簡(jiǎn)介：分類號(hào)R774．1密級(jí)公開HESCS來源視杯樣組織中C．KIT／SSEA．4．祖細(xì)胞的細(xì)胞生物學(xué)特性研究THECELLULARBIOLOGICALCHARACTERISTICSOFCKIT／SSEA4PROGENITORCELLSDERIVEDFROMTHEHESCSSELFORGANIZEDOPTICCUPS作者姓名付彩云學(xué)科專業(yè)眼科學(xué)導(dǎo)師黃厚賦副教授指導(dǎo)教師陰正勤、徐海偉教授答辯委員會(huì)主席彩／以乏／論文答辯日期一O一五年五月二十六日院校地址北京市復(fù)興路28號(hào)郵政編碼100853◆本研究獲以下項(xiàng)目資助國(guó)家重點(diǎn)基礎(chǔ)研究發(fā)展計(jì)劃973計(jì)劃人胚胎干細(xì)胞分化為眼細(xì)胞治療的安全性、有效性及其機(jī)制項(xiàng)目編號(hào)2013CB967002◆本研究工作依托單位第三軍醫(yī)大學(xué)全軍眼科中心

簡(jiǎn)介：豬成纖維細(xì)胞系和神經(jīng)干細(xì)胞系的創(chuàng)建及豬成纖維細(xì)胞系和神經(jīng)干細(xì)胞系的創(chuàng)建及IPS細(xì)胞的誘導(dǎo)與生物學(xué)特征研究細(xì)胞的誘導(dǎo)與生物學(xué)特征研究ESTABLISHMENTOFPIGFIBROBLASTSNEURALSTEMCELLLINESTHESTUDYONBIOLOGICALACTERISTICSFIPSCINDUCEDFROMNSCS論文類別學(xué)術(shù)研究型論文類別學(xué)術(shù)研究型作者姓名作者姓名徐麗莎徐麗莎指導(dǎo)教師姓名指導(dǎo)教師姓名劉長(zhǎng)青劉長(zhǎng)青申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別碩士碩士學(xué)位授予單位學(xué)位授予單位蚌埠醫(yī)學(xué)院蚌埠醫(yī)學(xué)院學(xué)科專業(yè)學(xué)科專業(yè)人體解剖與組織胚胎學(xué)人體解剖與組織胚胎學(xué)研究方向研究方向干細(xì)胞定向分化與神經(jīng)再生干細(xì)胞定向分化與神經(jīng)再生論文答辯時(shí)間論文答辯時(shí)間2015年5月學(xué)位授予日期學(xué)位授予日期2015年6月答辯委員會(huì)主席答辯委員會(huì)主席徐勝春徐勝春論文評(píng)閱人論文評(píng)閱人2015年5月分類號(hào)R32281密級(jí)學(xué)校代碼10367UDC611編號(hào)學(xué)號(hào)20125131004學(xué)位論文獨(dú)創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所提交的學(xué)位論文是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下進(jìn)行的研究工作和取得的研究成果。本論文中除引文外，所有實(shí)驗(yàn)、數(shù)據(jù)和有關(guān)材料均是真實(shí)的。本論文中除引文和致謝的內(nèi)容外，不包含其他人或其它機(jī)構(gòu)已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的研究成果。其他同志對(duì)本研究所做的貢獻(xiàn)均已在論文中作了聲明并表示了謝意。學(xué)位論文作者簽名日期學(xué)位論文使用授權(quán)聲明研究生在校攻讀學(xué)位期間論文工作的知識(shí)產(chǎn)權(quán)單位屬蚌埠醫(yī)學(xué)院。學(xué)校有權(quán)保存本學(xué)位論文的電子和紙質(zhì)文檔，可以借閱或上網(wǎng)公布本學(xué)位論文的部分或全部?jī)?nèi)容，可以采用影印、復(fù)印等手段保存、匯編本學(xué)位論文。學(xué)?？梢韵驀?guó)家有關(guān)機(jī)關(guān)或機(jī)構(gòu)送交論文的電子和紙質(zhì)文檔，允許論文被查閱和借閱。（保密論文在解密后遵守此規(guī)定）保密論文注釋本學(xué)位論文屬于保密論文，密級(jí)_____保密期限為_____年。學(xué)位論文作者簽名導(dǎo)師簽名日期日期

簡(jiǎn)介：分類號(hào)R552密級(jí)，公舞單位代碼10422學(xué)號(hào)201引20248蒙只番SHANDONGUNIVERSITY博士學(xué)位論文DISSERTATION稻RDOCTORALDEGREE專業(yè)學(xué)位論文題目多發(fā)性骨髓瘤骨髓問究質(zhì)千細(xì)胞韻生物學(xué)特征和臨床意義THEBIOLOGICALCHARACTER，ANDCLINICALSIGNIFICANEEOTBO致EMALTOWMESENCIAYMALS飴ILLCELLS，_●●‘LINMULTIPLE‘螂ELOMA作者姓名李勝利培養(yǎng)專業(yè)指導(dǎo)合作單位名稱教師導(dǎo)師山東太掌醫(yī)學(xué)院內(nèi)科學(xué)血液瘸鄭成蠹教授矧。7年9。周30日，妒原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均己在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。論文作者簽名銎幽日』關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解山東大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權(quán)山東大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定論文作者簽名冬盟墊導(dǎo)師簽名

