簡介：分類號R5126UDC密級重慶醫(yī)科大學碩士學位論文論文題目抑癌基因抑癌基因ARID2對肝癌細胞生物學功能的影響對肝癌細胞生物學功能的影響作者姓名田玲申請學位級別碩士學科、專業(yè)名稱臨床檢驗診斷學臨床檢驗診斷學論文答辯年月2016年4月2016年4月指導教師姓名（職稱、單位名稱）鄭建教授教授唐霓唐霓教授教授重慶醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院重慶醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院感染性疾病分子生物學教育部重點實驗室感染性疾病分子生物學教育部重點實驗室目錄英漢縮略語名詞對照英漢縮略語名詞對照1中文中文摘要摘要3英文摘要英文摘要8論文正文論文正文抑癌基因抑癌基因ARID2對肝癌細胞生物學功能的影響對肝癌細胞生物學功能的影響14第一部分第一部分抑癌基因抑癌基因ARID2對肝對肝癌細胞增殖和遷移能力調控的研究癌細胞增殖和遷移能力調控的研究17前言前言17第1節(jié)ARID2對肝癌細胞增殖能力的調控對肝癌細胞增殖能力的調控1911材料與方法材料與方法192結果結果313討論討論39第2節(jié)ARID2對肝癌細胞遷移能力的調控對肝癌細胞遷移能力的調控4211材料與方法材料與方法422結果結果463討論討論51第二部第二部分ARID2對肝癌細胞凋亡的調控的研究對肝癌細胞凋亡的調控的研究53前言前言531材料與方法材料與方法542結果結果623討論討論70全文總結全文總結74文獻綜述文獻綜述76參考文獻參考文獻82致謝致謝91攻讀學位期間發(fā)表的學術論文攻讀學位期間發(fā)表的學術論文92

簡介：分類號R7357UDC密級重慶醫(yī)科大學碩士學位論文論文題目HIF2ΑSCD1通路通路在低氧低氧誘導誘導肝癌細胞生物學行為肝癌細胞生物學行為中作用作用的研究的研究作者姓名余小慶小慶申請學位級別碩士學科、專業(yè)名稱內科學內科學論文答辯年月202016年5月2016年5月指導教師姓名（職稱、單位名稱）沈薇沈薇教授教授重慶重慶醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院醫(yī)科大學第二附屬醫(yī)院消化消化內科內科目錄英漢縮略語名詞對照英漢縮略語名詞對照1中文中文摘要摘要3英文摘要英文摘要8論文正文論文正文HIFHIF2ΑSCD1SCD1通路在低氧誘導肝癌細胞生物學行為中作用的研究通路在低氧誘導肝癌細胞生物學行為中作用的研究1515第一部分第一部分低氧誘導下肝癌細胞低氧誘導下肝癌細胞HIFHIF2Α2Α與SCSCD1D1蛋白之間的調控關系蛋白之間的調控關系17171材料和方法材料和方法17172結果結果23233討論討論2626第二部分第二部分低氧下低氧下HIFHIF2Α2ΑSCD1SCD1通路對肝癌細胞生物學行為影響通路對肝癌細胞生物學行為影響28281材料和方法材料和方法28282結果結果30303討論討論3434全文總結全文總結3636參考文獻參考文獻3737文獻綜述文獻綜述3939致謝致謝4646攻讀學位期間發(fā)表的學術論文攻讀學位期間發(fā)表的學術論文4747

