rhEPO對神經(jīng)病理性疼痛大鼠的鎮(zhèn)痛作用及機制研究.pdf

1、[研究背景]
　　 中樞或外周神經(jīng)系統(tǒng)損傷或功能障礙可引起以自發(fā)痛(spontaneous pain)、痛覺過敏(hyperalgesia)及痛覺超敏(allodynia)為特征的神經(jīng)病理性疼痛(neuropathic pain)。神經(jīng)病理性疼痛發(fā)生機制復(fù)雜,難于治療,嚴(yán)重影響患者的日常生活,因此進(jìn)一步深化對神經(jīng)病理性疼痛發(fā)生機制的理解,探尋新的治療藥物是神經(jīng)病理性疼痛的重要研究方向。目前的研究多集中在神經(jīng)病理性疼痛形成后的治療

2、上,而針對該病在發(fā)生過程中進(jìn)行預(yù)防性干預(yù)的研究比較缺乏。在神經(jīng)損傷之初或損傷之前,使用藥物保護神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞,減輕促炎因子上調(diào)導(dǎo)致的細(xì)胞激活和細(xì)胞死亡在神經(jīng)痛的治療中具有一定價值。傳統(tǒng)的神經(jīng)藥物如神經(jīng)生長因子系統(tǒng)NGF-β、NT-4等,因在神經(jīng)痛的發(fā)生和維持中可能起到促進(jìn)痛覺過敏的作用而受到限制。研究發(fā)現(xiàn)促紅細(xì)胞生成素(erythropoietin,EPO)與這些傳統(tǒng)神經(jīng)保護藥物不同。EPO具有保護初級感覺神經(jīng)元、脊髓神經(jīng)元和膠質(zhì)細(xì)胞

3、等作用,而且不誘發(fā)疼痛。多項研究提示EPO具有減輕異常疼痛的作用,其機制可能與其減輕背根神經(jīng)節(jié)和脊髓背角神經(jīng)元調(diào)亡,降低外周膠質(zhì)細(xì)胞介導(dǎo)的神經(jīng)炎性和免疫反應(yīng)等因素有關(guān)。本文選用人工合成的外源性EPO,即重組人促紅細(xì)胞生成素(recombinant humanerythropoietin,rhEPO)為干預(yù)藥物,采用預(yù)防給藥的方法,以腰5(lumbar five,L5)脊神經(jīng)切斷大鼠為神經(jīng)病理性疼痛的模型,評估了rhEPO預(yù)處理對大鼠行為

4、學(xué)及腦細(xì)胞因子釋放、核因子NF-κB的活性變化的影響。以期探討rhEPO參與神經(jīng)病理性疼痛的可能機制。
　　 [目的]
　　 研究rhEPO對神經(jīng)病理性大鼠的行為學(xué)及腦炎性細(xì)胞因子和核因子NF-κB活性的影響。
　　 [材料和方法]
　　 體重190～220 g,出生8～10周,成年雄性SD(Sprague-Dawley)大鼠,按照Kim和Chung的方法通過L5脊神經(jīng)的結(jié)扎橫斷建立神經(jīng)損傷模型。將大鼠隨

5、機分為5組(n=10):(1)假手術(shù)組,(2)損傷腹腔注射生理鹽水組(生理鹽水組),(3)損傷腹腔注射rhEP05000 U/kg(rhEPO5000組),(4)損傷腹腔注射rhEPO3000 U/kg(rhEPO3000組),(5)損傷腹腔注射rhEPO1000 U/kg(rhEPO1000組)。所有大鼠在術(shù)前當(dāng)天及術(shù)后每日16時,腹腔注射相應(yīng)劑量藥物一次,測量術(shù)前當(dāng)天及術(shù)后第3、7、14 d機械、熱痛覺改變。采用ELISA測定術(shù)后第

6、7 d大鼠腦組織(n=8)TNF-α、IL-1β、IL-6及IL-10的水平。采用凝膠電遷移法(EMSA)測定術(shù)后第7 d大鼠腦組織核因子NF-κB活性。
　　 [結(jié)果]
　　 脊神經(jīng)損傷后大鼠一般情況均良好,但出現(xiàn)了明顯的機械痛覺超敏和熱痛覺過敏表現(xiàn),在術(shù)后第3 d達(dá)到高峰,持續(xù)至術(shù)后第14 d,證明大鼠神經(jīng)病理性疼痛模型制作成功。與生理鹽水組比,rhEP05000和3000組大鼠機械和熱痛閾值、大腦組織TNF-α、I