簡介：分類號R7351UDC密級重慶醫(yī)科大學碩士學位論文論文題目MIZ1在食管癌組織及細胞系中的表達及其對細胞生在食管癌組織及細胞系中的表達及其對細胞生物學行為的影響物學行為的影響作者姓名羅駿羅駿申請學位級別碩士學科、專業(yè)名稱外科學（胸心外）外科學（胸心外）論文答辯年月2016年5月2016年5月指導教師姓名（職稱、單位名稱）吳慶琛吳慶琛教授教授重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院重慶醫(yī)科大學附屬第一醫(yī)院目錄英漢縮略語名詞對照英漢縮略語名詞對照1中文中文摘要摘要3英文摘要英文摘要7論文正文論文正文MIZ1在食管癌組織及細胞系中的表達及其對細胞生物學行為的影響在食管癌組織及細胞系中的表達及其對細胞生物學行為的影響11前言前言11第一章第一章MIZ1在食管癌及癌旁組織中的表達情況在食管癌及癌旁組織中的表達情況1311實驗材料實驗材料1312實驗方法實驗方法1413實驗結果實驗結果16第二章第二章MIZ1在食管癌細胞系中的表達及選取在食管癌細胞系中的表達及選取1921實驗材料實驗材料1922實驗方法實驗方法1923實驗結果實驗結果22第三章第三章病毒轉染細胞及低表達病毒轉染細胞及低表達MIZ1的食管癌細胞株建立及驗證的食管癌細胞株建立及驗證2331實驗材料實驗材料2332實驗方法實驗方法2433實驗結果實驗結果28第四章低表達目的基因下游相關蛋白及基因表達情況第四章低表達目的基因下游相關蛋白及基因表達情況3141實驗材料實驗材料3142實驗方法實驗方法3243實驗結果實驗結果35第五章第五章MIZ1對選取的兩株食管癌細胞株部分生物學行為的影響對選取的兩株食管癌細胞株部分生物學行為的影響3851MIZ1對ECA109及KYS150細胞周期和凋亡的影響細胞周期和凋亡的影響38511實驗材料實驗材料38512實驗方法實驗方法38513實驗結果實驗結果3952MIZ1對ECA109及KYS150細胞增殖的影響細胞增殖的影響40521實驗材料實驗材料40

簡介：目的體外篩選設計并合成的抑制效率最佳的MMP3SHRNA慢病毒載體，并觀察其對人退變髓核細胞的生物學效應。方法采用酶序貫消化法對臨床腰椎間盤突出癥患者需行摘除術來源的髓核組織進行分離、單層原代細胞培養(yǎng)，應用細胞免疫組化法、細胞免疫熒光法等方法對髓核細胞進行鑒定；根據(jù)人MMP3基因MRNA序列設計合成4對不同的MMP3SHRNA序列，與酶切后LV3載體鏈接并轉入感受態(tài)細胞，通過PCR和基因測序對擴增的陽性克隆進行鑒定，對慢病毒進行包裝和滴度測定；通過熒光定量PCR、WESTERNBLOT分別檢測轉染人退變髓核細胞后MMP3、Ⅱ型膠原、蛋白多糖基因和蛋白質水平的變化，從而篩選最佳抑制序列慢病毒載體及其對人退變髓核細胞的生物學效應。結果原代髓核細胞呈三角形、多角形或短梭形等不規(guī)則形狀，細胞核較大，培養(yǎng)約3周時，原代髓核細胞匯合可達80％以上；蘇木精伊紅染色細胞核呈藍色，胞漿呈淡紅色，甲苯胺藍染色胞核成深藍色，胞漿呈淡藍色，細胞免疫組化及細胞免疫熒光Ⅱ型膠原分別呈黃褐色和綠色熒光。經(jīng)酶切鑒定陽性擴增片段正確，基因測序顯示與設計序列完全相符，滴度檢測顯示大于1X108TUML。MMP3SHRNA慢病毒轉染72和96小時后從MMP3基因和蛋白水平綜合篩選得出MMP3SHRNA3為最佳抑制序列（P結論成功構建并篩選出抑制效率最佳的MMP3SHRNA慢病毒載體；慢病毒介導的RNAI可以顯著抑制人退變髓核細胞MMP3的表達，從而增加人退變髓核細胞外基質表達量，有望成為阻止或逆轉椎間盤退變的進程而治療椎間盤退變。

簡介：聚乳酸（PLA）因其良好的機械性能、可加工性能、可生物降解等性能，而被廣泛用于骨組織修復領域。然而，其本身又有一定的局限性，如親水性較差、細胞相容性不夠理想、缺乏成骨和成血管化功能等。通過對PLA材料表面進行生物學修飾，可以有效改善PLA材料的上述性能。作為貽貝粘附蛋白的關鍵成分，多巴胺（DOPA）幾乎可以粘附在任何材料的表面，有效改善材料表面的親水性和細胞相容性；尤為重要的是，其形成的聚多巴胺PDOPA層可以作為二級反應平臺，在基體材料表面進一步修飾生物活性分子，賦予基體材料優(yōu)異的生物學性能。為此，本文首先選用聚（D、L乳酸）（PDLLA）作為基體材料，利用溶液澆注法制備成膜，基于DOPA在堿性條件下的氧化自聚合反應對其進行改性，得到一系列不同濃度的DOPA改性的PDLLAPDOPAX復合膜，利用SEM、AFM、接觸角和表面能對改性前后的表面形貌、親疏水性及表面能進行觀察測試。結果表明經(jīng)DOPA改性之后，PDLLA膜表面的形貌發(fā)生了明顯的變化，粗糙度明顯增大，親水性得到了提高，表面能增大，最終確定出DOPA合適的反應濃度為2GL。