簡(jiǎn)介：分類譬蔑734，2√。密’綴一公舞單位代碼粵T042參學(xué)‘。一0跨I，象驄蹲蝮釃S2≯4J簍∥孳S玨ANDONGUNIVERSITY博‘士。學(xué)I位論文DISSERTATIOMFORD0CTOR。A，IDEGREE論文題目甲I二II一謄L一卜Q覃，L警業(yè)嚳每≯I，1_，。。。JAN，掃基LINN寸WN蘧堡黲學(xué)葫熊麓影礴豪箕分子、；，，楓鍘麓研巍I，?！甋TUDYONTHEROLE鼉ANDMOECULARMECHAN|。。11TOFAPELININ。。一一‘BIOLOGICALFUNCTIONSOF、G臻辯嗽CANC，ER，10一俸者姓名郝建薄培養(yǎng)二單』『。錳。出寨大拳耨廉醫(yī)學(xué)院專。業(yè)名稱撮導(dǎo)教師合作導(dǎo)師髀癀學(xué)羹器褥一I教授赫，≯毒01用1“1氣分曰㈣2M2IIII叭●■Ⅲ6㈣3㈣33ⅢY原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均己在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。一一乓1也晦隰們T，F(xiàn)1。哆關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解山東大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權(quán)山東大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定論文作者簽唧簽日期1佃1F11弋O／

簡(jiǎn)介：LIII111IIUILLIIIIILLLLLLIIILLIIILY3336735學(xué)校代碼學(xué)號(hào)或申請(qǐng)?zhí)柮茑峀大孚專業(yè)博士學(xué)位論文MICRORNA125B對(duì)人急性髓細(xì)胞白血病細(xì)胞生物學(xué)作用及分子機(jī)制作者姓名導(dǎo)師姓名專業(yè)學(xué)位名稱培養(yǎng)院系完成時(shí)間王琰孫玲教授內(nèi)科學(xué)血液內(nèi)科鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院2017年8月原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文J是本人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究所取得的成果。除文中已經(jīng)注明引用的內(nèi)容外，本論文不包含任何其他個(gè)人或集體己經(jīng)發(fā)表或撰寫過的科研成果。對(duì)本文的研究作出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明。本聲明的法律責(zé)任由本人承擔(dān)。學(xué)位論文作者多嘏日期上田7年P(guān)月F日學(xué)位論文使用授權(quán)說明本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下完成的論文及相關(guān)的職務(wù)作品，知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬鄭州大學(xué)。根據(jù)鄭州大學(xué)有關(guān)保留、使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留或向國(guó)家有關(guān)部門或機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許論文被查閱和借閱；本人授權(quán)鄭州大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或者其他復(fù)制手段保存論文和匯編本學(xué)位論文。本人離校后發(fā)表、使用學(xué)位論文或與該學(xué)位論文直接相關(guān)的學(xué)術(shù)論文或成果時(shí)，第一署名單位仍然為鄭州大學(xué)。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定。學(xué)位論文作者主嵌日期加7年，工月J’日

簡(jiǎn)介：小電導(dǎo)CA2激活K通道SMALLCONDUCTANCECA2ACTIVATEDKCHANNELS，SK，KCA2幾乎存在于所有可興奮細(xì)胞的胞漿膜上，依賴于細(xì)胞內(nèi)的CA2進(jìn)行激活。SK通道家族由SK1、SK2、SK3以及一個(gè)在結(jié)構(gòu)和功能上與SK通道相似的中電導(dǎo)CA2激活K通道INTERMEDIATECONDUCTANCECA2ACTIVATEDKCHANNELS，IK或稱SK4組成。SK1、SK2和SK3三個(gè)亞型在人類、小鼠和大鼠心肌細(xì)胞中均有表達(dá)，參與心肌細(xì)胞動(dòng)作電位復(fù)極化的構(gòu)成。研究顯示SK1和SK2主要表達(dá)在心房，而敲除SK2通道的動(dòng)物出現(xiàn)心房細(xì)胞復(fù)極化延長(zhǎng)，增加房顫和房撲等快速性心律失常的易感性。因此，SK2通道可能與室上性快速性心律失常有關(guān)，可作為室上性快速性心律失常的治療靶點(diǎn)，但它的調(diào)控機(jī)制目前還不明確。