簡介：分類號R7357UDC密級重慶醫(yī)科大學博士學位論文論文題目超聲靶向微泡介導超聲靶向微泡介導CD133SHRNA轉染對轉染對CD133肝癌肝癌干細胞干細胞生物學生物學特性及上皮間質轉化的特性及上皮間質轉化的影響影響作者姓名劉顏敏劉顏敏申請學位級別博士學科、專業(yè)名稱內科學（消化內科）內科學（消化內科）論文答辯年月2016年5月2016年5月指導教師姓名（職稱、單位名稱）吳小翎吳小翎教授教授重慶醫(yī)科大學第二臨床學院重慶醫(yī)科大學第二臨床學院目錄英漢縮略語名詞對照英漢縮略語名詞對照1中文摘要中文摘要3英文摘要英文摘要8論文正文論文正文超聲靶向微泡介導超聲靶向微泡介導CD133SHRNA轉染對轉染對CD133肝癌干細胞生物學特肝癌干細胞生物學特性及上皮間質轉化的影響性及上皮間質轉化的影響16前言前言16參考文獻參考文獻19第一部分第一部分超聲靶向微泡介導超聲靶向微泡介導CD133SHRNA增強增強CD133肝癌干細胞基因轉染的肝癌干細胞基因轉染的研究研究22前言前言221材料與方法材料與方法232結果結果373討論討論39參考文獻參考文獻44第二部分第二部分超聲靶向微泡介導超聲靶向微泡介導CD133SHRNA轉染對轉染對CD133肝癌干細胞增殖、侵肝癌干細胞增殖、侵襲能力的影響襲能力的影響46前言前言461材料和方法材料和方法462結果結果503討論討論52參考文獻參考文獻59第三部分第三部分超聲靶向微泡介導超聲靶向微泡介導CD133SHRNA轉染對轉染對CD133肝癌干細胞上皮間質肝癌干細胞上皮間質轉化的影響及其分子機制轉化的影響及其分子機制61前言前言611材料與方法材料與方法622結果結果663討論討論67參考文獻參考文獻72全文總結全文總結75文獻綜述文獻綜述76參考文獻參考文獻87致謝94攻讀學位期間發(fā)表的學術論文攻讀學位期間發(fā)表的學術論文95

簡介：分類號R73372UDC密級重慶醫(yī)科大學博士學位論文論文題目YAP對慢性粒細胞白血病慢性粒細胞白血病細胞細胞生物學效應生物學效應的影響影響及其及其機制研究機制研究作者姓名李會李會申請學位級別博士學科、專業(yè)名稱臨床檢驗診斷學臨床檢驗診斷學論文答辯年月2016年5月2016年5月指導教師姓名（職稱、單位名稱）馮文莉馮文莉教授教授重慶醫(yī)科大學檢驗醫(yī)學院重慶醫(yī)科大學檢驗醫(yī)學院臨床檢驗診斷學教育部重點實驗室臨床檢驗診斷學教育部重點實驗室重慶市市級重點實驗室重慶市市級重點實驗室目錄英漢縮略語名詞對照英漢縮略語名詞對照1中文中文摘要摘要3英文摘要英文摘要7論文正文論文正文YAP對慢性粒細胞白血病慢性粒細胞白血病細胞生物學效應的影響及其機制研究細胞生物學效應的影響及其機制研究13前言前言13參考文獻參考文獻17第一部分第一部分YAP在慢性粒細胞白血病慢性粒細胞白血病中的表達及中的表達及其與BCRABL的關系的關系211材料與方法材料與方法212結果結果303討論討論37小結小結39參考文獻參考文獻40第二部分第二部分YAP對慢性粒細胞白血病慢性粒細胞白血病細胞細胞株增殖和凋亡的影響及增殖和凋亡的影響及其機制其機制421材料與方法材料與方法422結果結果453討論討論51小結小結53參考文獻參考文獻54第三部分第三部分VP單獨或聯(lián)合單獨或聯(lián)合IM對K562細胞細胞致小鼠白血病能力致小鼠白血病能力的影響的影響571材料與方法材料與方法572結果結果603討論討論67小結小結69參考文獻參考文獻70全文總結全文總結72課題的創(chuàng)新之處課題的創(chuàng)新之處74課題不足及后續(xù)研究計劃課題不足及后續(xù)研究計劃75

