CXCL12參與神經(jīng)病理性疼痛交感芽生的細(xì)胞生物學(xué)機(jī)制.pdf

1、目的：觀察CXCL12與其受體對原代培養(yǎng)的交感神經(jīng)元軸突生長的作用；討論其參與神經(jīng)病理性疼痛交感神經(jīng)軸突形態(tài)可塑性改變的相關(guān)機(jī)制；為臨床治療交感神經(jīng)維持性神經(jīng)病理性疼痛提示新靶點(diǎn)。
　　方法：極低密度原代培養(yǎng)Sprague-Dawley（SD）大鼠交感神經(jīng)元，免疫熒光染色檢測CXCR4受體與酪氨酸羥化酶（交感神經(jīng)元標(biāo)記物，TH）表達(dá)情況，激光共聚焦顯微鏡共定位受體表達(dá)。低密度原代培養(yǎng) SD大鼠、ICR小鼠交感神經(jīng)元，免疫熒光標(biāo)記C

2、XCR4、CXCR7的表達(dá)，并進(jìn)行計(jì)數(shù)。使用CXCL12干預(yù)極低密度原代培養(yǎng)SD大鼠交感神經(jīng)元，并設(shè)對照組，離體培養(yǎng)12小時(shí)后對全部神經(jīng)元軸突進(jìn)行活細(xì)胞熒光染色，并對神經(jīng)元進(jìn)行逐一拍照分析，測量每個(gè)細(xì)胞的軸突總長度和軸突分支點(diǎn)數(shù)量，并對神經(jīng)元進(jìn)行Sholl分析，觀察CXCL12對交感新生軸突生長的影響。
　　結(jié)果：發(fā)現(xiàn)CXCR4和 CXCR7都表達(dá)于大鼠交感神經(jīng)元上，在TH陽性神經(jīng)元上的共定位率均為100％。原代培養(yǎng)小鼠交感神經(jīng)元

3、也表達(dá)CXCR4和CXCR7。CXCL12的疼痛相關(guān)的內(nèi)源受體CXCR4定位于原代培養(yǎng)的交感神經(jīng)元胞體、軸突與生長錐。使用CXCL12干預(yù)使原代培養(yǎng)的交感神經(jīng)元的軸突復(fù)雜度增加（P＜0.001），并使軸突分支點(diǎn)數(shù)量增加（P＜0.05），但其對軸突總長度的影響無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。進(jìn)一步只針對靠近胞體的第一級軸突進(jìn)行Sholl分析，發(fā)現(xiàn)第一級軸突復(fù)雜度較對照組明顯下降（P＜0.0001），即CXCL12干預(yù)通過增加非第一級新生軸突的分支數(shù)量而增加