引起SK2通道開放的細(xì)胞內(nèi)CA2信號(hào)來源有兩條途徑位于細(xì)胞膜上的電壓門控CA2通道VOLTAGEGATEDCA2CHANNELS，VGCCS及內(nèi)肌質(zhì)網(wǎng)ENDOSARCOPLASMICRETICULUM，ERSR膜上RYRSRYANODINERECEPTS敏感的CA2釋放通道。已有研究報(bào)道指出心肌細(xì)胞膜的CAV13L型CA2通道通過ΑACTININ與SK2通道進(jìn)行耦聯(lián)，實(shí)現(xiàn)對(duì)SK2通道的調(diào)控，這提示SK2通道可能不是直接和調(diào)控性的CA2通道有生理性相互作用。我們實(shí)驗(yàn)室前期實(shí)驗(yàn)證據(jù)已顯示心肌細(xì)胞膜表面的SK2通道與SRRYR2受體通道有功能性耦聯(lián)，但它們二者之間耦聯(lián)的中間分子并不清楚。本研究通過質(zhì)譜分析和生物信息學(xué)的方法篩選心肌組織中與JP2相互作用的蛋白質(zhì)，采用心肌組織和轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞進(jìn)行免疫共沉淀和GSTPULLDOWN實(shí)驗(yàn)來驗(yàn)證JP2與SK2通道、JP2與RYR2之間的相互作用，進(jìn)一步制備不同片段GSTJP2原核表達(dá)質(zhì)粒來驗(yàn)證JP2與SK2通道和RYR2發(fā)生相互作用的結(jié)構(gòu)域，并通過功能性實(shí)驗(yàn)檢測(cè)JP2敲減后對(duì)鈣瞬變CALCIUMTRANSIENTS的影響，以及JP2敲減后心肌鈣相關(guān)蛋白的表達(dá)。研究方法1采用健康成年C57BL6小鼠，體重2025G，雌雄不拘。2心肌肌質(zhì)網(wǎng)小泡膜蛋白的分離和檢測(cè)用差速離心的方法提取成年C57BL6小鼠心臟肌質(zhì)網(wǎng)小泡的膜蛋白。并用WESTERNBLOT方法檢測(cè)膜蛋白中SK2、JP2和RYR2的蛋白，用心肌組織蛋白做陽(yáng)性對(duì)照。3質(zhì)譜分析心肌肌質(zhì)網(wǎng)小泡膜蛋白裂解液中加入JP2抗體或鼠源無(wú)關(guān)的抗IGG抗體，再用PROTEINGSEPHAROSE捕獲制備免疫共沉淀復(fù)合物，進(jìn)行電泳后，考馬斯亮藍(lán)染色，選擇有差異的目標(biāo)蛋白條帶作為質(zhì)譜分析樣品，送北京大學(xué)醫(yī)學(xué)部進(jìn)行質(zhì)譜分析。4生物信息學(xué)根據(jù)文獻(xiàn)將蛋白質(zhì)篩選，用GENEONTOLOGY網(wǎng)站進(jìn)行分類，并在STRING網(wǎng)站上查出它們之間的相互作用。5WESTERNBLOT鑒定將制備的免疫共沉淀復(fù)合物進(jìn)一步用特異性SK2和RYR2抗體進(jìn)行檢測(cè)。6構(gòu)建原核表達(dá)載體使用BAMHⅠ和NOTⅠ雙酶切原核表達(dá)載體PGEX4T1，將JP2全長(zhǎng)、氨基端片段JP2N11253和JP2N2216350、羧基端片段JP2C340696插入，構(gòu)建融合基因PGEX4T1GSTJP2、PGEX4T1GSTJP2N1AA1253、PGEX4T1GSTJP2N2AA216350和PGEX4T1GSTJP2CAA340696。并用雙酶切和測(cè)序方法鑒定構(gòu)建的重組質(zhì)粒。7GST融合蛋白的原核表達(dá)和純化將已鑒定的GST、GSTJP2以及GSTJP2不同片段重組質(zhì)粒分別轉(zhuǎn)化宿主菌ECOLIBL21，用IPTG26℃過夜誘導(dǎo)表達(dá)靶蛋白，并用GSTBINDTM樹脂層析柱純化融合蛋白。8構(gòu)建PSK2IRESEGFP和PJP2PCDNAEGFP質(zhì)粒，共轉(zhuǎn)染HEK293細(xì)胞以PCMV6ENTRYSK2和PCDNA31JP2為模板，制備PSK2IRESEGFP和PJP2PCDNAEGFP質(zhì)粒，用雙酶切和測(cè)序方法鑒定構(gòu)建的質(zhì)粒。按照LIPOFECTAMIM2000說明書轉(zhuǎn)染質(zhì)粒。9GSTPULLDOWN分析將結(jié)合了GST融合蛋白的層析柱中加入心臟裂解液或HEK293細(xì)胞裂解液，過夜孵育后用谷胱甘肽ELUTIONBUFFER洗脫，并用SK2或RYR2抗體進(jìn)行檢測(cè)。10COIP法檢測(cè)體外JP2和SK2相互作用將共轉(zhuǎn)染SK2和JP質(zhì)粒的HEK293細(xì)胞裂解液與抗體過夜孵育，再用PROTEINGSEPHAROSE制備免疫共沉淀復(fù)合物再分別用抗SK2和抗JP2抗體進(jìn)行檢測(cè)。11尾靜脈注射腺病毒給健康成年C57BL6小鼠尾靜脈注射總量為1109PFU的攜帶陰性對(duì)照SIRNAADNC或JP2SIRNAADSIJP2的腺病毒。注射后7天分離成年小鼠心肌細(xì)胞。12WESTERNBLOT的方法測(cè)定注射腺病毒成年小鼠心臟JP2蛋白表達(dá)，并檢測(cè)對(duì)SK2通道蛋白表達(dá)的影響。13鈣瞬變的測(cè)定將ADNC和ADSIJP2組成年小鼠心肌細(xì)胞懸液進(jìn)行梯度復(fù)鈣，并加入終濃度為2ΜM的FURA2AM，用1HZ場(chǎng)刺激誘發(fā)鈣瞬變，采用IONOPTIX心肌細(xì)胞收縮及離子濃度同步測(cè)量系統(tǒng)測(cè)量鈣瞬變，數(shù)據(jù)采用美國(guó)IONOPTIX公司的IONWIZARD66軟件進(jìn)行分析。14WESTERNBLOT的方法測(cè)定RYR2、CAV12、NCX、SERCA2鈣處理相關(guān)蛋白的表達(dá)。15統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)誤表示，用SPSS110統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件進(jìn)行分析。