簡介：研究背景目前研究認為，腫瘤細胞、腫瘤分泌的細胞因子和骨髓骨微環(huán)境之間的相互作用在骨腫瘤的發(fā)生發(fā)展起著不可或缺的作用。在腫瘤基質(zhì)細胞中，腫瘤相關巨噬細胞TUMASSOCIATEDMACROPHAGESTAMS在數(shù)量和功能上具有重要的地位。我們前期研究發(fā)現(xiàn)，在尤文肉瘤組織中存在大量的TAMS浸潤，另外，本課題組已研究證實LET7A在尤文肉瘤充當抑癌基因的角色，可以抑制尤文肉瘤的生長。但在尤文肉瘤中，LET7A是否與巨噬細胞的浸潤相關目前未見相關報道，針對這一問題，我們進行了相關的研究。研究目的探討LET7A對尤文肉瘤巨噬細胞浸潤和尤文肉瘤惡性表型的影響及其機制。方法首先，REALTIMEPCR檢測LET7A在16例尤文肉瘤組織及細胞的相對表達量；免疫組化檢測尤文肉瘤組織TAMSCD68細胞的浸潤程度，并與LET7A表達量行相關性分析；單核細胞趨化實驗檢測尤文肉瘤過表達LET7A對外周血單核細胞趨化的影響；CCK8法、細胞劃痕實驗、TRANSWELL實驗以及單核細胞趨化實驗分別檢測尤文肉瘤細胞過表達LET7A后對其增殖、遷移、侵襲以及外周血單核細胞募集能力的影響；生物信息學分析LET7A靶基因預測結(jié)果，確定候選靶基因，雙熒光報告試驗、RESCUE實驗以及WESTERNBLOTTING實驗驗證LET7A的靶向作用；最后，構(gòu)建尤文肉瘤裸鼠荷瘤模型，局部注射觀察LET7AMIMIC對瘤體生長的影響以及對巨噬細胞浸潤的影響，并進行相關分析。結(jié)果REALTIMEPCR結(jié)果顯示LET7A在尤文肉瘤組織和細胞中表達下降，免疫組化結(jié)果顯示尤文肉瘤組織高表達TAMS標志物CD68，巨噬細胞的浸潤程度與LET7A的表達量呈負相關，這些結(jié)果提示LET7A在尤文肉瘤可能充當抑癌基因的角色，并參與調(diào)節(jié)尤文肉瘤組織巨噬細胞的浸潤；細胞功能學性實驗證實，過表達LET7A可以顯著抑制其增殖、遷移、侵襲以及對外周血單核細胞的募集能力；生物信息學分析我們確定信號轉(zhuǎn)導與轉(zhuǎn)錄激活因子3（SIGNALTRANSDUCERACTIVATOFTRANION3STAT3）為我們感興趣的靶基因，雙熒光報告實驗、RESCUE實驗及WESTERNBLOTTING實驗證實STAT3為LET7A的直接靶基因，LET7A通過直接靶向STAT3介導抑癌以及對巨噬細胞募集的作用；最后，裸鼠荷瘤實驗我們發(fā)現(xiàn)，恢復LET7A的表達可明顯地抑制瘤塊的生長以及巨噬細胞的浸潤，同時靶基因STAT3的表達也明顯下調(diào)。結(jié)論在尤文肉瘤中，抑癌基因LET7A可以抑制巨噬細胞的浸潤以及腫瘤的惡性表型，其機制是部分通過LET7ASTAT3軸實現(xiàn)的，這為將來尤文肉瘤的分子治療提供理論依據(jù)。

簡介：熱塑充填時牙根面溫度變化及熱刺激對牙周膜細胞熱塑充填時牙根面溫度變化及熱刺激對牙周膜細胞生物生物學特性學特性影響影響的研究研究陶榮培養(yǎng)類別全日制學位類型專業(yè)學位一級學科專業(yè)類口腔醫(yī)學二級學科專業(yè)牙體牙髓病學研究方向牙髓病學指導教師倪龍興教授（主任醫(yī)師）培養(yǎng)單位口腔醫(yī)院牙體牙髓病科二O一七年五月分類號R7813UDC61631密級公開目錄縮略語表1中文摘要2英文摘要5前言9文獻回顧11正文22實驗一BL熱塑系統(tǒng)充填根管引起牙根表面溫度變化的研究221材料222方法233結(jié)果254討論26實驗二不同根管壁厚度在進行充填時牙根表面溫度變化的差異分析291材料292方法293數(shù)據(jù)統(tǒng)計學分析304結(jié)果305討論32實驗三熱刺激對正常及炎癥牙周膜細胞生物學特性影響的初步探究341材料342方法343統(tǒng)計學分析384結(jié)果385討論42

簡介：分類號密級UDC編號安徽醫(yī)科大學學位論文慢病毒介導的慢病毒介導的CYP17A1基因沉默對膠質(zhì)瘤細胞生物學基因沉默對膠質(zhì)瘤細胞生物學活性的影響活性的影響B(tài)IOLOGICALSIGNIFICANCEOFCYP17A1INGLIOMA牛萬祥指導教師姓名牛朝詩教授安徽醫(yī)科大學附屬省立醫(yī)院申請學位級別碩士專業(yè)名稱外科學（神外）提交論文日期201703論文答辯日期201705學位授予單位和日期安徽醫(yī)科大學201705答辯委員會主席徐善水教授評閱人盲審2017年05月