鑒于殼寡糖（COS）具有優(yōu)異的生物相容性、良好的成骨活性和水溶性，本文在上述實驗的基礎上，進一步以PDOPA層為反應平臺，引入不同濃度的COS，從而制得不同濃度的COS功能化的PDLLAPDOPACOSY復合膜。利用SEM、AFM、接觸角、表面能、FTIR和XPS對改性前后的表面形貌、親疏水性、表面能、化學結構和表面元素進行觀察測試。實驗結果表明DOPA和COS改性之后，光滑的PDLLA膜表面出現(xiàn)了明顯的溝槽或突起結構，且粗糙度明顯增大。與純的PDLLA膜相比，PDLLAPDOPA和PDLLAPDOPACOS復合膜的親水性均得到了提高，表面能也相應增大。FTIR和XPS分析進一步證實了DOPA和COS被成功引入到材料表面，同時確定了材料表面氮元素的含量及COS的合適反應濃度為4GL。以該濃度制得的復合膜作為評價細胞相容性的實驗材料，以MC3T3E1作為種子細胞對改性前后的膜材料進行體外細胞培養(yǎng)實驗。材料的成骨細胞實驗表明與純的PDLLA膜相比，PDLLAPDOPA和PDLLAPDOPACOS復合膜對MC3T3E1的增殖、分化及堿性磷酸酶（ALP）的分泌均具有明顯的促進作用。復合膜PDLLAPDOPA與PDLLAPDOPACOS相比，PDLLAPDOPA對MC3T3E1的增殖效果更明顯，而PDLLAPDOPACOS在促進MC3T3E1的分化及ALP的分泌方面具有更明顯的優(yōu)勢。鑒于去鐵胺（DFO）在血管的再生過程中發(fā)揮著重要的作用，本文在上述實驗基礎上，進一步以PDOPA層為反應平臺，引入不同濃度的DFO，從而制得不同濃度的DFO功能化的PDLLAPDOPADFOZ復合膜。利用SEM、AFM、接觸角、表面能、FTIR和XPS對改性前后的表面形貌、親疏水性、表面能、化學結構和化學元素進行觀察測試。實驗結果表明與純的PDLLA膜相比，PDLLAPDOPADFO和PDLLAPDOPADFO復合膜的表面形貌發(fā)生了明顯的變化，表面有大量的凸起結構，粗糙度明顯增大。且復合膜的親水性明顯得到了提高，表面能也相應增大，相比之下，PDLLAPDOPADFO復合膜的改善效果更明顯。FTIR和XPS分析進一步證實了DOPA和DFO被成功引入到材料表面，同時確定了材料表面氮元素的含量及DFO的合適反應濃度為2GL。以該濃度制得的復合膜作為細胞相容性評價的實驗材料，以MC3T3E1和HUVECS作為種子細胞對改性前后的膜材料進行體外細胞培養(yǎng)實驗。材料的細胞實驗表明對于MC3T3E1而言，與純的PDLLA膜相比，PDLLAPDOPA和PDLLAPDOPADFO復合膜對MC3T3E1的粘附、增殖和鋪展均具有一定的促進作用。對比PDLLAPDOPA和PDLLAPDOPADFO兩種復合膜，可以發(fā)現(xiàn)PDLLAPDOPA更有利于促進MC3T3E1的粘附、增殖和鋪展。對于HUVECS而言，與純的PDLLA膜相比，PDLLAPDOPA和PDLLAPDOPADFO復合膜對HUVECS的粘附、增殖和鋪展，均具有明顯的促進作用。對比PDLLAPDOPA和PDLLAPDOPADFO兩種復合膜，可以發(fā)現(xiàn)PDLLAPDOPADFO在促進HUVECS的粘附、增殖和鋪展方面均表現(xiàn)出了絕對的優(yōu)勢。

簡介：微小RNA（MICRNAS，MIRNAS）是近年來發(fā)現(xiàn)的一類由非編碼區(qū)域編碼的長度約為22NT的單鏈RNA片段，成熟的MIRNA在細胞質中能夠與信使RNA（MRNA）結合，影響靶向MRNAS的穩(wěn)定性，從而達到調控基因表達的目的。有研究報道顯示，MIRNAS能夠調節(jié)內皮細胞的遷移、增殖、趨化、抗凋亡等多項生理功能，進而參與血管功能維持、修復、再內皮化及新生血管形成過程，與多種血管性疾病的發(fā)生有關，但是其中的作用機制仍有待于進一步的研究。血管內皮細胞生長因子受體（VEGFR）是目前國外研究的熱點之一，主要存在于血管內皮細胞表面，具有酪氨酸激酶活性。VEGFR的過表達具有促進內皮細胞增殖、趨化、遷移、抗凋亡，促進血管修復、再血管化、加速新生血管形成、抗血栓，促進組織愈合等特點，VEGFR的下游信號為PI3KAKT，通過調節(jié)BCL2家族成員的活性，抑制內皮細胞凋亡；抑制天冬氨酸特異性半胱氨酸蛋白酶家族成員CASPASE3的活化，來達到抑制調亡和促進細胞增殖，增強內皮遷移，進而促進血管生成等生物學功能，使其在心血管、燒傷、腫瘤的防治等各醫(yī)學領域的廣闊應用前景。結合既往研究和生物信息學預測數(shù)據(jù)庫，我們發(fā)現(xiàn)HSAMIR429和HSAMIR4553P能夠與VEGFR2MRNA中3’UTR序列結合，從而調控VEGFR2的表達，但他們的結合對內皮細胞血管生成的影響及分子機制尚未完全探討。