以配對(duì)T檢驗(yàn)或單因素方差分析ONEWAYANOVA進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。統(tǒng)計(jì)分析以P＜005為有顯著性差異。實(shí)驗(yàn)結(jié)果1WESTERNBLOT檢測(cè)顯示肌質(zhì)網(wǎng)小泡膜蛋白中有SK2、JP2和RYR2三種蛋白的表達(dá)。2在心肌肌質(zhì)網(wǎng)小泡膜蛋白中加入JP2抗體（免疫共沉淀實(shí)驗(yàn)組）或鼠源無(wú)關(guān)的抗IGG抗體（陰性對(duì)照組）制備質(zhì)譜分析樣品，電泳后考馬斯亮藍(lán)染色，觀察對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組的蛋白質(zhì)泳帶，選出13條差異目標(biāo)條帶。質(zhì)譜分析后得到35013個(gè)與JP2可能有相互作用的蛋白質(zhì)，最終篩選出90個(gè)相關(guān)的蛋白質(zhì)，其中包括SK2和RYR2蛋白。通過信息分析學(xué)進(jìn)一步對(duì)蛋白質(zhì)進(jìn)行分類，并測(cè)定它們之間的相互作用。3STRING網(wǎng)站預(yù)測(cè)結(jié)果顯示JP2和RYR2兩者的直系同源蛋白可以在其他物種中共表達(dá)，可以預(yù)測(cè)它們之間可能存在相互作用由于目前只能同源模建出小鼠SK2的CAM區(qū)（序列為655785），不能預(yù)測(cè)SK2和JP2之間是否有相互作用但通過WESTERNBLOT的方法用特異性SK2和RYR2抗體檢測(cè)到肌質(zhì)網(wǎng)小泡裂解液中JP2可以沉淀SK2和RYR2蛋白。4GSTJP2融合蛋白可以PULLDOWN心肌組織裂解液中的SK2，提示GSTJP2與心肌中SK2有相互作用，并且這種相互作用主要發(fā)生在JP2氨基末端的MN區(qū)，尤其是GSTJP2N1AA1253片段作用明顯，而GSTJP2的羧基末端GSTJP2C片段AA340696可以和心肌組織裂解液中的RYR2結(jié)合體外實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示GSTJP2的MN1區(qū)1253片段可以和HEK293細(xì)胞裂解液中的SK2蛋白結(jié)合。5將HEK293細(xì)胞共轉(zhuǎn)染SK2和JP2質(zhì)粒，用特異性JP2或SK2抗體孵育細(xì)胞蛋白裂解液進(jìn)行COIP實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示SK2可以共沉淀JP2，JP2可以和SK2結(jié)合，提示體外JP2和SK2之間可能有相互作用。6成年小鼠尾靜脈注射陰性對(duì)照SIRNA或JP2SIRNA的腺病毒，WESTERNBLOT結(jié)果顯示，與空白對(duì)照組CTRLNT和陰性對(duì)照組ADNC相比，ADSIJP2組JP2表達(dá)減少到了47％和48％，而SK2通道蛋白表達(dá)無(wú)明顯變化。7成年小鼠心肌細(xì)胞JP2敲減后，用IONOPTIX心肌細(xì)胞收縮及離子濃度同步測(cè)量系統(tǒng)測(cè)量鈣瞬變，與ADNC相比，ADSIJP2組鈣瞬變的幅度顯著減少，鈣瞬變到達(dá)峰值50％的時(shí)間卻顯著增加，而細(xì)胞內(nèi)靜息CA2水平和鈣瞬變衰減50％的時(shí)間沒有顯著變化。使用CAFFINE測(cè)量RYR2依賴性肌質(zhì)網(wǎng)CA2儲(chǔ)存水平，與陰性對(duì)照組相比，鈣瞬變的幅度亦顯著減少。因此，敲減成年小鼠心肌JP2的表達(dá)，會(huì)減少心肌肌質(zhì)網(wǎng)CA2的釋放。8用WESTERNBLOT的方法檢測(cè)成年小鼠心肌鈣處理相關(guān)蛋白的表達(dá)，與陰性對(duì)照組相比，ADSIJP2組心肌組織RYR2、CAV12、NCX、SERCA2的表達(dá)無(wú)顯著變化。實(shí)驗(yàn)結(jié)論小鼠心肌組織JP2與SK2、JP2和RYR2蛋白有相互作用，JP2分別通過羧基末端連接RYR2，而通過氨基末端的MN結(jié)構(gòu)域連接SK2，從而實(shí)現(xiàn)三者的功能聯(lián)系。

簡(jiǎn)介：LIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIIY3336102努類垮I密級(jí)R656。5凳開單位代碼10422學(xué)號(hào)XF∽FW年秭0二繁IJJ九。一夏SHANDONGU，NLVEF婚ITY博士學(xué)位論文DISSERTATIONFORDOCTORALDEGREE專業(yè)學(xué)位論文題昏CXCR7一CXCLL2生物學(xué)軸在胃癌血管生成及侵襲轉(zhuǎn)移中的分子機(jī)制研究作者姓名李遭諾培養(yǎng)。單，位山東大學(xué)醫(yī)學(xué)院專業(yè)名稱臨床醫(yī)學(xué)普外指導(dǎo)教師孫宏治教授合作導(dǎo)師ONL，紅N，嗣N詹茬J螢V，牛掣，’‘”BI東大學(xué)博士學(xué)位論文目錄中文摘要5英文摘要14符號(hào)說明26綜述28第一部分CXCRT／CXCLL2在不同胃癌組織中的表達(dá)及與臨床病理因素的關(guān)系47前言47材判與方法49結(jié)果55討論61小結(jié)64參考文獻(xiàn)64第二部分慢病毒載體介導(dǎo)的RNAI沉默CXCR7后對(duì)人胃癌細(xì)胞株SGC7901靶向抑制的實(shí)驗(yàn)研究69前言69捌料與方法70結(jié)果78討論82小結(jié)85參考文獻(xiàn)85第J部分CXCR7一SHRNA調(diào)控ID一1對(duì)胃癌移植瘤及血管生成的影響9】前言91材料與方法92結(jié)果95討論104小結(jié)106參考義獻(xiàn)】06致謝11I7