簡介：分類號Z密級單位代碼學號、≮。毛LFJ一；二1201414181碩士學位論文THESISFORMASTERDEGIEE論文J題昏WNT2B對肝細胞癌生物學功能的影晌及相關機制探究THEEFFECTOFWNT2BONBIOLOGICALFUNCTIONOFHEPATOCELLULARCLRCMOMAANDITSRELATEDMECHANISMS作者培養(yǎng)專業(yè)指導合作姓名單位名稱教師導師李思宇萄學院免疫藥物學張建教授20T7年5月19日原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均己在文中以明確方式標明。本聲明的法律責任由本人承擔。論文作者簽名壟盟曼日期2竺圭蘭關于學位論文使用授權的聲明本人同意學校保留或向國家有關部門或機構(gòu)送交論文的印刷件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權山東大學可以將本學位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或其他復制手段保存論文和匯編本學位論文。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定論文作者簽名壟I銎皇導師簽名障珥型

簡介：衰老是生物體不可避免的生命規(guī)律。隨著生物體年齡的增加，機體器官的組織結(jié)構(gòu)和生理功能進行性衰退，最終引起衰老相關老年性疾病。目前，對于衰老研究形成了多種衰老學說，其中干細胞衰老學說是解釋機體衰老的最新學說，該學說認為生物體的衰老實際上是它的干細胞衰老，所有衰老現(xiàn)象包括組織器官退變、功能喪失、腫瘤發(fā)生和反復感染等老年性疾病都可以反映出成體干細胞衰老的水平。此外，由于干細胞的衰老導致其自我更新和多向分化能力衰退，這也必將導致組織器官結(jié)構(gòu)與功能的逐漸衰退、損傷組織難以修復再生和伴隨疾病的產(chǎn)生。科學家提出干細胞是研究細胞衰老的最好模型，尋找重新激活干細胞的方法和調(diào)控它靶向分化在預防老年疾病和治療退行性疾病中有不可估量的價值。造血誘導微環(huán)境（HEMATOPOIETICINDUCTIVEMICROENVIRONMENT，HIM）是造血干細胞（HAEMOPOIETICSTEMCELLS，HSCS）賴以生長發(fā)育和增殖分化的場所，其結(jié)構(gòu)和功能完整是維系正常造血功能的重要因素。造血基質(zhì)細胞（BONEMARROWSTROMALCELLS，BMSCS）作為HIM的核心組分，不僅通過形成HSCS生長發(fā)育的“龕”、分泌造血生長因子和細胞外基質(zhì)等方式支持和調(diào)控HSCS自我更新與分化，還與多種血液系統(tǒng)疾病的發(fā)生、發(fā)展和預后密切相關，因此骨髓基質(zhì)細胞成為研究HIM結(jié)構(gòu)與功能最為重要的研究對象。課題組前期研究證明，隨著小鼠年齡增加，其HSCS也隨之衰老，最終導致衰老相關性老年疾病的發(fā)生?，F(xiàn)代造血理論認為，骨髓間充質(zhì)干細胞（BONEMARROWMESENCHYMALSTEMCELLS，BMMSCS）對于維持造血誘導微環(huán)境的穩(wěn)態(tài)具有重要意義，它可以增殖、分化形成多種BMSCS，此外，BMMSCS還可以通過分泌多種造血調(diào)控因子調(diào)控造血干細胞功能。因此，BMMSCS成為研究造血誘導微環(huán)境重要對象。最新研究表明，體外培養(yǎng)的BMMSCS會隨著傳代數(shù)的增加而出現(xiàn)衰老，最終導致相關功能的喪失。隨著年齡增加，人BMMSCS衰老的動態(tài)生物學特征規(guī)律還不清楚。本文采用現(xiàn)代干細胞研究的最新手段，深入探討隨著年齡的增加人骨髓間充質(zhì)干細胞（HUMANBONEMARROWMESENCHYMALSTEMCELLS，HBMMSCS）衰老的動態(tài)生物學規(guī)律，旨在為探索延緩或預防造血微環(huán)境衰老途經(jīng)提供理論及實驗依據(jù)。方法1人骨髓間充質(zhì)干細胞（HBMMSCS）的分離與鑒定采集健康人骨髓，分離骨髓單個核細胞（BNCS），體外貼壁培養(yǎng)BNCS，傳代至第三代（P3），收集P3代細胞，流式細胞術鑒定細胞表面CD90、CD73、CD11B、CD19、CD14和HLADR的表型表達。2采集健康人骨髓，分離骨髓單個核細胞（BNCS），貼壁培養(yǎng)至P3，根據(jù)年齡分為青年組（10例，1525歲），中年組（12例，2645歲），中老年組（15例，4565歲），老年組（12例，＞65歲），分組后進行以下檢測。（1）增殖分化能力檢測采用CCK8檢測各組HBMMSCS的增殖能力，使用成骨分化誘導劑和成脂分化誘導劑誘導HBMMSCS，用油紅O和堿性磷酸酶染色分別檢測各組HBMMSCS成脂及成骨分化能力。（2）衰老染色檢測使用衰老相關Β半乳糖苷酶SAΒGAL染色法觀察各組HBMMSCS的衰老變化。