簡介：目的大量研究表明植物，尤其是傳統(tǒng)草藥學中的藥用植物可以被提取出有效成分用于臨床或科學研究使用，其中最有代表性的成果分別是我國科學家發(fā)現(xiàn)的青蒿素和外國研究人員分離的紫杉醇。這些植物的次生代謝產物雖然對植物自身生長并非絕對必要，但卻有著較高的潛在藥用價值，這與其往往作用于植物的天敵或競爭植物的功能相一致。近二十年，研究者們更進一步的把植物相關的糖類的藥用價值作為新的研究方向，尤以多糖的相關研究為多。已在多種經典的傳統(tǒng)藥用植物中發(fā)現(xiàn)了有臨床價值的多糖。同時與藥用植物共生的微生物也可能是其有效成分的來源，這可能通過兩種機制來完成一種是微生物與植物的信息交流刺激藥用植物合成特定的次生代謝產物；另一種即微生物自身合成某些特殊的活性物質。而在這些共生微生物中，植物內生菌又是一個多樣性頗為豐富的類群，已經有較多針對植物內生菌的研究發(fā)表，并報道了一些其生物活性及潛在臨床應用價值的發(fā)現(xiàn)。我國傳統(tǒng)藥學認為黨參具有補中益氣，健脾益肺之功效?，F(xiàn)代科學研究對黨參及其提取物的生物活性和臨床價值有一定的研究報道，其中包括抗疲勞，改善記憶能力，增強免疫系統(tǒng)某些功能，保護胃腸道黏膜等。而成分相關的研究主要集中在其多糖成分的研究上，而由于多糖自身的特性因而導致難以確定具體成分，所以無法確定具體有效成分的結構。本課題組的合作者另辟蹊徑，分離了黨參的一種內生菌（命名為14DS1），并提取了其胞外寡糖。結合我們課題組的專業(yè)方向，本研究主要從該胞外寡糖對免疫系統(tǒng)（具體而言為巨噬細胞）激活和血管新生的影響進行研究，以確定其是否有相關的生物學活性和潛在臨床價值。方法免疫相關部分主要以小鼠巨噬細胞系RAW2467為模型，研究14DS1胞外寡糖在體外對巨噬細胞的影響。具體實驗主要包括不同濃度處理下的形態(tài)學改變、TNFΑ在MRNA水平的表達（REALTIMEPCR）、GRIESS反應（監(jiān)測NO分泌量）、吞噬能力測定、TRANSWELL實驗、微絲形態(tài)觀察和細胞粘附實驗等。血管新生相關部分主要使用HUVEC、HELA、A549和MDAMB231等細胞系。主要實驗包括體外成管實驗、劃痕愈合實驗、微管形態(tài)實驗、紡錘體形態(tài)與定位觀察、流式細胞分析等。結果在14DS1胞外寡糖處理下，形態(tài)學與TNFΑ表達量、NO分泌量等指標均顯示細胞進入活化狀態(tài)，但其吞噬能力并未觀測到變化。細胞在TRANSWELL實驗中遷移能力也明顯升高，微絲也顯示出放射狀的纖維狀結構，但普通的粘附實驗并無變化。高濃度該寡糖會抑制體外成管，抑制細胞遷移。對微管形態(tài)無明顯影響，細胞粘附實驗無明顯影響。處理組的紡錘體與基底面（玻片提供的培養(yǎng)平面）相對角度變大，處理組紡錘體定位偏移較對照組為大。藥物處理組細胞更高比例滯留于S期，高濃度組凋亡比例升高結論14DS1胞外寡糖可以在多個指標上激活小鼠巨噬細胞系，同時影響其遷移能力和微絲形態(tài)，但不影響其吞噬能力和對膠原的粘附。對體外成管和傷痕愈合有一定影響。機制方面，已經初步排除了其通過影響微管形態(tài)和膠原相關的粘附來實現(xiàn)上述效應，但和微絲可能有一定關系。同時有證據表明其可對正常的紡錘體形成發(fā)生影響并促使細胞傾向于停滯于S期并提高凋亡率，提示可能影響紡錘體相關的精確調控和細胞周期中的DNA合成，這些是否與前述現(xiàn)象的背后機制有關，尚待進一步探討。