目的本研究旨在結合既往的研究和生物信息學，預測到2種MIRNAS能夠調控VEGFR2，通過研究MIRNAS對VEGFR2表達影響，探討其對內皮細胞血管生成影響及機制；從MIRNAS調控VEGFR2表達的角度，探討MIRNAS對內皮細胞遷移、增殖、凋亡的影響，參與內皮細胞血管生成的調節(jié)作用。方法1預測和驗證VEGFR2基因的調控MIRNAS首先結合既往對急性心肌梗死病人循環(huán)血液MIRNAS芯片基因檢測和TARGETSCANWWWTARGETSCANG，MIRNASMIRDBG，MIRBASE。MIRA生物信息學數(shù)據(jù)庫預測，我們發(fā)現(xiàn)MIR4553P和MIR429可結合VEGFR2MRNA基因，并具有高親和力。2合成2種目標MIRNA及各自的MIRNAINHIBIT我們化學合成了MIRNA4553P和MIR429雙鏈類似物和單鏈抑制劑。序列如下HSAMIR4553PMIMAT000478（5’到3’）GCAGUCCAUGGGCAUAUACACHSAMIR429MIMAT0001536（5’到3’）UAAUACUGUCUGGUAAAACCGU3建立HUVECS及轉染人臍靜脈內皮細胞（HUVECS）培養(yǎng)在人完全ENDOTHELIALSFM細胞培養(yǎng)基，而且添加制造商推薦的所有必要的生長因子和抗生素。所有的細胞都培養(yǎng)在細胞培養(yǎng)箱，保持5％CO2、37C。細胞用胰蛋白酶消化到達匯合，種植密度在5104CELLML，當細胞傳代在27代、達到80融合時進行實驗。MIR4553P和MIR429的類似物和抑制劑利用脂質體轉染到人臍靜脈內皮細胞實驗分為3組分別為對照組、MIRNAS組、MIRNASMIRNAS抑制劑組。4內皮細胞形態(tài)學及各分子生物水平檢測及觀察（1）HUVECS增殖率檢測；（2）流式細胞術檢測HUVEC的凋亡；（3）HUVECS劃痕實驗；（4）HUVECS細胞血管形成能力實驗；（5）應用QPCR檢測各組HUVECS細胞VEGFR2、BCL2及AKTMRNA表達情況；（6）應用WESTERNBLOT檢測各組HUVECS細胞VEGFR2及AKT、活化CASPASE3、BCL2蛋白表達情況。結果1運用MTT法測定兩MIRNAS作用對內皮細胞增殖的影響，MIR429和MIR4553P抑制人臍靜脈內皮細胞增殖；2流式細胞儀檢測細胞凋亡（ANNEXINV法和PI法）。過表達MIR429和MIR4553P后，臍靜脈內皮細胞凋亡顯著增加；3MIR429和MIR4553P抑制HUVEC遷移能力及血管生成。4MIR429和MIR4553P可通過影響內皮細胞VEGFR2調控AKT，MIR429和MIRNA4553P下調VEGR2MRNA及蛋白表達；進而下調AKTMRNA和蛋白表達水平，而MIRNA429及MIRNA455特異性MIRNAS抑制劑則抑制這一過程。5內皮細胞轉染MIR429和MIR4553P類似物48H后。MIRNAS上調內皮細胞活化CASPASE3蛋白的表達水平，下調BCL2MRNA和蛋白的表達水平。結論1內皮細胞轉染MIR429和MIR4553P后，抑制細胞增殖及遷移能力，促進細胞凋亡，從而阻礙內皮細胞血管生成。2MIR429和MIR4553P可通過調控VEGFR2、AKT、CASPASE3、BCL2等表達來調節(jié)內皮細胞增殖、遷移及凋亡功能，進而影響內皮細胞血管生成。

簡介：碩士學位論文碩士學位論文堿性成纖維生長因子對牙齦間充質堿性成纖維生長因子對牙齦間充質干細胞生物學性能的影響干細胞生物學性能的影響EFFECTSOFBASICFIBROBLASTGROWTHFACTONTHEDEVELOPMENTOFTHEGINGIVADERIVEDMESENCHYMALSTEMCELLPROPERTIES專業(yè)名稱外科學研究方向口腔醫(yī)學研究生方穎導師葛立宏教授廣州醫(yī)科大學廣州醫(yī)科大學廣州廣州二零一六年五二零一六年五月中文摘要1中文中文摘要摘要堿性成纖維生長因子對牙齦間充質堿性成纖維生長因子對牙齦間充質干細胞生物學性能的影響細胞生物學性能的影響研究生方穎指導老師葛立宏教授輔導老師曾素娟主任醫(yī)師研究研究目的目的間充質干細胞具有自我復制、高度增殖和多向分化的能力，在組織與器官的修復再生方面有重要的作用。牙齦組織具有很強的組織愈合能力，取材容易、方便，并且愈合后無疤痕形成。牙齦組織中也存在著間充質干細胞，和其他間充質干細胞一樣，具有基本的干細胞特性，并且具有免疫調節(jié)功能。本課題旨在體外研究堿性成纖維生長因子對牙齦間充質干細胞生物學特性的影響，為組織再生提供合適的種子細胞和細胞生長因子。研究研究方法方法第一部分GMSC的分離培養(yǎng)和鑒定1、GMSC的分離培養(yǎng)在家長知情同意下，取臨床中全身健康的接受冠延長手術患者，術中切去的牙齦組織，采用酶消化法進行分離、培養(yǎng)。2、GMSC的鑒定通過檢測GMSC的克隆形成能力、多向分化潛能（成骨分化能力、成脂分化能力）、間充質干細胞表面標記物（STRO1、CD146、CD90、CD105、CD45、CD34），對分離、培養(yǎng)的GMSC進行鑒定。第二部分BFGF對GMSC生物學特性的影響1、GMSC的分離培養(yǎng)鑒定在家長知情同意下，取臨床中全身健康的接受冠延長手術患者，術中切去的牙齦組織，采用酶消化法進行分離、培養(yǎng)。通過檢測GMSC