（3）氧化損傷檢測檢測各組HBMMSCS胞內(nèi)總抗氧化能力、總SOD含量、總谷胱甘肽過氧化物酶活力、MDA和ROS含量。（4）炎癥因子檢測使用ELISA檢測各組HBMMSCS培養(yǎng)上清液中的IL2、IL6和TNFΑ的水平。（5）RTPCR檢測各組HBMMSCS衰老相關基因P53、P21MRNA水平的表達。結(jié)果1流式細胞術檢測結(jié)果顯示HBMMSCS表面抗原高表達CD73和CD90，也表達CD11B，但低表達CD19、CD14、HLADR，具有成脂、成骨分化能力，符合國際細胞學會對于間充質(zhì)干細胞的定義。2青年組、中年組、中老年組和老年組HBMMSCS隨著年齡增長，其增殖能力、成骨分化能力逐漸減弱，但成脂分化能力逐漸增強；SAΒGAL染色陽性的HBMMSCS數(shù)逐漸增多，周期發(fā)生阻滯，凋亡率逐漸增加；胞內(nèi)MDA及ROS含量逐漸增加，總抗氧化能力、SOD及總谷胱甘肽過氧化物酶活力逐漸降低；炎癥因子IL6和TNFΑ水平逐漸升高，IL2水平逐漸減低。3RTPCR結(jié)果顯示HBMMSCS衰老相關P53和P21MRNA表達水平隨著年齡增加而上調(diào)。結(jié)論1隨著年齡的增加，HBMMSCS發(fā)生了衰老生物學變化，表現(xiàn)為增殖能力降低，成骨分化能力減弱，衰老陽性細胞數(shù)增多等。2HBMMSCS隨著年齡的增加發(fā)生衰老變化的其機制可能與氧化應激損傷水平增高，炎癥因子分泌增多，P53P21通路激活等有關。

簡介：中樞神經(jīng)損傷后神經(jīng)元無法再生，損傷平面以下運動，感覺及括約肌功能喪失?，F(xiàn)有的治療措施只能延緩脊髓損傷，無法逆轉(zhuǎn)已損傷的神經(jīng)組織。神經(jīng)干細胞的發(fā)現(xiàn)為其治療提供了一個全新的方向。神經(jīng)干細胞具有增殖、自我更新和分化成神經(jīng)細胞的能力，從而替代死亡的神經(jīng)元，重建神經(jīng)通路。但目前單純神經(jīng)干細胞移植由于缺乏細胞外基質(zhì)的支持，其存活率和分化特性嚴重受到影響。而神經(jīng)組織工程技術治療脊髓損傷是現(xiàn)在研究的一個熱點，本課題組擬通過神經(jīng)球方法原代培養(yǎng)大鼠胚胎神經(jīng)干細胞，并研究神經(jīng)干細胞體外分化特性，利用培養(yǎng)的神經(jīng)干細胞作為種子細胞和膠原凝膠生物支架一起構(gòu)建神經(jīng)干細胞三維培養(yǎng)模型，并檢測膠原凝膠生物支架與神經(jīng)干細胞的生物相容性，最后構(gòu)建控釋細胞因子的膠原凝膠生物支架，并觀察其對神經(jīng)干細胞的生物學影響。本研究共分為三個部分在第一部分中，我們利用無血清懸浮培養(yǎng)的方法分離培養(yǎng)大鼠胚胎皮質(zhì)來源的神經(jīng)干細胞，用免疫熒光的方法檢測神經(jīng)干細胞及其分化細胞的標志物。結(jié)果顯示體外無血清培養(yǎng)胎鼠皮質(zhì)神經(jīng)干細胞，可得到懸浮生長的神經(jīng)球，但懸浮生長的神經(jīng)球可以發(fā)生融合，免疫細胞化學顯示神經(jīng)球表達神經(jīng)干細胞標志物巢蛋白，經(jīng)過胎牛血清誘導后，神經(jīng)干細胞可以分化為神經(jīng)元，神經(jīng)膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞，其中神經(jīng)膠質(zhì)細胞的分化比例最高。在第二部分中我們將神經(jīng)干細胞與膠原凝膠進行三維培養(yǎng)構(gòu)建神經(jīng)干細胞三維培養(yǎng)模型，結(jié)果顯示神經(jīng)干細胞與膠原凝膠具有良好的生物相容性，膠原凝膠三維支架中的神經(jīng)干細胞可以快速增殖并形成神經(jīng)克隆球，這些神經(jīng)克隆球可以被傳代并且重新在懸浮培養(yǎng)體系中形成傳統(tǒng)的神經(jīng)球。膠原凝膠中的神經(jīng)克隆球表達神經(jīng)干細胞的特異性標志物巢蛋白，并且可以分化形成神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞。與懸浮培養(yǎng)的神經(jīng)球相比，早期三維培養(yǎng)中形成的神經(jīng)克隆球其分化為神經(jīng)元的潛能更高，且三維培養(yǎng)中神經(jīng)球突起長度明顯長于貼壁分化組中神經(jīng)球的長度。在第三部分中我們首先構(gòu)建控釋細胞因子的膠原凝膠支架，利用ELISA方法檢測生物支架中細胞因子的釋放曲線，結(jié)果顯示膠原凝膠是良好的細胞因子控釋載體支架，細胞因子在體外釋放可達10天，控釋細胞因子的膠原凝膠支架與神經(jīng)干細胞共培養(yǎng)后，并分為共分為四組A復合BDNFNT3膠原凝膠組（實驗組）；B復合BDNF膠原凝膠組（對照組）；C復合NT3膠原凝膠組（實驗組）D膠原凝膠組（對照組）。