簡介：研究目的探究MIRNA451對RF6A視網膜血管內皮細胞的增殖、遷移及管腔形成能力等生物學特征的影響及其可能的機制，為增殖性糖尿病視網膜病變的治療提供理論基礎。方法1利用脂質體轉染法將MIRNA451的類似物（MIMIC）和抑制劑（INHIBIT）轉染進RF6A細胞中，測定轉染效率。2將RF6A細胞分為四個組MIRNA451MIMIC組、MIRNA451MIMICCONTROL（類似物對照）組、MIRNA451INHIBIT組、MIRNA451INHIBITCONTROL（抑制劑對照）組，利用CCK8檢測細胞增殖能力，細胞劃痕實驗和TRANSWELL遷移實驗檢測細胞遷移能力，MATRIGEL管腔形成實驗觀察細胞形成管腔的能力。RTPCR檢測與生物學行為相關基因的表達情況。3以MIRNA451為研究對象，利用MIRBASE、MIRA、TARGETSCAN、PICTAR等數據庫對MIRNA451的作用靶點進行生物信息學分析，為實驗提供理論指導和依據。4利用SPSS190軟件對實驗結果進行統(tǒng)計學分析。組間的兩兩比較需要采用單因素方差分析（ONEWAYANOVA），P結果1轉染效率檢測的結果顯示，6H后MIRNA451MIMIC組在20UM時即有較高的轉染效率，MIRNA451INHIBIT組在80UM的轉染效率較高。2CCK8細胞增殖實驗結果顯示24H時，MIMIC組（1049±0020）較MIMICCONTROL組（1258±0034）低，結果有統(tǒng)計學差異（F0413，P0000）。48H時MIMIC組（1223±0077）較MIMICCONTROL組（1400±0037）低，結果具有統(tǒng)計學差異（F2401，P0002）。INHIBIT組與INHIBITCONTROL組相比較，24H時，兩組間無統(tǒng)計學差異（P005），48H時，INHIBIT組（1748±0023）較INHIBITCONTROL組（1689±0421）高，結果有統(tǒng)計學差異（F1407，P0000）。3劃痕實驗結果顯示MIRNA451MIMIC組與MIMICCONTROL組在觀察的時間段內無統(tǒng)計學差異。6H時MIRNA451INHIBIT組（0106±0036）較INHIBITCONTROL組（0239±0030）低，結果有統(tǒng)計學差異（F0039，P0008），12H時MIRNA451INHIBIT組（0248±0045）較INHIBITCONTROL組（0445±0053）低，結果有統(tǒng)計學差異（F0227，P0008）。24H時無統(tǒng)計學差異（P4TRANSWELL結果顯示MIRNA451MIMIC組與MIMICCONTROL組在觀察的時間段內無統(tǒng)計學差異（P5MATRIGEL管腔形成結果顯示MIRNA451MIMIC（60667±87369）組較MIMICCONTROL（16000±6000）組高，結果有統(tǒng)計學差異（F0688，P0002）。MIRNA451INHIBIT組（24667±3786）較INHIBITCONTROL組（65333±5033）低，結果有統(tǒng)計學差異（F0163，P0000）。6RTPCR結果顯示（1）CYCLINA1的表達，24H時MIMIC組（0424±0033）低于MIMICCONTROL組，差異具有統(tǒng)計學意義（F15923，P0000），INHIBIT組（0042±0042）低于INHIBITCONTROL組，具有統(tǒng)計學差異（F14899，P0000）；（2）CYCLIND1的表達，24H時MIMIC組（0744±0105）低于MIMICCONTROL組，結果具有統(tǒng)計學差異（F5088，P0014），INHIBIT組同INHIBITCONTROL組間無統(tǒng)計學差異（P＞005）；（3）PDGFRΑ的表達，24H時MIMIC組同MIMICCONTROL組間無統(tǒng)計學差異（P＞005），INHIBIT組（1762±0285）高于INHIBITCONTROL組，結果具有統(tǒng)計學差異（F5549，P001）；（4）MMP2的表達在24H時，MIMIC組（0535±0084）低于MIMICCONTROL組，差異具有統(tǒng)計學意義（F11495，P0001），INHIBIT組（0042±0016）低于INHIBITCONTROL組，具有統(tǒng)計學差異（F8910，P0000）。7生物信息學結果表明，MIRNA451主要參與調節(jié)細胞發(fā)育、負性調節(jié)細胞增生及多種酶活性等生物學過程（P結論1通過脂質體轉染法，MIRNA451MIMIC和MIRNA451INHIBIT可以有效的上調或下調RF6A血管內皮細胞中MIRNA451的表達。結果顯示抑制細胞中MIRNA451表達的結果更有意義。當細胞中MIRNA451的表達降低時，增殖行為所受影響不大，細胞遷移受到抑制，形成管腔的能力下降，提示利用MIRNA451治療PDR具有潛在的可能性。2在下調MIRNA451表達水平后，CYCLINS、PDGFRΑ和MMP2變化的趨勢與細胞形態(tài)學的改變相吻合，提示CYCLINS、PDGFRΑ和MMP2可能參與MIRNA451作用RF6A細胞生物學行為的過程。其中，CYCLINS和PDGFRΑ可以反映細胞增殖能力，MMP2反應細胞遷移能力。3MIRNA451對RF6A細胞的影響可能是經由多種信號通路介導的復雜過程，將其作為治療靶點需要注意其可能出現(xiàn)的其他副作用。

