解毒通絡保腎法對高糖刺激下足細胞PI3K-Akt信號通路活化及凋亡相關因子的影響.pdf

1、目的:本實驗采用血清藥理學方法，探討解毒通絡保腎含藥血清對體外培養(yǎng)的高糖誘導的足細胞ILK表達、調節(jié)PI3K/Akt信號通路及對凋亡相關因子的影響，探討解毒通絡保腎中藥干預高糖刺激下足細胞損傷發(fā)生機制，進一步為解毒通絡保腎法治療DN提供實驗依據。
　　方法:建立高糖誘導的足細胞模型。體外足細胞模型+藥物干預因素。A組:正常糖組;B組:高糖組;C組:高糖+低劑量藥物血清組;D組:高糖+中劑量藥物血清組;E組:高糖+高劑量藥物血清組。

2、酶聯(lián)免疫法檢測ILK、Akt、Bax、Bcl-2、Caspase-3表達水平。流式細胞儀檢測足細胞凋亡率。
　　結果:實驗一:通過酶聯(lián)免疫檢測結果顯示:與A組相比，B、C、D、E組ILK表達均增加(P＜0.05)，與B組相比，C、D、E組ILK表達均降低，C組無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，D、E組有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);與A組比較，B、C、D、E組Akt表達均降低(P＜0.05)，而與B組對比，C、D、E組Akt表達增加，E

3、組有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，C、D組無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　實驗二:與A組相比，B、C、D、E組Bax、Caspase-3表達均增加(P＜0.05)，與B組相比，C、D、E組Bax表達均降低，C組無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，D、E組有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，C、D、E組Caspase-3表達均降低(P＜0.05);與A組比較，B、C、D、E組Bcl-2表達均減少(P＜0.05)，而與B組對比，C、D、E組Bc

4、l-2表達增加，C組無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，D、E組有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。流式細胞儀檢測足細胞凋亡率結果顯示:與A組相比，B、C、D、E組細胞凋亡率均增加(P＜0.01)，與B組相比，C、D、E組細胞凋亡率降低(P＜0.01)，與C組相比，D組E組凋亡率降低(P＜0.01)。
　　結論:1、解毒通絡保腎法對高糖刺激下足細胞損傷的保護機制可能是通過阻斷ILK介導的PI3K/Akt信號通路，抑制Bax和Caspase-3