利用CCK8檢測各培養(yǎng)組中的細胞活性，結(jié)果顯示復合BDNFNT3膠原凝膠組中細胞活力要高于其他實驗組，其中膠原凝膠組的細胞活力最低。隨機選取各組20個神經(jīng)球，同時利用DP71圖像處理軟件計算各組神經(jīng)軸突的長度，結(jié)果顯示復合BDNFNT3膠原凝膠組中神經(jīng)突起的長度要長于其他各組。各組神經(jīng)干細胞培養(yǎng)一周后，用1的FBS誘導分化，結(jié)果顯示各組神經(jīng)干細胞均可分化為神經(jīng)元、神經(jīng)膠質(zhì)細胞和少突膠質(zhì)細胞，復合BDNFNT3膠原凝膠組分化的神經(jīng)元比例最高，其中在復合BDNFNT3膠原凝膠組和復合BDNF膠原凝膠組中神經(jīng)干細胞分化比例的順序為神經(jīng)元神經(jīng)膠質(zhì)細胞少突膠質(zhì)細胞，在復合NT3膠原凝膠組和膠原凝膠組中神經(jīng)干細胞分化比例的順序為神經(jīng)膠質(zhì)細胞神經(jīng)元少突膠質(zhì)細胞。綜上所述，在無血清含有生長因子的培養(yǎng)條件下，利用神經(jīng)球方法可以分離培養(yǎng)出胎鼠皮質(zhì)神經(jīng)干細胞，神經(jīng)干細胞具有增殖和多向分化的能力。膠原凝膠與神經(jīng)干細胞具有良好的生物相容性，可以提供神經(jīng)干細胞生長所需要的三維環(huán)境，作為細胞因子控釋的載體，不僅可以保護細胞因子的生物活性，還可以促進神經(jīng)干細胞軸突生長和向神經(jīng)元方向分化，多個細胞因子聯(lián)合應用，其作用更為有效。

簡介：學校代碼學號或申請?zhí)柮芗墘m亞鄭州大孚專業(yè)博士學位論文CDL4HLADR川?！八柙葱砸种萍毎谕庵躎細胞淋巴瘤中的生物學功能及，臨床意義作者姓名導師姓名專業(yè)學位名稱培養(yǎng)院系完成時間杜建偉宋永平教授內(nèi)科學博士鄭州大學腫瘤醫(yī)院2017年5月原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均己在文中以明確方式標明。本聲明的法律責任由本人承擔。學位論文作者表許日期矽，7年／月，云日學位論文使用授權聲明本人在導師指導下完成的論文及相關的職務作品，知識產(chǎn)權歸屬鄭州大學。根據(jù)鄭州大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留或向國家有關部門或機構(gòu)送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權鄭州大學可以將本學位論文的全部或部分編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或者其他復制手段保存論文和匯編本學位論文。本人離校后發(fā)表、使用學位論文或與該學位論文直接相關的學術論文或成果時，第一署名單位仍然為鄭州大學。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定。學位論文憾肴蚌蹴圳年‘月／牙日

簡介：點擊查看更多利那魯肽對高糖誘導的人內(nèi)皮集落形成細胞生物學行為的影響及機制.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：點擊查看更多人胎兒真皮間充質(zhì)干細胞對瘢痕疙瘩成纖維細胞生物學活性的影響.pdf精彩內(nèi)容。

簡介：廣西醫(yī)科大學GUANGXIMEDICALUNIVERSITY學號2014200351IIIIIIIIIIIIILIIIIIIIIIILILIIIIIIIIIIIIIIIIIY3245545碩士學位論文體外下調(diào)NYSAR一35對膠質(zhì)瘤細胞生物學行為的影響彭亞導師姓名謝丹尼專業(yè)名稱人體解剖與組織胚胎學申請學位類型學術型學位答辯委員會主席霍霞答辯委員會委員李中華羅國容莫發(fā)榮陳維平。一七年五月基本情況姓名彭亞民族漢籍貫湖北武漢個人簡歷性別女出生年月19893政治面貌中共黨員學習工作經(jīng)歷起止時間所在院?；騿挝粚W歷學位職稱2008920136三峽大學科技學院學士學位2013720148華中科技大學同濟醫(yī)學院學士學位住院醫(yī)師生殖醫(yī)學中心2014920176廣西醫(yī)科大學碩士研究生期間科研經(jīng)歷／臨床工作經(jīng)歷項目起止時間項目名稱項目來源本人承擔任務201412201512腫瘤相關抗原CT37對面上項目細胞培養(yǎng)和肝癌細胞生物學行為影響的研究分子生物學實驗20146201612腫瘤相關抗原CT37對膠質(zhì)瘤細胞生物學行為影響的研究細胞培養(yǎng)和分子生物學實驗