簡介：上海交通大學碩士學位論文CXCL12參與神經病理性疼痛交感芽生的細胞生物學機制碩士研究生徐江濤學號1137229371導師馬柯教授申請學位醫(yī)學科學碩士學科麻醉學研究方向神經病理性疼痛的機制研究項目資助國家自然科學基金（NO81371246）所在單位新華醫(yī)院答辯日期2016年5月授予學位單位上海交通大學上海交通大學碩士學位論文ICXCL12參與神經病理性疼痛交感芽生的細胞生物學機制摘要目的觀察CXCL12與其受體對原代培養(yǎng)的交感神經元軸突生長的作用；討論其參與神經病理性疼痛交感神經軸突形態(tài)可塑性改變的相關機制；為臨床治療交感神經維持性神經病理性疼痛提示新靶點。方法極低密度原代培養(yǎng)SPRAGUEDAWLEY（SD）大鼠交感神經元，免疫熒光染色檢測CXCR4受體與酪氨酸羥化酶（交感神經元標記物，TH）表達情況，激光共聚焦顯微鏡共定位受體表達。低密度原代培養(yǎng)SD大鼠、ICR小鼠交感神經元，免疫熒光標記CXCR4、CXCR7的表達，并進行計數。使用CXCL12干預極低密度原代培養(yǎng)SD大鼠交感神經元，并設對照組，離體培養(yǎng)12小時后對全部神經元軸突進行活細胞熒光染色，并對神經元進行逐一拍照分析，測量每個細胞的軸突總長度和軸突分支點數量，并對神經元進行SHOLL分析，觀察CXCL12對交感新生軸突生長的影響。結果本研究發(fā)現(xiàn)CXCR4和CXCR7都表達于大鼠交感神經元上，在TH陽性神經元上的共定位率均為100。原代培養(yǎng)小鼠交感神經元也

簡介：分類號R7359密級公開UDC616006編號10299B1114012博士學位論博士學位論文DOCTALDISSERTATION論文題目慢病毒載體介導RNA干擾抑制骨橋蛋白對胰腺癌細胞生物學行為的影響學科專業(yè)臨床檢驗診斷學作者姓名范昕指導教師張建新答辯日期2016年07月30號獨創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已注明引用的內容以外，本論文不包含任何其他個人或集體已經發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。學位論文作者簽名日期年月日

簡介：點擊查看更多3D膠原支架微環(huán)境對樹突狀細胞發(fā)育和生物學功能影響的研究.pdf精彩內容。

簡介：511111IIIIIIIIIILLLLY3277988多之京倆和曙學院中國哥緣甜芬阮博士研究生學位論文北京協(xié)和醫(yī)學院研究生院中國醫(yī)學科學院北京協(xié)和醫(yī)學院清華大學醫(yī)學部博士學位論文2