簡介：分類號分類號R7381R7381密級密級公開公開專業(yè)學位研究生學位論文論文題目（中文）論文題目（中文）靶向沉默靶向沉默RIPK4RIPK4基因對骨肉瘤基因對骨肉瘤MGMG6363細胞生細胞生物學特性的研究物學特性的研究論文題目（外文）論文題目（外文）THERESEARCHOFTHEBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFMG63CELLSAFTERRIPK4GENEINHIBITEDBYSIRNA研究生姓名研究生姓名田夏威田夏威學位類別學位類別臨床醫(yī)學專業(yè)學位臨床醫(yī)學專業(yè)學位專業(yè)學位領域專業(yè)學位領域骨科學位級別學位級別碩士校內校內導師姓名、職稱導師姓名、職稱王栓科王栓科教授教授論文工作起止年月論文工作起止年月20142014年0606月至月至20152015年0909月論文提交日期論文提交日期20162016年0303月論文答辯日期論文答辯日期20162016年0505月學位授予日期學位授予日期20162016年0606月校址甘肅省蘭州市校址甘肅省蘭州市IRIPK4RIPK4在骨肉瘤組織中的表達及靶向沉默在骨肉瘤組織中的表達及靶向沉默RIPK4RIPK4基因對骨肉基因對骨肉瘤MGMG6363細胞生物學特性的研究細胞生物學特性的研究中文摘要中文摘要目的目的研究RIPK4（RECEPTORINTERACTINGPROTEINKINASE4）基因在骨肉瘤組織及細胞中的表達；通過小干擾RNA沉默骨肉瘤MG63細胞中RIPK4基因的表達，觀察抑制RIPK4基因后對骨肉瘤MG63細胞生物學行為的影響。方法方法使用免疫組織化學方法和實時熒光定量PCR法分別檢測骨肉瘤患者原發(fā)灶中RIPK4蛋白的表達情況及骨肉瘤細胞中RIPK4MRNA的表達情況；設計具有沉默效應作用的RIPK4SIRNA，將其通過載體脂質體轉染入骨肉瘤細胞，使MG63細胞中RIPK4基因的表達水平下調，CCK8法檢測骨肉瘤細胞的增殖水平；流式細胞儀檢測細胞凋亡的情況；實時熒光定量PCR法和蛋白質免疫印跡（WESTERNBLOT）法分別從MRNA及蛋白的表達水平檢測MG63骨肉瘤細胞中Β連環(huán)蛋白（ΒCATENIN），細胞周期蛋白（CYCLIND1），細胞凋亡及自噬相關因子BCL2、LC3及BECLIN1的表達。結果結果①免疫組織化學方法檢測顯示骨肉瘤患者標本中RIPK4蛋白表達陽性，實時熒光定量PCR法結果顯示RIPK4MRNA在骨肉瘤細胞中的表達明顯高于正常成骨細胞（P＜005）；干擾后，RIPK4SIRNA轉染組骨肉瘤MG63細胞中RIPK4MRNA的轉錄水平及蛋白的表達水平明顯低于陰性對照組（CONTROLSIRNA組）及空白對照組（未加任何試劑的MG63細胞）（P＜005）；CCK8檢測骨肉瘤MG63細胞RIPK4SIRNA轉染組較陰性對照組及空白對照組增殖能力明顯受到抑制（P＜005）；RIPK4SIRNA轉染組骨肉瘤MG63細胞中ΒCATENINMRNA及CYCLIND1MRNA及其蛋白的表達水平下調（P＜005）；流式細胞儀檢測骨肉瘤細胞轉染組較CONTROLSIRNA組及空白對照組細胞凋亡率明顯增加（P＜005）；RIPK4SIRNA轉染組骨肉瘤MG63細胞中BCL2MRNA及其蛋白表達量下降（P＜005），BECLIN1及LC3MRNA及其蛋白的表達水平上升（P＜005）。結論結論①RIPK4蛋白及其MRNA在骨肉瘤組織及骨肉瘤細胞中異常表達，RIPK4基因可能參與骨肉瘤的發(fā)生發(fā)展過程。②沉默RIPK4基因的表達可以抑制人骨肉瘤MG63細胞的增殖，這一作用可能與抑制WNT/ΒCATENIN信號通路有關。③沉默RIPK4基因可以促進骨肉瘤MG63細胞的凋亡和自噬，且兩者之間