簡介：腫瘤的發(fā)生和轉(zhuǎn)移與腫瘤微環(huán)境密切相關。腫瘤微環(huán)境是由間充質(zhì)干細胞、內(nèi)皮細胞、免疫細胞、細胞外基質(zhì)等共同構(gòu)成的局部微環(huán)境。腫瘤細胞與腫瘤微環(huán)境的各種成分之間相互作用，相互影響，從而促進腫瘤的生長、轉(zhuǎn)移、上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)化（EPITHELIALMESENCHYMALTRANSITION，EMT）、血管生成等。間充質(zhì)干細胞（MESENCHYMALSTEMSTROMALCELLS，MSCS）是一類成體干細胞，來源于骨髓、脂肪等體內(nèi)多種組織，具有自我更新和成脂、成骨、成軟骨等多系分化能力。MSCS還具有重要的免疫調(diào)節(jié)功能，能夠抑制T細胞和B細胞的增殖，影響DC細胞的分化成熟。MSCS還可以被腫瘤細胞募集到腫瘤組織中，形成腫瘤微環(huán)境中的重要組成成分。腫瘤細胞可以通過細胞細胞間的直接接觸或者旁分泌的方式影響周圍的細胞，從而促進腫瘤自身的生長和發(fā)展。外泌體EXOSOMES是細胞分泌的一種囊泡結(jié)構(gòu)，大小在30到100NM之間，由磷脂雙分子層包裹形成。外泌體中含有大量功能性蛋白質(zhì)、MRNA、MIRNA、DNA片段等多種生物活性物質(zhì)，可以介導細胞之間的物質(zhì)轉(zhuǎn)運和信息傳遞。越來越多的研究表明，腫瘤細胞可以通過分泌的外泌體對腫瘤微環(huán)境中的多種成分產(chǎn)生影響。因此，研究腫瘤外泌體在腫瘤微環(huán)境中的作用及機制，不僅對于認識腫瘤的發(fā)生、發(fā)展、轉(zhuǎn)移等有著重要的意義，而且對于腫瘤的診斷、防治和預后亦有著重要的作用。目的實驗室的前期研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)間充質(zhì)干細胞來源的外泌體可以促進乳腺癌細胞的遷移。但腫瘤細胞分泌的外泌體對募集過來的間充質(zhì)干細胞有哪些影響、又是通過什么樣的機制實現(xiàn)的目前尚不清楚。本篇論文致力于研究肺腫瘤細胞系A549來源的外泌體對脂肪來源間充質(zhì)干細胞（ADIPOSEDERIVEDMESENCHYMALSTEMSTROMALCELLS，AMSCS）的生物學影響及分子機制研究。方法為了研究肺腫瘤細胞來源的外泌體對脂肪來源間充質(zhì)干細胞有哪些影響，在論文的第一部分，首先從脂肪組織中分離提取了間充質(zhì)干細胞并對其進行表型和分化能力進行鑒定。然后從肺腫瘤細胞系A549細胞培養(yǎng)上清中分離提取外泌體，對其進行電鏡形態(tài)觀察和免疫印跡鑒定。使用熒光染料PHK67或DIO標記A549細胞來源的外泌體，然后觀察其能否被AMSCS攝取。最后，對A549細胞外泌體處理過的AMSCS進行系統(tǒng)性研究，觀察其形態(tài)、表型、成骨分化、成臘分化、基因表達譜、炎癥因子分泌譜、增殖、細胞周期、遷移及促進腫瘤生長的能力等是否發(fā)生變化。在論文的第二部分，選取A549細胞外泌體影響AMSCS炎癥因子分泌的現(xiàn)象進行了具體機制研究。首先使用TOLL樣受體信號通路芯片檢測發(fā)生變化的基因，選取其中的關鍵基因使用小干擾RNASMALLINTERFERINGRNA，SIRNA和中和抗體來阻斷關鍵基因的表達和作用，研究其對AMSCS炎癥因子分泌的影響。最后，篩選A549細胞外泌體中的哪種成分對AMSCS炎癥因子分泌產(chǎn)生影響，并通過中和抗體和體外重組蛋白來驗證其作用。結(jié)果論文的第一部分顯示A549細胞來源的外泌體可以被AMSCS攝取，影響其基因表達譜和炎癥因子分泌譜，顯著增加其促炎因子IL6、IL8和趨化因子MCP1的表達，形成一種促炎型的PMSCSPROINFLAMMATYAMSCS。A549細胞來源的外泌體還可以抑制AMSCS的成脂成骨分化，增強其遷移能力，對其增殖及細胞周期影響不大。裸鼠體內(nèi)成瘤實驗表明PMSCS在體內(nèi)可以促進腫瘤細胞的生長及巨噬細胞的募集。第二部分研究結(jié)果顯示，A549細胞來源的外泌體可以激活AMSCS的NFΚB信號通路，導致PIKKΑΒ、PP65蛋白增加，P65蛋白入核。AMSCS細胞的TLR2參與了NFΚB信號通路激活的過程，阻斷TLR2信號通路可以抑制NFΚB信號通路的活化及促炎因子的表達。A549細胞來源的外泌體中的HSP70蛋白可以通過TLR2促進AMSCS促炎因子的表達，HSP70的中和抗體可以抑制腫瘤細胞外泌體的促炎功能，體外重組蛋白HSP70與腫瘤細胞外泌體則具有相似的促炎效果。結(jié)論肺腫瘤細胞來源的外泌體可以影響間充質(zhì)干細胞的基因表達和炎癥因子分泌，抑制其成脂成骨分化，增強其體外遷移能力，使其形成一種新的促炎型的PMSCS。PMSCS的特點是其促炎因子IL6、IL8和趨化因子MCP1的表達上調(diào)。這種PMSCS在小鼠體內(nèi)可以促進腫瘤細胞的生長。肺腫瘤細胞來源的外泌體中的HSP70蛋白可以通過AMSCS的TLR2激活NFΚB信號通路，從而引起促炎因子的表達上調(diào)。