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簡介：分類號分類號密級密級UDC學號學號T10411201301011南昌大學南昌大學專業(yè)學位博士專業(yè)學位博士研究生研究生學位論文MIR29B靶向作用于靶向作用于HER2對乳腺癌細胞生物學功對乳腺癌細胞生物學功能的影響能的影響THEINFLUENCEOFMIR29BONBIOLOGICALFUNCTIONOFBREASTCANCERBYTARGETINGHER2付瑩培養(yǎng)單位（院、系）南昌大學第一附屬醫(yī)院指導教師姓名、職稱熊建萍教授主任醫(yī)師專業(yè)學位種類臨床醫(yī)學博士專業(yè)領域名稱腫瘤學論文答辯日期2016年6月答辯委員會主席評閱人2016年5月摘要摘要乳腺癌BREASTCANCER是一種女性惡性腫瘤，對患者身心產生巨大傷害。目前對于造成乳腺癌患者死亡的具體原因機制并不清楚。在腫瘤等多種疾病中，微小RNA（MICRONRAMIRNA）具有重要的功能，MIRNA既可作為抑癌基因也可作為致癌基因，從而在腫瘤發(fā)生發(fā)展的全過程中發(fā)揮不同的作用，同時MIRNA自身也可以發(fā)生突變或缺失等現(xiàn)象，進而影響相關基因的表達發(fā)生異常。對MIRNA進行分析，可發(fā)現(xiàn)多種MIRNA與生命活動關鍵蛋白和信號通路的調節(jié)有關，通過對這些蛋白和通路進行研究，可了解MIRNA發(fā)揮的作用的具體機制。而乳腺癌的發(fā)生發(fā)展與轉移等過程是由許多MIRNA信號分子調控的，通過上述通路調節(jié)的研究，我們可以得出MIRNA在乳腺癌中的的作用，從而為乳腺癌的前期診斷和后期治療提供一些新的思路和方法。MIR29B作為MIRNA中的成員之一，參與了多種腫瘤細胞的增殖、分化、凋亡、侵襲和轉移過程。MIR29B已成為與腫瘤診斷、治療和預后相關的具有潛在價值的腫瘤標志物。然而，MIR29B在乳腺癌中的作用目前尚未明確，因此，研究MIR29B在乳腺癌發(fā)生發(fā)展過程中的作用及其作用靶點的探討十分具有意義。目的目的探討微小RNA29B（MIRNA29B）在乳腺癌組織和細胞中的表達水平，分析MIRNA29B的表達與乳腺癌患者臨床病理參數及預后的相關性，觀察MIRNA29B對乳腺癌細胞周期、增殖、凋亡和遷移的影響，生物信息學預測MIRNA29B的靶基因，并初步探討其可能的作用機制。方法方法采用實時熒光定量PCR的方法檢測MIR29B在乳腺癌細胞株和乳腺癌患者癌組織中的表達，采用總RNA提取試劑盒提取新鮮冰凍組織及細胞株中總RNA，使用PRIMERT試劑盒反轉錄法合成CDNA，ABI7500熒光定量PCR儀進行PCR反應；采用統(tǒng)計分析法對乳腺癌癌組織中MIR29B水平與患者臨床病理參數進行相關性分析。CCK8法和細胞劃痕實驗分別檢測過表達MIR29B后乳腺癌細胞增殖和遷移，流式細胞術檢測乳腺癌細胞的細胞周期和凋亡情況。通過TARGETSCAN和MIRA等靶基因預測數據庫對MIR29B的靶基因進行預測，

簡介：學位論文獨創(chuàng)性聲明本人所呈交的論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確說明并表示謝意。學位論文作者簽名日期學位論文使用授權聲明本人完全了解安徽醫(yī)科大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定學校有權保留學位論文并向國家主管部門或其指定機構送交論文的電子版和紙質版，有權允許論文進入學校圖書館被查閱，有權將學位論文的內容編入有關數據庫進行檢索，有權將學位論文的標題和摘要匯編出版。愿意將本人的學位論文提交中國博士學位論文全文數據庫、中國優(yōu)秀碩士學位論文全文數據庫和中國學位論文全文數據庫中全文發(fā)表，并可以以電子、網絡及其他數字媒體形式公開出版，并同意編入CNKI中國知識資源總庫，在中國博碩士學位論文評價數據庫中使用和在互聯(lián)網上傳播。保密的學位論文在解密后適用本規(guī)定。學位論文作者簽名導師簽名日期日期

簡介：分類號分類號R5R55151學校代碼學校代碼1039210392學科專業(yè)代碼學科專業(yè)代碼105101105101學號號21410033214100330707碩士學位學位論文論文伴骨髓有核紅細胞增多的急性髓系白血病與骨髓增生伴骨髓有核紅細胞增多的急性髓系白血病與骨髓增生異常綜合征的生物學特點與預后分析異常綜合征的生物學特點與預后分析ANALYSISOFTHEBIOLOGICALCHARACTERISTICSANDPROGNOSISOFACUTEMYELOIDLEUKEMIAANDMYELODYSPLASTICSYNDROMESWITHMORETHAN50OFBONEMARROWERYTHROPOIETICCELLS學位類型型臨床醫(yī)學碩士臨床醫(yī)學碩士所在學院院協(xié)和協(xié)和臨床臨床醫(yī)學院學院申請人姓名申請人姓名李巧瑜李巧瑜學科學科、專業(yè)專業(yè)內科學（血液?。﹥瓤茖W（血液病）導師師林艷娟林艷娟副教授副教授研究起止日期研究起止日期20162016年1010月至月至20172017年0303月答辯委員會主席答辯委員會主席陳志哲陳志哲教授教授答辯日期答辯日期20172017年0505月1717日福建醫(yī)科大學碩士學位論文目錄中文摘要中文摘要1英文摘要英文摘要3前言前言61材料與方法材料與方法7111研究對象71212研究方法71313結果判斷9114隨訪9115數據的統(tǒng)計方法92結果結果93討論討論153131流式細胞學特點163232染色體核型分析特點183333分子生物學特點18結論結論20參考文獻參考文獻21綜述綜述26致謝致謝22