簡介：分類號R7359密級公開UDC61636編號2013213718廣州醫(yī)科大學碩士學位論文尿路上皮癌胚抗原尿路上皮癌胚抗原1UCA1對口腔鱗癌細胞對口腔鱗癌細胞生物學功能影響的實驗研究生物學功能影響的實驗研究研究生楊勇濤研究生楊勇濤導師楊宏宇師楊宏宇教授教授研究生楊勇濤研究生楊勇濤導師楊宏宇導師楊宏宇教授教授申請學位級別醫(yī)學碩士申請學位級別醫(yī)學碩士學科專業(yè)口腔頜面外科學學科專業(yè)口腔頜面外科學論文提交日期二零一六年五月論文提交日期二零一六年五月學位類型醫(yī)學臨床學位學位類型醫(yī)學臨床學位年級二零一三級年級二零一三級研究方向口腔癌研究方向口腔癌論文答辯日期二零一六年五月論文答辯日期二零一六年五月學位授予單位廣州醫(yī)科大學學位授予單位廣州醫(yī)科大學答辯委員會主席答辯委員會主席周健教授教授評議人張國志教授評議人張國志教授張芳婷教授張芳婷教授二零一六二零一六年五月學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。文中依法引用他人的成果、對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中做出明確標注或得到許可。論文內容未包含法律意義上已屬于他人的任何形式的研究成果，也不包含本人已用于其他學位申請的論文或成果。本人如違反上述聲明，愿意承擔以下責任和后果1．交回學校授予的學位證書；2．學校可在相關媒體上對作者本人的行為進行通報；3．本人按照學校規(guī)定的方式，對因不當取得學位給學校造成的名譽損害，進行公開道歉。4．本人負責因論文成果不實產生的法律糾紛。論文作者簽名日期年月日學位論文知識產權權屬聲明本人在導師指導下所完成的論文及相關的職務作品，知識產權歸屬廣州醫(yī)學院及附屬單位。廣州醫(yī)科大學及附屬單位享有以任何方式發(fā)表、復制、公開閱覽、借閱以及申請專利等權利。本人離校后發(fā)表或使用學位論文或與該論文直接相關的學術論文或成果時，署名單位仍然為廣州醫(yī)學院及附屬單位。任何其他收存和保管本論文的單位和個人，未經(jīng)本論文作者、導師授權，不得將本論文轉借他人、復制、抄錄或以其他任何方式傳播，否則，引起有礙作者的著作權益問題，將會追究相應的法律責任。論文作者簽名日期年月日導師簽名日期年月日

簡介：廣州中醫(yī)藥大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是個人在導師的指導下，獨立進行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)特別加以注明引用的內容外，本論文不含任何其他個人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對本文的研究做出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明并致謝。本人完全意識到本聲明的法律結果由本人承擔。學位論文作者簽名日期YF睜月誘日關于學位論文使用授權的聲明本人完全了解廣州中醫(yī)藥大學有關保留使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留或向國家有關部門機構送交論文的復印件和電子版，允許被查閱和借閱。本人授權廣州中醫(yī)藥大學可以將本學位論文的全部或部分內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或其他復印手段保存和匯編本學位論文。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定論文作者簽名厭碭論文導師簽名二星釜磐日期Ⅻ喝年I7月咯日與50109／L組復發(fā)率641％顯著高于WBC10109／L組復發(fā)率435％。4參照FAB的分類標準，將172例患者分為L1、L2L3三種亞型，LL型36例1780％，L2型145例7178％，L3型2L例1039％，按形態(tài)學分成三組其生存率無顯著差別，生存曲線分界亦不明顯。5172例ALL的細胞組織化學染色顯示所有病例POX均為陰性；NAE陽性物呈棕紅色，平均陽性率為32％；NAF抑制陽性率均不明顯；PAS染色陽性物呈粉紅色，顆粒呈珠狀、塊狀、粗顆粒狀，平均陽性率達76％。6免疫分型檢出BALL患者143例831％，TALL患者21122％，TB168L，不能分型者423％例，急性混合型ALL4例23％。其中早前BALLPROBALL22例，普通BALLCOMBALL80例，前BALLPREBALL41例。髓系抗原MYAG表達，以CDL3陽性最常見，陽性率為457％；其次為CDL5189％、CD3385％、CDLL785％。7901％病例完成了染色體核型分析。156例患者中正常核型患者82例525％，異常核型患者74例475％，異常核型中以T922為主要類型，共21例135％，其次為超二倍體型，亞二倍體、復雜核型、T119、T814、LLQ。成人組核型異常比例明顯高于兒童組，T922異常比例亦明顯高于兒童組。核型正常的ALL患者預后最好，而T9；22、亞二倍體、復雜核型和其他類型的核型異常的中位0S和3年0S率以及死亡風險均高于核型正常組。而超二倍體的預后又在所有核型異常組中最好。8170例完成ALL15種融合基因檢測，其中有115例6764％患者未發(fā)現(xiàn)分子遺傳學異常，其余55例3236％患者檢出的異常類型主要為E2A／PBXL、TEL／AMLL、BCR／ABL以及MLL重排等融合基因。