簡介：京倆彳諺醋學院臨床醫(yī)學專業(yè)學生畢業(yè)論文八年制目錄摘要1ABSTM31菏言6正文8第一部分MMP一11在胰腺癌細胞系中的表達及分布8一、實驗材料8二、實驗方法。，13三、實驗結(jié)果20四、討論22五、結(jié)論23第二部分MMP一11對胰腺癌腫瘤生物學行為的影響24一、實驗材料24二、實驗方法26三、實驗結(jié)果30四、討論。，42五、結(jié)論42第三部分血清M姍一11水平對胰腺癌診斷價值的探索43一、實驗材料43二、實驗方法44三、實驗結(jié)果，，45四、討論51五、結(jié)論，51全文小結(jié)53參考文獻55縮略詞表57綜述59致謝85

簡介：背景內(nèi)皮祖細胞ENDOTHELIALPROGENITCELLS，EPCS是成熟內(nèi)皮細胞的前體細胞，可遷移到缺血組織，分化為成熟內(nèi)皮細胞ENTHOTHELIALCELLS，ECS，發(fā)揮血管新生作用。隨著EPCS研究的深入，其在臨床診斷、預后判斷和各種缺血性疾病的治療方面將會有廣闊的應用前景。EPCS不僅存在于骨髓、外周血和臍血中，還存在于胚胎、心臟、骨骼肌和血管中。然而，這些來源的EPCS都存在一定的限制。因此，尋找合適來源的EPCS就變得尤為重要。近年來的研究發(fā)現(xiàn)，脂肪組織中含有多種細胞，包括EPCS。脂肪組織不僅具有來源豐富，獲取容易且其對人體創(chuàng)傷較小的優(yōu)勢，而且其種子細胞豐富，適合細胞的自體移植，因此，脂肪組織是理想的EPCS種子細胞來源，但目前國內(nèi)外缺乏有效的分離培養(yǎng)脂肪源性EPCS的方法。目的探討一種有效、經(jīng)濟、可行的從人脂肪組織中分離培養(yǎng)EPCS的方法，并對其生物學特性展開研究。方法采用酶消化法從人脂肪組織中分離培養(yǎng)出脂肪基質(zhì)血管細胞STROMALVULARCELLS，SVF，流式細胞術檢測SVF的免疫表型以分析其細胞成分。通過EPCS和脂肪干細胞ADIPOSESTEMCELLS，S對胰蛋白酶的敏感性不同，差速消化分離EPCS和S。觀察細胞的形態(tài)特征，繪制細胞的生長曲線、計算細胞的細胞倍增數(shù)PD和倍增時間DT評估細胞的生長增殖能力，流式細胞分析術檢測EPCS的表型特征，免疫熒光染色觀察細胞攝取FITCUEA1和吞噬DILACLDL的能力。最后，通過體外成血管試驗分析EPCS的血管形成能力。結(jié)果通過差速消化分離法，成功從脂肪組織中分離出EPCS和S。流式細胞術檢測分析顯示EPCS表達CD31、CD34和VEGFR2，而幾乎不表達造血干細胞表面標志CD45體外擴增培養(yǎng)后呈典型的鋪路石樣形態(tài)，并可吞噬乙酰化低密度脂蛋白DILACLDL和結(jié)合荊豆凝集素FITCUEA1，在熒光顯微鏡下觀察吞噬DILACLDL的EPCS呈紅色熒光，而結(jié)合FITCUEA1呈綠色熒光。此外，將其接種于MATRIGEL人工基底膜，可形成血管腔樣的結(jié)構(gòu)。S高度表達CD29、CD73、CD90、CD105等間充質(zhì)細胞表面標志，體外擴增培養(yǎng)呈長梭形纖維細胞樣生長。結(jié)論通過差速消化分離法成功從人脂肪組織中分離培養(yǎng)出EPCS，為脂肪源性EPCS的分離培養(yǎng)提供了一種有效、經(jīng)濟、可行的研究方法，為各種缺血性疾病提供了豐富的種子細胞來源，給治療性血管新生和再生醫(yī)學提供了廣闊的應用前景。

簡介：臨床上種植義齒在缺失牙患者的治療中適應證廣泛，近幾十年種植義齒更是迅速發(fā)展，越來越多的缺牙患者開始選擇種植義齒修復，種植學也成為了口腔學科中發(fā)展最為迅速的二級學科，種植義齒的出現(xiàn)甚至改變了傳統(tǒng)的缺牙修復治療模式。種植體周圍炎（又稱種植體周圍黏膜炎）是指發(fā)生在口腔種植體周圍軟組織的可逆炎癥。其發(fā)生發(fā)展的根本因素是寄生在種植體上的細菌微生物。由于口腔衛(wèi)生不良，種植體周圍菌斑堆積，從而刺激機體產(chǎn)生炎癥反應。臨床上患者表現(xiàn)為黏膜的紅腫、探診出血甚至溢膿等癥狀。其一般發(fā)生在種植體植入之后或行使功能之后，發(fā)生于種植體周圍組織的慢性炎癥，多導致種植體周圍支持骨吸收，其發(fā)展的最終歸宿是種植體脫落。