The presence of Minir1-1 plasmid delays the Escherichia coli cell division.pdf

1、MiniR1-1質(zhì)粒由R1質(zhì)粒演變而來，是由6316個堿基組成的雙鏈DNA分子，包括復(fù)制起始原點(diǎn)oriR1，repA基因，tap,copA，bla基因并編碼ORF1和ORF2的基因。在慢速生長的細(xì)胞中MiniR1-1的存在導(dǎo)致D-期細(xì)胞的聚集，說明此類細(xì)胞的分裂發(fā)生延遲。我們發(fā)現(xiàn)，MiniR1-1質(zhì)粒包括8個DnaA-boxes（DnaA結(jié)合位點(diǎn)），其中一個DnaA-box與經(jīng)典的DnaA-box序列完全匹配，并位于oriR1區(qū)域，另一

2、個DnaA-box與經(jīng)典的DnaA-box序列相比有一個堿基的錯配，與copA基因相鄰，其余的6個DnaA-box均有2個堿基的錯配。DnaA-box定點(diǎn)突變實(shí)驗(yàn)說明MiniR1-1質(zhì)粒導(dǎo)致細(xì)胞分裂的延遲不是通過降低DnaA的可用量來完成。ORF2的一個位點(diǎn)突變抑制細(xì)胞在營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基中的生長，而在營養(yǎng)豐富的培養(yǎng)基中并不抑制其生長，表明ORF2對于細(xì)胞在營養(yǎng)缺陷型培養(yǎng)基中的存活是至關(guān)重要的。熒光顯微鏡分析發(fā)現(xiàn)MiniR1-1并不影響染