BCR／ABL融合基因陽性檢出率最高，共24例；超過2種以上分子遺傳學異常的混合型異?；颊?0例，MLL重排融合基因陽性7例，AMLL／TEL基因融合陽性6例，PBXL／E2A融合基因陽性4例；另外各有L例檢出E2A／HLF融合基因表達和EVIL表達。9未檢出基因異常組的中位DFS、中位OS和3年0S率分別為23個月，尚未達到和60996，明顯優(yōu)于BCR／ABL融合基因陽性組中位DFS為8個月，中位0S為142個月，3年OS率為228％。單因素COX回歸分析結果表明，陽性組ALL患者的復發(fā)率較未檢出基因異常組高2389倍，死亡率是未檢出基因異常組的2566倍。10成人和兒童ALL病例MICM危險分組之間生存率有顯著差異。結論1兒童ALL預后較成人預后好，兩者間OS、DFS、復發(fā)率均存在顯著性差異。2外周血WBC計數(shù)與ALL生存期呈負相關。3參照FAB的分類標準的ALL分型對ALL的預后指導意義有限。II

簡介：目的喉癌是頭頸部常見的惡性腫瘤之一，近年來喉癌的發(fā)病呈現(xiàn)出年輕化及上升趨勢。本研究以人喉癌細胞系為研究對象，分析轉染MIR375對HEP2細胞生物學行為的影響，并探討其可能的分子機制。方法本實驗研究設為MIR375MIMICS組（轉染MIR375）、MIRNC組（轉染無義序列MIRNC）和空白對照組（未轉染）；采用脂質體LIPOFECTAMINE2000將MIR375及MIRNC瞬時轉染HEP2細胞；熒光顯微鏡，觀察GFP熒光細胞數(shù)，檢測轉染效率；采用MTT法，檢測細胞生長增殖速度變化；運用流式細胞儀，檢測細胞周期及凋亡；通過劃痕試驗，觀察細胞遷移能力；利用生物信息學軟件，預測MIR375可能調控的靶基因；采用RTPCR及WESTERNBLOT方法，分別從MRNA及蛋白質表達水平，檢測IGF1R基因的表達。結果MIR375導入HEP2細胞，熒光檢測顯示，MIR375可在MIR375MIMICS組HEP2細胞高表達；MTT檢測顯示，MIR375MIMICS組HEP2細胞生長增殖速度減慢，低于MIRNC組和空白對照組；流式細胞儀檢測結果顯示，MIR375MIMICS組HEP2細胞處于亞G0G1期細胞數(shù)目增加，高于MIRNC組和空白對照組；MIR375MIMICS組HEP2細胞凋亡增加，高于MIRNC組和空白對照組，差異具有統(tǒng)計學意義P結論1、MIR375導入HEP2細胞，HEP2細胞生長增殖減慢，細胞阻滯在G0G1期，細胞凋亡增加，遷移能力下降。2、MIR375導入HEP2細胞，HEP2細胞的IGF1R基因表達降低。

簡介：碩士學位論文題目慢性粒細胞白血病慢性粒細胞白血病K562K562細胞株側群細胞的分選及細胞株側群細胞的分選及體外生物學性狀的初步研究體外生物學性狀的初步研究英文英文題目題目THEISOLATIONBIOLOGICALACTERISTICSOFSIDEPOPULATIONCELLSINCMLK562CELLLINEINVITRO姓名石曼學號11320072所在學院醫(yī)學院導師姓名劉元生專業(yè)內科學（血液內科方向）入學日期2013年9月中文題目中文題目慢性粒細胞白血病慢性粒細胞白血病K562細胞株側群細胞的分選及體外生物學性細胞株側群細胞的分選及體外生物學性狀的初步研究狀的初步研究英文題目文題目THEISOLATIONBIOLOGICALACTERISTICSOFSIDEPOPULATIONCELLSINCMLK562CELLLINEINVITRO專業(yè)內科學內科學申請人申請人石曼石曼導師師劉元生劉元生論文答辯委員成員論文答辯委員成員主席主席洪少杰洪少杰主任醫(yī)師主任醫(yī)師委員委員郭光華郭光華教授教授程繼東程繼東教授教授陳素鉆陳素鉆教授教授俞晶俞晶副主任醫(yī)師副主任醫(yī)師

簡介：分類號號R73725學校代碼學校代碼10062密級級學號號2013602500碩士學位論文MASTER’SDISSERTATION論文題目論文題目沉默DNA甲基轉移酶上調NDRG1表達對前列腺癌DU145細胞生物學行為的影響TITLEUPREGULATIONOFNDRG1EXPRESSIONBYSILENCINGDNAMETHYLTRANSFERASESINFLUENCESTHEBIOLOGICALBEHAVIORSOFPROSTATECANCERDU145CELLS一級學科一級學科臨床醫(yī)學臨床醫(yī)學二級學科二級學科外科學外科學泌尿外泌尿外論文作者論文作者李亞李亞林導師師劉冉錄劉冉錄天津醫(yī)科大學研究生院二〇一六二〇一六年五月