良好的骨整合與種植體頸部良好的軟組織附著所形成的“袖口”封閉是維持種植體長期穩(wěn)定的生物學基礎，是抵抗種植體周圍炎的關鍵?！靶淇凇苯Y(jié)構(gòu)的形成，可以起到生物學屏障作用，能夠有效阻止細菌及其他致炎因子的入侵，預防種植體周圍炎的發(fā)生，減少骨組織吸收，提高臨床種植義齒成功率。本實驗意在探討一種更有利于牙齦成纖維細胞附著的愈合基臺表面處理方法，為愈合基臺一種表面臨床改良提供可行的實驗依據(jù)。種植體可以長期穩(wěn)定存在于口腔環(huán)境并良好的行使作用，“骨結(jié)合”必不可少，其中種植體穿齦部分也起著至關重要的作用。雖然種植體周圍結(jié)合上皮和天然牙周圍結(jié)合上皮類似，以半橋粒與基底板附著在種植體表面，但是種植體和結(jié)締組織的結(jié)合方式一直存在著爭議。牙齦結(jié)締組織里牙齦成纖維細胞占最主要作用，本實驗擬研究微弧氧化處理和微弧氧化載銀處理的TI6AL4V合金對牙齦成纖維細胞的生物學行為的影響，引導探索一種有利于袖口形成的愈合基臺的表面處理方法，具有一定臨床意義。第一章人牙齦成纖維細胞的培養(yǎng)及鑒定目的體外分離培養(yǎng)人牙齦成纖維細胞HUMANGINGIVALFIBROBLASTS，HGFS，觀察人牙齦成纖維細胞體外培養(yǎng)的形態(tài)特點，對其來源進行鑒定，為接下來的實驗提供細胞基礎。方法選擇就診于南方醫(yī)科大學南方醫(yī)院正畸科且需要拔牙進行矯正治療的年輕患者，年齡12～20歲，要求患者牙齦健康、無齲齒、無牙齦增生且未服用可使牙齦增生的藥物。征得其同意并簽署知情同意書后局部麻醉下拔除正畸牙同時切取牙齦組織，采用酶消化組織塊法對其進行原代培養(yǎng)，并通過免疫組織化學染色對其來源進行鑒定。結(jié)果1顯微鏡下可觀察到原代細胞在培養(yǎng)到第35D左右時從黑色組織塊邊緣向四周游出，細胞緊貼培養(yǎng)瓶壁生長，細胞形態(tài)多呈長梭形，胞體豐滿，胞漿均勻，可見到單顆細胞核位于胞漿中央呈橢圓形，其內(nèi)可見含23個核仁。伴隨培養(yǎng)天數(shù)的增加，細胞從組織塊中央向四周伸展，以組織塊為中心呈現(xiàn)放射狀排列，排列緊密，細胞呈極性排列。到觀察到細胞長滿培養(yǎng)瓶底約90％面積左右時可看見HGFS胞體排列緊密呈細長梭形，細胞排列呈旋渦狀與編織狀，傳代培養(yǎng)后的牙齦成纖維細胞生長旺盛，上皮細胞逐漸消失，性狀趨于穩(wěn)定。2在光鏡下對細胞行免疫組化染色觀察，細胞表現(xiàn)出抗波形絲蛋白染色陽性，胞質(zhì)內(nèi)陽性顆粒分布均勻，胞核清晰、無染色抗角蛋白染色陰性，證明細胞來源于中胚層，且無上皮源性細胞混雜。陰性對照組均未見陽性染色結(jié)果。說明培養(yǎng)的細胞來源于間充質(zhì)而非上皮源性細胞。結(jié)論本實驗通過組織塊法成功培養(yǎng)出HGFS，并通過免疫組織化學對其進行了鑒定，這些細胞增殖能力較強，可以在體外維持較長時間，足以滿足本接下來研究所需。第二章微弧氧化與微弧氧化載銀處理的TI6AL4V鈦合金理化性能的研究目的使用掃描電鏡SEM、表面元素分析儀、表面粗糙度儀、接觸角測量儀檢測微弧氧化與微弧氧化載銀處理后的TI6AL4V鈦合金表面形貌特點、元素組成、表面粗糙度水平和表面接觸角大小水平。方法購置8MM直徑、08MM厚度的TI6AL4V合金片以TI6AL4V鈦合金作為陽極，鉑電極作為陰極，采用350V恒壓，設置頻率50HZ，設置占空比50％，在冰塊冷卻作用下使電解液溫度保持在在40℃以下處理5MIN。試樣經(jīng)微弧氧化后用去離子水超聲洗滌15MIN，放入烘干箱，烘干干燥紙塑密封包裝備用。配制為0006MOLL濃度硝酸銀溶液作電解液，鉑電極作為陽極、微弧氧化處理后的試樣作作為陰極，硝酸銀溶液做電解液，設置2V電壓使試樣在電解液中處理30S，對鈦合金片作電沉積載銀處理（處理過程中均勻攪拌電解液），超聲清洗后干燥，得到載銀微弧氧化試樣。使用掃描電鏡SEM觀察處理后試樣表面形貌、結(jié)構(gòu)使用表面元素分析儀分析處理后試樣表面元素組成使用表面粗糙度測量儀測量試件表面糙度，測量處理試樣表面液體接觸角并計算材料表面自由能。結(jié)果掃描電鏡觀察微弧氧化后鈦合金片表面，可觀察到粗糙多孔氧化陶瓷，呈“火山口”形貌，“火山口”孔徑約25ΜM。檢測TI6A14VMAO以及TI6AL4VMAOAG表面粗糙度得知粗糙度為微米級。進行表面接觸角檢測，發(fā)現(xiàn)TI6AL4VMAO以及TI6AL4VMAOAG組均小于光滑組。結(jié)論經(jīng)微弧氧化與微弧氧化載銀處理后的TI6AL4V合金表面形成了“火山口”狀特殊形貌，其粗糙度加大，處理后所表面水接觸角更小，表面元素及元素比例發(fā)生變化。