測(cè)的靈敏度。3固相微萃?。ü滔辔⑤腿。╯olidphasemicroextractionSPME）固相微萃取（SPME）是在固相萃取上發(fā)展起來(lái)的一種新型、高效的樣品預(yù)處理技術(shù)，它集采集、濃縮于一體，簡(jiǎn)單、方便、無(wú)溶劑，不會(huì)造成二次污染，是一種有利于環(huán)保的很有應(yīng)用前景的預(yù)處理方法。與液

6、液萃取和固相萃取相比，具有操作時(shí)間短，樣品量小，無(wú)需萃取溶劑，適用于分析揮發(fā)性與非揮發(fā)性物質(zhì)，重現(xiàn)性好等優(yōu)點(diǎn)。固相萃取過(guò)程是一個(gè)平衡過(guò)程，萃取的平衡時(shí)間與攪拌速度、固定相的膜厚以及被分析樣品的分配常數(shù)，擴(kuò)散系數(shù)，萃取溫度有關(guān)。大分子質(zhì)量的物質(zhì)比小分子質(zhì)量的物質(zhì)需更長(zhǎng)的分析時(shí)間。攪拌有利于減少達(dá)到平衡所需時(shí)間，當(dāng)達(dá)到平衡時(shí)，固相微萃取方法的靈敏度最高。SPME包括兩個(gè)過(guò)程：（1）樣品中待分析物在石英纖維上的涂層與樣品間擴(kuò)散、吸附、濃縮過(guò)程

7、以及濃縮的待分析物脫附進(jìn)入分析儀器完成分析過(guò)程。在前一個(gè)過(guò)程中，涂有吸附劑的石英纖維浸入樣品中，使樣品中目標(biāo)化合物從樣品基質(zhì)中擴(kuò)散、萃取、濃縮于涂層上。（2）將石英絲收回針頭中，進(jìn)樣時(shí)直接插入分析儀器的進(jìn)樣室中，如氣相色譜儀的汽化，使萃取的化合物脫附，被載氣導(dǎo)入色譜柱完成分離分析。影響固相微萃取靈敏度的因素很多，但萃取頭涂層種類(lèi)和厚度對(duì)靈敏度的影響最為關(guān)鍵。一般來(lái)說(shuō)，不同種類(lèi)待測(cè)物要用不同類(lèi)型的吸附質(zhì)涂層進(jìn)行萃取，其選擇基本原則是“相似

8、相溶原理”。用極性涂層萃取極性化合物，用非極性涂層萃取非極性化合物。4微波萃取技術(shù)（微波萃取技術(shù)（microamplitudeextractionMAE）微波萃取就是利用極性分子可迅速吸收微波能量來(lái)加熱一些具有極性的溶劑，如乙醇、甲醇、丙酮和水等。因非極性溶劑不能吸收微波能量，所以在微波萃取中不能使用100％的非極性溶劑作為萃取溶劑。一般可在非溶劑中加入一定比例的極性溶劑來(lái)使用。MAE就是將樣品放在聚四氟乙烯材料樣品杯中，加入萃取溶劑后