簡(jiǎn)介：第一部分、過敏性紫癜患兒外周血調(diào)節(jié)性B細(xì)胞、TH2細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子變化的研究目的運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)過敏性紫癜患兒外周血調(diào)節(jié)性B細(xì)胞BREGS、TH2細(xì)胞的表達(dá)情況，采用LUMINEX多功能液相芯片法檢測(cè)過敏性紫癜患兒血清中與調(diào)節(jié)性B細(xì)胞、TH2細(xì)胞相關(guān)細(xì)胞因子IL10和IL4的水平變化，以便探索調(diào)節(jié)性B細(xì)胞、TH2細(xì)胞及其相關(guān)細(xì)胞因子在過敏性紫癜發(fā)病中的作用機(jī)制。方法收集資料完整的過敏性紫癜患兒血清共50例，其中男性患兒31例，女性患兒19例，單純皮疹型8例，關(guān)節(jié)型23例，胃腸型12例，腎炎型16例，運(yùn)用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)過敏性紫癜患兒和19例正常健康兒童外周血中調(diào)節(jié)性B細(xì)胞、TH2細(xì)胞的表達(dá)情況；應(yīng)用LUMINEX多功能液相芯片MILLIPE公司技術(shù)檢測(cè)IL10以及TH2相關(guān)細(xì)胞因子在過敏性紫癜患兒血清中的變化情況；并分析它們之間及其與過敏性紫癜臨床病理參數(shù)之間的相關(guān)性。結(jié)果（1）過敏性紫癜患兒外周血CD19IL10B細(xì)胞顯著低于正常健康兒童，P00004；（2）過敏性紫癜患兒外周血CD4IL4T細(xì)胞顯著高于正常健康兒童，（P（3）50例過敏性紫癜患兒血清中IL10水平明顯低于正常健康兒童，（P005）；（4）過敏性紫癜患兒血清中IL4水平明顯高于正常健康兒童（P0047）；同時(shí)，IL4的水平變化在過敏性紫癜患兒的關(guān)節(jié)病變、性別等臨床參數(shù)間亦有明顯的差異（P00279，P00324）。結(jié)論（1）過敏性紫癜患兒外周血調(diào)節(jié)性B細(xì)胞的表達(dá)顯著低于正常健康兒童。（2）TH2細(xì)胞在過敏性紫癜患兒中高表達(dá)。（3）過敏性紫癜患兒血清中細(xì)胞因子IL10的水平低于健康兒童，而細(xì)胞因子IL4的水平則高于健康兒童。（4）過敏性紫癜患兒血清中調(diào)節(jié)性B細(xì)胞、TH2細(xì)胞分泌的相應(yīng)細(xì)胞因子IL10、IL4的水平與外周血調(diào)節(jié)性B細(xì)胞、TH2細(xì)胞的水平相關(guān)。第二部分、過敏性紫癜患兒外周血調(diào)節(jié)性B細(xì)胞與TH2細(xì)胞相互關(guān)系及其生物學(xué)意義目的利用T細(xì)胞、B細(xì)胞共培養(yǎng)體系，運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)技術(shù)研究BREGS與TH2之間的相互作用，為尋找過敏性紫癜新的治療靶點(diǎn)提供理論依據(jù)。方法收集健康兒童及過敏性紫癜患兒的外周單個(gè)核細(xì)胞，應(yīng)用磁珠分選的方法分別收集CD19B細(xì)胞、CD4T細(xì)胞，分別使用LPS、激發(fā)型CD3和CD28抗體進(jìn)行活化，將活化的B細(xì)胞與活化的T細(xì)胞進(jìn)行共育后，應(yīng)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)技術(shù)檢測(cè)BREGS、TH2細(xì)胞的表達(dá)情況，研究BREGS與TH2之間的相關(guān)關(guān)系。結(jié)果（1）T細(xì)胞、B細(xì)胞共培養(yǎng)體系中，過敏性紫癜患兒的B細(xì)胞組中CD19IL10B細(xì)胞的數(shù)量明顯低于來自健康兒童的B細(xì)胞組（P（2）T細(xì)胞、B細(xì)胞共培養(yǎng)體系中，來自過敏性紫癜患兒的T細(xì)胞組中，CD4IL4T細(xì)胞的數(shù)量明顯高于來自健康兒童的T細(xì)胞組（P結(jié)論過敏性紫癜患兒中CD19IL10BREGS在共培養(yǎng)后的活化比率低于正常兒童，或許與其數(shù)量及分泌IL10的功能受限有關(guān)，從而不能抑制TH2細(xì)胞的分化。

簡(jiǎn)介：IILLLLIIIIIILLIIIIIILY3331567學(xué)校代號(hào)Q窆窆⑧篆卷中邑苗蟲孽學(xué)號(hào)碩士學(xué)位論文20142508034長(zhǎng)鏈非編碼RNAERVKL31在骨肉瘤中的表達(dá)和生物學(xué)功能研究THEEXPRESSIONANDBIOLOGICALFUNCTIONOFLONGNONCODINGRNAERVKL31INSTEOSARCOMA學(xué)位申請(qǐng)人閏治中導(dǎo)師姓名職稱李振華教授專業(yè)名稱中醫(yī)骨傷科學(xué)研究方向慢性骨病的研究培養(yǎng)方式全日制申請(qǐng)學(xué)位類型科學(xué)學(xué)位論文提交日期2017年3月長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)位論文原創(chuàng)性聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是個(gè)人在導(dǎo)師的指導(dǎo)下，獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果。