HO-1和HO-2在老年SD大鼠慢性腦血流低灌注狀態(tài)下肝臟中的動態(tài)變化及意義.pdf

1、目的：長期的腦血流灌注不足，會導(dǎo)致體內(nèi)多臟器內(nèi)過度的氧化應(yīng)激的產(chǎn)生。血紅素加氧酶（heme oxygenase，HO）是血紅素代謝分解過程中的關(guān)鍵酶和限速酶，也是體內(nèi)重要的內(nèi)源性抗氧化體系，具有顯著的抗氧化應(yīng)激能力。本課題通過建立老年SD大鼠腦血流低灌注模型，研究HO家族中重要成員HO-1和HO-2在肝臟中的表達(dá)，并探討其在腦血流灌注不足引起的損傷時對肝臟的作用及意義。
　　方法：采用持久性雙側(cè)頸總動脈結(jié)扎法（2VO）致老年SD大

2、鼠腦血流灌注不足，首先檢測腦皮質(zhì)血流的變化情況；采用蘇木素-伊紅染色觀察大鼠肝細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變；采集下腔靜脈的靜脈血檢測血清中丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）和天門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）的活性；采用ELISA法檢測肝臟組織中HO的活性變化；采用免疫組織化學(xué)法檢測肝臟組織中HO-1和HO-2的表達(dá)情況；并分別通過RT-PCR和Western blot法檢測肝臟組織中HO-1和HO-2在mRNA和蛋白水平的表達(dá)。
　　結(jié)果：術(shù)后第7天，大

3、鼠皮質(zhì)血流的面積比值明顯降低，達(dá)到最低值，而術(shù)后14、21、28天，大鼠皮質(zhì)腦血流的面積比值逐漸升高，到28天基本恢復(fù)的正常水平。HE染色結(jié)果表明：與假手術(shù)組比，在術(shù)后第1天，肝細(xì)胞因缺血出現(xiàn)水樣變性，即細(xì)胞體積明顯增大，胞質(zhì)變得透明，第7天其水樣變性最為顯著；在術(shù)后14、21、28天，肝細(xì)胞的水樣變性有所改善，但仍未恢復(fù)到正常水平。肝功能檢測結(jié)果顯示：ALT和AST在2VO術(shù)后7d明顯增高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.01），但增高范圍

4、仍屬于正常，無臨床意義；隨著時間的延長，ALT和AST的含量逐漸降低，到28d，數(shù)值基本恢復(fù)至假手術(shù)組的水平。免疫組化、RT-PCR和Western blot顯示：與假手術(shù)組比較，HO-1在術(shù)后1d即有增加，并在第7d達(dá)到高峰(P＜0.05)，這樣的變化與HO酶活性變化一致；而HO-2在慢性腦血流灌注不足的肝臟中卻沒有顯著變化。
　　結(jié)論：慢性腦血流灌注不足時，可導(dǎo)致肝細(xì)胞的形態(tài)結(jié)構(gòu)有輕微的損傷，但肝功能基本正常，這與HO-1和血