第三章微弧氧化TI6AL4V鈦合金載銀對人牙齦成纖維細胞早期黏附、細胞形態(tài)及增殖的影響目的研究微弧氧化TI6AL4V鈦合金載銀對人牙齦成纖維細胞早期黏附、細胞形態(tài)及增殖的影響。方法于光滑的TI6AL4V鈦合金，TI6AL4VMAO以及TI6AL4VMAOAG表面分別接種原代培養(yǎng)的人牙齦成纖維細胞，通過掃描電鏡、CCK8、熒光正置顯微鏡等方法檢測觀察HGFS的早期黏附、增殖情況及細胞形態(tài)。結(jié)果1細胞早期黏附在光滑TI6AL4V鈦合金、TI6AL4VMAO以及TI6AL4VMAOAG表面分別接種人牙齦成纖維細胞細胞，接種細胞12H，24H后用DAPI染料及熒光抗體分別對其細胞核與細胞骨架進行染色處理，熒光顯微鏡下計算細胞個數(shù)。12H，24H后TI6AL4VMAO組以及TI6AL4VMAOAG組表面細胞數(shù)量明顯多于光滑組，有統(tǒng)計學差異P＜005。2細胞形態(tài)熒光正置顯微鏡下觀察經(jīng)熒光染色處理的HGFS接種在光滑TI6AL4V鈦合金、TI6AL4VMAO組與TI6AL4VMAOAG組表面12H后的細胞骨架形態(tài)變化，發(fā)現(xiàn)牙齦成纖維細胞在光滑鈦合金表面沿著拋光試樣時的紋路排列，呈梭型排開，細胞呈現(xiàn)出極性排列方式。而TI6AL4VMAO與TI6AL4VMAOAG組表面細胞呈紡錘型生長，細胞鋪展而積較大。掃描電鏡觀察可見在牙齦成纖維細胞與試樣恒溫共培養(yǎng)12H之后細胞延材料表面砂紙打磨痕跡單向極性伸展，呈梭型與條狀。而MAO與MAOAG組共培養(yǎng)牙齦成纖維細胞伸出偽絲和絲狀偽足。繼續(xù)培養(yǎng)至24H后可見到光滑組細胞有多方向伸展變化，MAO與MAOAG組牙齦成纖維細胞伸展面積明顯增大。3細胞增殖使用CCK8法檢測HGFS接種在對對照組、光滑組、MAO組以及MAOAG組表面1D、3D、5D、7D后的細胞增殖數(shù)量，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)1D時，各組的細胞增殖數(shù)量變化不明顯。但培養(yǎng)3D、5D、7D后MAO組以及MAOAG組材料表面的細胞數(shù)量明顯多于光滑組，且有統(tǒng)計學差異。

簡介：ATHESISSUBMITTEDTOZHENGZHOUUNIVERSITYFORTHEDEGREEOFMASTERBIOLOGICALCHARACTERISTICSRESEARCHOFSIDEPOPULATIONCELLSINHUMANNK/TCELLLYMPHOMAMULTIDRUGRESISTANTCELLLINEBYMENGDONGSUPERVISORPROFQINGJIANGCHENTHEDEPARTMENTOFONCOLOGYTHEFIRSTAFFILIATEDHOSPITALMAY2017摘要NK/T細胞淋巴瘤多藥耐藥細胞系中側(cè)群細胞細胞淋巴瘤多藥耐藥細胞系中側(cè)群細胞生物學特生物學特性研究性研究研究生董萌導師陳清江鄭州大學第一附屬醫(yī)院腫瘤科河南鄭州450052摘要背景與目的背景與目的淋巴瘤是一類起源于淋巴造血系統(tǒng)的惡性腫瘤，主要侵犯淋巴結(jié)或結(jié)外淋巴器官。根據(jù)病理學、遺傳學、免疫學和臨床特點的不同，分為霍奇金淋巴瘤HODGKINSLYMPHOMA,HL與非霍奇金淋巴瘤NONHODGKINSLYMPHOMA,NHL。NK/T細胞淋巴瘤NK/TCELLLYMPHOMA,NKTCL約占NHL的10，在亞洲人群中發(fā)病率較高，在我國更為多見，占全部淋巴瘤的2138。主要侵犯鼻腔、鼻咽、鼻竇、皮膚、睪丸、骨髓等器官，部分病患伴發(fā)B癥狀，例如消瘦、盜汗、發(fā)熱等。該疾病惡性程度高，病程兇險，臨床進展快，易復發(fā)與耐藥，預后極差。因此，在近年的腫瘤相關研究中，多藥耐藥的研究成為淋巴瘤治療一個熱點。側(cè)群SIDEPOPULATION,SP細胞是由GOODELL在分離骨髓干細胞時，發(fā)現(xiàn)居于多數(shù)細胞一側(cè)的少量細胞具有多向分化、無限增殖及自我更新等生物學特性。腫瘤細胞中的SP細胞不僅具有上述生物學特性，而且比非SP細胞具有更強的成瘤能力、侵襲能力及耐藥性。NKTCL臨床治療效果差與細胞表達多藥耐藥MULTIDRUGRESISTANCE,MDR基因密切相關，這些基因?qū)е履[瘤細胞對化療藥物敏感性下降，造成腫瘤的耐藥與復發(fā)。MDR基因多為ATP結(jié)合盒式蛋白ATPBINDINGCASSETTE,ABC轉(zhuǎn)運體家族成員，它們以ATP依賴的、主動運輸?shù)姆绞綄⒓毎麅?nèi)的底物轉(zhuǎn)運出細胞，限制細胞內(nèi)底物濃度，與腫瘤細胞多藥耐藥性相關。因此，本研究擬通過分選NK/T細胞淋巴瘤耐藥株中的SP細胞，并研