除文中已經(jīng)特別加以注明引用的內(nèi)容外，本論文不含任何其他個(gè)人或集體已經(jīng)發(fā)表或撰寫過的作品成果。對(duì)本文的研究做出重要貢獻(xiàn)的個(gè)人和集體，均已在文中以明確方式標(biāo)明并致謝。本人完全意識(shí)到本聲明的法律結(jié)果由本人承擔(dān)。飛J學(xué)位論文作者簽名函魚士固F非6月F3日關(guān)于學(xué)位論文知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬的聲明本人鄭重聲明所呈交的學(xué)位論文，是本人在導(dǎo)師指導(dǎo)下自選課題或?qū)煶袚?dān)的國(guó)家立項(xiàng)資助的計(jì)劃課題的一部分，系本人在導(dǎo)師指導(dǎo)和資助下獨(dú)立進(jìn)行研究工作所取得的成果，知識(shí)產(chǎn)權(quán)歸屬權(quán)為長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)和本人導(dǎo)師所有。特此聲明，本聲明的一切法律責(zé)任由本人承擔(dān)。、論文作者簽名千；卜嗥指導(dǎo)教關(guān)于學(xué)位論文使用授權(quán)的聲明本人完全了解長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)有關(guān)保留使用學(xué)位論文的規(guī)定，同意學(xué)校保留并向有關(guān)機(jī)構(gòu)送交論文的復(fù)印件和電子版，允許被查閱和借閱。本人授權(quán)長(zhǎng)春中醫(yī)藥大學(xué)可以將本學(xué)位論文的全部或部分內(nèi)容編入有關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行檢索，可以采用影印、縮印或其他復(fù)印手段保存和匯編本學(xué)位論文。保密論文在解密后應(yīng)遵守此規(guī)定論文作者簽名晤陣指導(dǎo)教師簽1。矽『F年F／R6月【上日

簡(jiǎn)介：電子科技大學(xué)UNIVERSITYOFELECTRONICSCIENCETECHNOLOGYOFCHINA專業(yè)學(xué)位碩士學(xué)位論文MASTERTHESISFPROFESSIONALDEGREE論文題目切應(yīng)力在切應(yīng)力在CAVEOLIN1介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞粘附介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞粘附與遷移與遷移的力學(xué)生物學(xué)機(jī)制研究力學(xué)生物學(xué)機(jī)制研究專業(yè)學(xué)位類別工程碩士學(xué)號(hào)201422090612作者姓名熊妮婭熊妮婭指導(dǎo)教師劉貽堯劉貽堯教授教授THEMECHANOBIOLOGICALMECHANISMSOFCAVEOLIN1INLOWSHEARSTRESSINDUCEDBREASTCARCINOMACELLADHESIONMIGRATIONAMASTERTHESISSUBMITTEDTOUNIVERSITYOFELECTRONICSCIENCETECHNOLOGYOFCHINADISCIPLINEMASTEROFENGINEERINGAUTHNIYAXIONGSUPERVISYIYAOLIUSCHOOLSCHOOLOFLIFESCIENCETECHNOLOGY

簡(jiǎn)介：↓↓論文題目高親和力的人源化CDCD20抗體的構(gòu)建及生物學(xué)功能研究聊城大學(xué)分類號(hào)R392單位代碼10447密級(jí)無(wú)學(xué)號(hào)1410240103碩士學(xué)位論文高親和力人源化抗高親和力人源化抗CD20CD20抗體的構(gòu)建及生物學(xué)功能抗體的構(gòu)建及生物學(xué)功能研究研究CONSTRUCTIONBIOLOGICALFUNCTIONOFHUMANIZEDANTICD20ANTIBODYWITHHIGHAFFINITY作者姓名張倩倩張倩倩專業(yè)名稱生物化學(xué)與分子生物學(xué)生物化學(xué)與分子生物學(xué)指導(dǎo)教師姓名郭尚敬郭尚敬教授教授學(xué)院藥學(xué)院藥學(xué)院論文提交日期2017年3月

簡(jiǎn)介：目的通過體外培養(yǎng)人皮膚成纖維細(xì)胞，觀察狹鱈魚皮膠原蛋白肽對(duì)其生物學(xué)性狀的影響。方法人皮膚成纖維細(xì)胞通過體外培養(yǎng)，培養(yǎng)液中加入不同濃度的膠原蛋白肽，分為實(shí)驗(yàn)對(duì)照組和空白對(duì)照組，使用酶標(biāo)法檢測(cè)狹鱈魚皮膠原蛋白肽對(duì)成纖維細(xì)胞增殖的影響、使用ANNEXINVPI雙染法檢測(cè)狹鱈魚皮膠原蛋白肽對(duì)成纖維細(xì)胞凋亡的影響；使用ELISA試劑盒檢測(cè)狹鱈魚皮膠原蛋白肽對(duì)成纖維細(xì)胞分泌TGFΒ1、SOD等指標(biāo)的表達(dá)變化；使用WESTERNBLOT法檢測(cè)I型膠原蛋白的表達(dá)；使用劃痕實(shí)驗(yàn)法檢測(cè)膠原蛋白肽對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞遷移率的影響。