簡介：目的在小腸粘膜下層（SMALLINTESTINALSUBMUCOSASIS）三維培養(yǎng)體系中，比較人骨髓和胎盤基蛻膜來源間充質干細胞（MESENCHYMALSTEMCELLS，MSCS）在低氧無血清的培養(yǎng)條件下細胞的生物學特性，為篩選更優(yōu)越的組織工程種子細胞提供實驗依據(jù)。方法無菌條件下分離提取人骨髓間充質干細胞（BONEMARROWMESENCHYMALSTEMCELLS）以及人胎盤基蛻膜間充質干細胞（PACENTALDECIDUABASALISMESENCHYMALSTEMCELLSPDBMSCS）并進行體外擴增培養(yǎng)，并檢測人BMMSCS和PDBMSCS表面標記物（CD34、CD11B、CD19、CD90、CD44和CD105）的表達情況。同時在成脂、成骨和成軟骨誘導培養(yǎng)環(huán)境下進行誘導分化來鑒定BMMSCS和PDBMSCS的多向分化潛能。以鑒定BMMSCS和PDBMSCS的多向分化潛能。然后取PDBMSCS和BMMSCS接種于SIS上，共培養(yǎng)7天后在掃瞄電鏡下（SCANNINGELECTRONMICROSCOPE，SEM）下觀察MSCS在SIS上的形態(tài)特征，然后將其隨機分為4組分別是BMMSCS常氧有血清組（NMOXIACOMPLETEMEDIUM，NCM）、BMMSCS低氧無血清組（HYPOXIASERUMDEPRIVATIONHSD）、PDBMSCS常氧有血清組（NMOXIACOMPLETEMEDIUM，NCM）和PDBMSCS低氧無血清組（HYPOXIASERUMDEPRIVATIONHSD）。其中常氧條件下，體外三氣培養(yǎng)箱氧含量為21％，低氧條件下，氧含量為1；有血清條件下含F(xiàn)BS10，無血清條件下，含F(xiàn)BS0。采用CCK8的檢測方法分別檢測PDBMSCS和BMMSCS復合物分別在低氧無血清、常氧有血清條件下培養(yǎng)0H，6H，12H，24H后的增殖情況；并采用凋亡流式細胞盒（ANNEXINVPROPIDIUMIODIDE，AVPI）檢測觀察BMMSCS和PDBMSCS復合物分別在低氧無血清、常氧有血清條件下培養(yǎng)6H，48H，72H后的凋亡情況；并采用QPCR檢測BMMSCS和PDBMSCS復合物在低氧無血清、常氧有血清中處理72H后的血管內皮細胞生長因子（VULARENDOTHELIALGROWTHFACT，VEGF）MRNA的表達情況；WESTERNBLOT檢測兩種細胞在低氧無血清條件下72H抗凋亡相關蛋白AKT、ERK12、BCL2蛋白表達情況。結果本實驗中PDBMSCS和BMMSCS均成功于骨髓和胎盤組織中提取并進行了體外擴增，光學顯微鏡下P3代以后，兩種MSCS形態(tài)均為長梭形的成纖維樣細胞，并呈“魚群樣”緊密排列。通過流式鑒定提示兩種細胞均表達了抗原CD73、CD90以及CD105，均不表達表面抗原CD34、CD11B和CD19。此外，兩種細胞均可向成骨、成脂和成軟骨分化，具有多向分化性能。SEM掃描電鏡下觀察在SIS小腸黏膜下層上BMMSCS和PDBMSCS與SIS具有良好的生物相容性，在SIS均表現(xiàn)為長梭形，并分泌大量基質附于支架三維結構上。CCK8檢測提示24H內在低氧無血清條件可促進BMMSCS以及PDBMSCS增值（P005）且PDMMSCS耐受低氧能力更強（P005）。AVPI檢測提示在低氧無血清處理的48小時內，PDBMSCS以及BMMSCS均能夠耐受凋亡（P＞005），差異無統(tǒng)計學意義。在低氧無血清處理72HPDBMSCS凋亡率較BMMSCS在低氧無血清條件下更低（P005）提示PDBMSCS與BMMSCS相比，表現(xiàn)出更好的耐受凋亡。QPCR檢測兩種細胞中在低氧無血清條件下VEGF表達量，提示PDBMSCS表達量高于BMMSCS。WESTERNBLOT檢測顯示低氧無血清條件下PDBMSCS表達抗凋亡蛋白ERK12、AKT、BCL2含量明顯高于BMMSCS（P005）。結論BMMSCS和PDBMSCS在SIS生長狀態(tài)良好，在低氧無血清條件下，與BMMSCS相比，PDBMSCS表現(xiàn)出更好的耐受低氧無血清的特性，故人PDBMSCS是一種優(yōu)良的組織工程種子細胞。

簡介：學校代碼10459學號或申請?zhí)?01221440196密級公開博士學位論文人胚胎干細胞來源視網(wǎng)膜前體細胞生物學特性的實驗研究本課題受國家重點基礎研究發(fā)展計劃（項目批準號2013CB967001），國家自然科學基金（項目批準號31271400）資助作者姓名邵敬芝導師姓名彭廣華學科門類醫(yī)學專業(yè)名稱眼科學培養(yǎng)院系第一臨床學院完成時間2016年5月原創(chuàng)性聲明原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學位論文，是本人在導師的指導下，獨立進行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內容外，本論文不包含任何其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對本文的研究作出重要貢獻的個人和集體，均已在文中以明確方式標明。