簡介：目的通過慢病毒介導MMP3SHRNA和FASSIRNA雙基因體外轉染人退變髓核細胞，探討單基因、雙基因聯(lián)合轉染后對人退變髓核細胞功能的影響。方法A體外培養(yǎng)人退變髓核細胞，對其進行臺盼藍染色、甲苯胺藍染色，觀察細胞活力以及細胞形態(tài)；B分別根據人MMP3基因與FAS基因的MRNA序列合成不同的MMP3SHRNA與FASSIRNA序列，與酶切后的慢載體鏈接并轉入感受態(tài)293T細胞，對慢病毒進行包裝。C慢病毒感染退變髓核細胞，按照處理方式不同，本實驗分為5組，分別為A空白對照組，BAAV陰性對照組，CAAVMMP3SHRNA組，DAAVFASSIRNA組，EAAVFASSIRNAMMP3SHRNA組；D轉染72小時后CCK8測定各組之間的細胞增殖情況；72小時通過熒光定量PCR檢測轉染髓核細胞MRNA水平變化MMP3、FAS以及Ⅱ型膠原、蛋白多糖；96小時后通過WESTERNBLOT檢測髓核細胞內蛋白水平變化（Ⅱ型膠原蛋白、蛋白多糖）。結果A細胞形態(tài)學進行觀察發(fā)現(xiàn)初消化的成人退變髓核細胞貼壁時間約為45天，初貼壁時的形態(tài)表現(xiàn)為橢圓形、梭形、多角形，形狀不規(guī)則，胞質向外伸突并隨著時間延長逐漸伸長。經1014D以后，90細胞呈融合狀態(tài)，形狀類似漩渦狀或火焰狀的細胞團，胞質豐富且?guī)в幸欢ㄕ酃庑?，細胞核較大輪廓清楚，呈卵圓形核，有大約13個核仁。經過傳代后，第一代細胞之間的粘附性較原代變差，細胞形態(tài)變?yōu)殚L梭形，這與之前的研究相一致原代髓核細胞經甲苯胺藍染色后呈短梭形、多角形等不規(guī)則形狀，胞質均呈藍色，細胞核位于細胞中央或偏向一側細胞膜，顏色較周圍胞質深。B退變髓核細胞原代培養(yǎng)期間存活率在97以上，第1代培養(yǎng)期間存活率在9296之間，第二代仍能維持90左右以后細胞存活率逐漸下降。C72小時后用熒光顯微鏡檢測重組慢病毒侵染人退變髓核細胞后的GFP、BFP表達情況，結果顯示各組退變髓核細胞均已達到很高的轉染效果。D與空白對照組相比較，F(xiàn)AS干擾組、MMP3干擾組及MMP3FAS雙基因共轉組FAS、MMP3、II型膠原、蛋白多糖的MRNA表達量增加，且雙基因組效果優(yōu)于單基因組，與空白對照組相比較，F(xiàn)AS干擾組、MMP3干擾組及MMP3FAS雙基因共轉組髓核細胞的蛋白多糖和Ⅱ型膠原蛋白表達量增高，且雙基因組效果優(yōu)于單基因組，以上結果差異均具有統(tǒng)計學意義（P＜005）。結論1通過基因沉默技術干擾髓核細胞內FAS、MMP3基因的表達，可以有效抑制髓核細胞的凋亡，雙基因共轉染具有協(xié)同作用。2慢病毒介導的RNAI可以顯著抑制人退變髓核細胞MMP3、FAS的表達，增加人退變髓核細胞外基質表達量，且雙基因具有協(xié)同效應。