結(jié)果1細(xì)胞增殖不同濃度的膠原蛋白肽處理人皮膚成纖維細(xì)胞48H后，通過CCK8試劑盒檢測(cè)膠原蛋白肽對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞增殖的作用。結(jié)果顯示經(jīng)膠原蛋白肽刺激后，成纖維細(xì)胞增殖速度呈現(xiàn)劑量依賴效應(yīng)，隨著膠原蛋白肽濃度的增高，細(xì)胞的增殖速度也加快，與空白對(duì)照組相比具有顯著性差異（P＜005）。在膠原蛋白肽濃度為25MGML的條件下，成纖維細(xì)胞增殖速度最快。2細(xì)胞凋亡25MGML膠原蛋白肽處理24H后，我們通過ANNEXINVFITCPI試劑盒檢測(cè)了膠原蛋白肽對(duì)人皮膚成纖維細(xì)胞凋亡的影響。經(jīng)膠原蛋白肽處理后，相比空白對(duì)照組，成纖維細(xì)胞的凋亡比率顯著下降（P＜005）膠原蛋白肽可有效促進(jìn)人皮膚成纖維細(xì)胞的增殖，抑制細(xì)胞凋亡，并可顯著提高成纖維細(xì)胞分泌TGFΒ1、SOD等活性因子的含量T407，F(xiàn)77423、210063，P＜005。與空白對(duì)照組相比，膠原蛋白肽組細(xì)胞遷移能力增強(qiáng)（P＜005）3ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果經(jīng)不同濃度膠原蛋白肽刺激后，結(jié)果顯示TGFΒ1和SOD表達(dá)均升高，并呈劑量依賴性，25MGML及50MGML的濃度較空白對(duì)照組差異均具有極其顯著性差異（P＜001），其中，以50MGML作用最為顯著。4劃痕實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，經(jīng)過膠原蛋白肽作用后的細(xì)胞遷移率顯著提高（P＜001。5WESTERNBLOT實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，經(jīng)過膠原蛋白肽作用后的人皮膚成纖維細(xì)胞I型膠原蛋白的表達(dá)量提高（P＜005）。結(jié)論狹鱈魚皮膠原蛋白肽能促進(jìn)成纖維細(xì)胞的增殖，提高人皮膚成纖維細(xì)胞存活率，以膠原蛋白濃度為25MGML時(shí)作用最為顯著，并能抑制細(xì)胞的凋亡。狹鱈魚皮膠原蛋白肽對(duì)TGFΒI、SOD的分泌表達(dá)具有顯著的促進(jìn)作用，并呈劑量依賴性。狹鱈魚皮膠原蛋白肽能促進(jìn)人皮膚成纖維細(xì)胞的遷移，促進(jìn)I型膠原蛋白合成可能在創(chuàng)傷愈合中發(fā)揮重要作用。

簡(jiǎn)介：分類號(hào)R6554密級(jí)單位代碼10422學(xué)號(hào)201020496⑧∥菇辦霉博士學(xué)位論文論文題目I型膠原蛋白和TGFIJLL在食管鱗癌中生物學(xué)意義的研究THESTUDYOFBIOLOGICALSIGNIFICANCEOFCOLLAGENTYPEIANDTGFB1EXPRESSIONINESOPHAGEALSQUAMOUSCELLJ1●LARCLNOMA合作導(dǎo)師2014年04月25日山東大學(xué)博士學(xué)位論文目錄中文摘要1英文摘要8符號(hào)說明一16第一部分I型膠原蛋白和TGF131在食管鱗癌中的表達(dá)及與生物學(xué)特性的關(guān)系前言18刖舌J5材料與方法22結(jié)果41討論51結(jié)論6L附圖62參考文獻(xiàn)69第二部分I型膠原蛋白和TGFB1與食管鱗癌預(yù)后關(guān)系的研究前言1／8日U舌6材料與方法80結(jié)果82討侖86結(jié)J淪90附圖9L參考文獻(xiàn)100第三部分TGFP1對(duì)ECAL09細(xì)胞合成I型膠原蛋白影響的研究前言1U一／月U舌J材料與方法109結(jié)果。113討論115結(jié)論119附圖120參考文獻(xiàn)124綜述130參考文獻(xiàn)135

簡(jiǎn)介：分類號(hào)R782．1密級(jí)公開微納形貌鉭及鉭／羥基磷灰石涂層對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)活性的影響EFFECTSOFTANTALUMANDTANTALUM／HYDROXYAPATITECOATINGWITHMICRO／NANOSTRUCTUREONTHEBIOACTIVITYOFBONEMESENCHYMALSTEMCELL作者姓名路榮建學(xué)科專業(yè)口腔臨床醫(yī)學(xué)導(dǎo)師劉洪臣教授答辯委員會(huì)主席夕Ⅵ∥～論文答辯日期二。一五年五月二十八日基金資助國(guó)家高技術(shù)研究發(fā)展計(jì)劃863計(jì)劃編號(hào)2015AA033502院校地址北京市復(fù)興路28號(hào)郵政編碼100853豫阢辦玩目錄縮略詞表???????????????????????????1中文摘要???????????????????????????3英文摘要???????????????????????????7前言???????????????????????????13正文???????????????????????????15實(shí)驗(yàn)一純鈦表面微納形貌鉭涂層的制備及其表面特性研究?????151．材料和方法???????1OOOGOO????????????152．結(jié)果????????????????????????183．討論????????????????????????21實(shí)驗(yàn)二微納形貌鉭涂層對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)活性的影響???231．