本聲明的法律責任由本人承擔。學位論文作者日期年月日學位論文使用授權聲明學位論文使用授權聲明本人在導師指導下完成的論文及相關的職務作品，知識產權歸屬鄭州大學。根據(jù)鄭州大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定，同意學校保留或向國家有關部門或機構送交論文的復印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權鄭州大學可以將本學位論文的全部或部分編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，可以采用影印、縮印或者其他復制手段保存論文和匯編本學位論文。本人離校后發(fā)表、使用學位論文或與該學位論文直接相關的學術論文或成果時，第一署名單位仍然為鄭州大學。保密論文在解密后應遵守此規(guī)定。學位論文作者日期年月日

簡介：分類號R8565UDC密級重慶醫(yī)科大學重慶醫(yī)科大學碩士學位論文碩士學位論文論文題目胚胎心外膜祖細胞的體外培養(yǎng)及其生物學特性的研究胚胎心外膜祖細胞的體外培養(yǎng)及其生物學特性的研究作者姓名魏小明魏小明申請學位級別碩士碩士學科、專業(yè)名稱內科學內科學論文答辯年月2016年5月2016年5月指導教師姓名（職稱、單位名稱）佘強教授重慶醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院佘強教授重慶醫(yī)科大學附屬第二醫(yī)院目錄目錄英漢縮略語名詞對照英漢縮略語名詞對照1中文摘要1中文摘要2英文摘要2英文摘要4論文正文胚胎心外膜祖細胞的體外培養(yǎng)及其生物學特性的研究4論文正文胚胎心外膜祖細胞的體外培養(yǎng)及其生物學特性的研究7前言7前言7第一部分不同胚胎期心外膜祖細胞的體外培養(yǎng)7第一部分不同胚胎期心外膜祖細胞的體外培養(yǎng)121材料與方法121材料與方法122結果122結果173討論173討論214結論214結論225參考文獻225參考文獻22第二部分探究不同胚胎期心外膜祖細胞之間生物學特性的差異22第二部分探究不同胚胎期心外膜祖細胞之間生物學特性的差異261材料與方法261材料與方法262結果262結果293討論293討論364結論364結論375參考文獻375參考文獻37全文小結37全文小結41文獻綜述41文獻綜述42致謝42致謝52碩士期間發(fā)表的文章52碩士期間發(fā)表的文章5353

簡介：UDC編號學位論文人子宮內膜腺癌來源間充質干細胞的分離鑒定及生物學特性研究THEBIOLOGICALACTERISTICSOFMESENCHYMALSTEMCELLSISOLATEDFROMHUMANENDOMETRIALADENOCARCINOMA周向東指導教師姓名童英教授申請學位級別碩士專業(yè)名稱婦產科學提交論文日期2016年3月論文答辯日期2016年5月學位授予單位和日期安徽醫(yī)科大學2016年7月答辯委員會主席評閱人2016年3月學位論文獨創(chuàng)性聲明本人所呈交的論文是我個人在導師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我所知，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，論文中不包含其他人已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。與我一同工作的同志對本研究所做的任何貢獻均已在論文中作了明確說明并表示謝意。學位論文作者簽名日期學位論文使用授權聲明本人完全了解安徽醫(yī)科大學有關保留、使用學位論文的規(guī)定學校有權保留學位論文并向國家主管部門或其指定機構送交論文的電子版和紙質版，有權允許論文進入學校圖書館被查閱，有權將學位論文的內容編入有關數(shù)據(jù)庫進行檢索，有權將學位論文的標題和摘要匯編出版。愿意將本人的學位論文提交中國博士學位論文全文數(shù)據(jù)庫、中國優(yōu)秀碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫和中國學位論文全文數(shù)據(jù)庫中全文發(fā)表，并可以以電子、網(wǎng)絡及其他數(shù)字媒體形式公開出版，并同意編入CNKI中國知識資源總庫，在中國博碩士學位論文評價數(shù)據(jù)庫中使用和在互聯(lián)網(wǎng)上傳播。保密的學位論文在解密后適用本規(guī)定。學位論文作者簽名導師簽名日期日期