45468.不同誘導源對斜紋夜蛾多酚氧化酶、抗菌肽活性的影響及抗菌肽的分離純化

1、中山大學碩士學位論文不同誘導源對斜紋夜蛾多酚氧化酶、抗菌肽活性的影響及抗菌肽的分離純化姓名：陳莫林申請學位級別：碩士專業(yè)：食品安全生物學指導教師：李廣宏20060601陳莫林不同誘導源對斜紋夜蛾多酚氧化酶、抗菌肽活性的影響及抗菌肽的分離純化蟲，1小時取淋巴液，然后在2、3、4、6、8、10、12、14、16、18、20、24、28、32、36、40、48、56、64、72、80、88和96小時取血淋巴。制備抗菌肽粗提液。分別用釀酒酵母和

2、大腸桿菌K。：D3。做指示菌，測活性。結(jié)果表明：三種誘源誘導產(chǎn)生的抗菌物質(zhì)的抑菌效果不同，其中Ecoli誘導的抗菌液抑菌效果最強，spltNPV次之，yeast誘導的最差。三種誘導源誘導的抗菌粗提液的SDSPAGE結(jié)果顯示：Ecoli誘導的特異帶最粗，spltNPV的次之，yeast的最弱，這與用抑菌圈法測定的結(jié)果相一致。3用大腸桿菌K。：DI，誘導的抗菌粗提液來分離純化抗菌肽。粗提液經(jīng)01％TFA酸化萃取后過WaterSep—PakC

3、。。Cartridge進行固相萃取，40％CAN的洗脫組分有活性。將含抗菌肽的40％CAN溶液冷凍于燥，超純水溶解濃縮。進行RT—HPLC純化。共三步：第一步，分離柱：Klomasilc。，洗脫液為O05％TFA和CAN。發(fā)現(xiàn)14140min和15508min出現(xiàn)的峰有活性。收集濃縮。第二步分離，將第一步15508min峰的濃縮樣繼續(xù)分離，發(fā)現(xiàn)12941min出現(xiàn)的峰有活性，收集濃縮。第三步純化，分離柱：Klomasilc。洗脫液為00