材料和方法????????????????????????232．結(jié)果????????????????????????313．討論????????????????????????40實(shí)驗(yàn)三純鈦表面微納形貌鉭／羥基磷灰石復(fù)合涂層的制備及其表面特性研究???????????????????????431．材料和方法????????????????????????432．結(jié)果????????????????????????453．討論????????????????????????50實(shí)驗(yàn)四微納形貌鉭／羥基磷灰石復(fù)合涂層對(duì)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞生物學(xué)活性影響??????????????????????521．材料和方法????????????????????????522．結(jié)果????????????????????????583．討論????????????????????????65全文總結(jié)???????????????????????????67參考文獻(xiàn)???????????????????????????68文獻(xiàn)綜述??????????????????????????77個(gè)人簡(jiǎn)歷及研究成果??????????????????????85致謝????????????????????????????86

簡(jiǎn)介：納米技術(shù)發(fā)展迅速，靜電紡絲技術(shù)作為一種簡(jiǎn)單、快捷、方便的納米材料制備方法，被廣泛的用來制備各種各樣的納米材料。在生物醫(yī)學(xué)工程領(lǐng)域，該技術(shù)被用來制備各種仿生材料，以用來治療、修復(fù)或者替換人體受傷的組織或器官。聚酰胺（PA）的分子結(jié)構(gòu)中含有很多的極性酰胺基團(tuán)（CONH），它可以為細(xì)胞和生物組織提供友好的界面，具有良好的細(xì)胞相容性。使用PA的甲酸溶液進(jìn)行靜電紡絲制備PA納米纖維，探索主要的電紡參數(shù)，如電壓、接收距離、濕度、溫度等，溶液參數(shù)，如濃度等對(duì)PA納米纖維微觀形貌及直徑的影響。碳納米管（CNTS）是由六個(gè)碳原子組成的六邊形單元相互連接而構(gòu)成的數(shù)層的同軸圓管，其獨(dú)特的物理化學(xué)性質(zhì)使它具有良好的生物相容性、機(jī)械性能和導(dǎo)電性，使它在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用。制備PACNTS復(fù)合納米纖維，探索CNTS對(duì)復(fù)合纖維性能的影響。鹽酸小檗堿為黃連的提取物，抗菌譜廣，可通過人體正常代謝或吸收，對(duì)正常組織毒副作用小，以此為藥物模型制備載藥PA納米纖維、載藥PACNTS復(fù)合納米纖維。通過掃描電鏡（SEM）對(duì)納米纖維的微觀形貌進(jìn)行觀察；萬(wàn)能材料試驗(yàn)機(jī)對(duì)納米纖維膜的力學(xué)性能進(jìn)行測(cè)試；四探針測(cè)試臺(tái)對(duì)濕潤(rùn)狀態(tài)下的納米纖維膜的導(dǎo)電性進(jìn)行測(cè)試；能譜儀（EDS）對(duì)所載藥物的分布進(jìn)行測(cè)試；體外藥物釋放試驗(yàn)測(cè)試載藥納米纖維的藥物緩釋性能；固體和液體培養(yǎng)基的培養(yǎng)，測(cè)試載藥納米纖維對(duì)大腸桿菌的抑菌性；將小鼠成纖維細(xì)胞（L929）接種在納米纖維膜上測(cè)試其生物相容性進(jìn)行。結(jié)果表明隨PA濃度和電壓的增大，纖維直徑均會(huì)變粗，濃度增大時(shí)粘連減少。當(dāng)接收距離增大，纖維直徑呈減小的趨勢(shì)。當(dāng)空氣濕度較大時(shí)，纖維直徑變細(xì)，但是有小微球出現(xiàn)，纖維之間的粘連比較嚴(yán)重。當(dāng)環(huán)境溫度比較高時(shí)（45℃），纖維形貌比較好，而比較低時(shí)（30℃），會(huì)出現(xiàn)纖維和微球的復(fù)合物。PA的甲酸溶液濃度為12WT％，電壓為18KV，接收距離為12CM，溫度為45℃，濕度為16時(shí)纖維的形貌相對(duì)比較好。CNTS對(duì)復(fù)合纖維的形貌沒有明顯的影響，但是顯著的增強(qiáng)了PACNTS復(fù)合納米纖維的力學(xué)性能，CNTS含量的增加會(huì)使PACNTS復(fù)合納米纖維的直徑減小，導(dǎo)電性增強(qiáng)。當(dāng)CNTS含量為09WT時(shí)，PACNTS復(fù)合納米纖維膜的彈性模量和強(qiáng)度極限分別為80259±1524MPA和3645±187MPA，電導(dǎo)率為29570103±17570105SMM1。載藥PA納米纖維和載藥PACNTS復(fù)合納米纖維都具有藥物緩釋性能，后者比前者的藥物緩釋能力更好。PA納米纖維膜對(duì)大腸桿菌沒有抑菌性，固體培養(yǎng)基中不同載藥濃度的載藥PACNTS復(fù)合納米纖維隨著載藥量的增大對(duì)大腸桿菌抑菌效果越明顯。液體培養(yǎng)基中的載藥PACNTS復(fù)合納米纖維對(duì)大腸桿菌的生長(zhǎng)有抑制作用，且載藥量越大抑制作用越明顯。MTT測(cè)試結(jié)果和L929細(xì)胞粘附、增殖的SEM照片可知，PA納米纖維、載藥PA納米纖維、載藥PACNTS復(fù)合納米纖維均沒有細(xì)胞毒性，有利于成纖維細(xì)胞的粘附和增殖。該導(dǎo)電復(fù)合納米纖維在神經(jīng)組織修復(fù)和引導(dǎo)神經(jīng)組織再生方面有潛在的應(yīng)用價(jià)值。