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文檔簡介
1、SC7A1是天藍色鏈霉菌A3(2)的一個文庫質(zhì)粒,將它導入天藍色鏈霉菌A3(2)的M145或J1501菌株后,引起宿主產(chǎn)素產(chǎn)孢發(fā)生延遲,因此推測SC7A1中存在負調(diào)控基因,定位并研究該基因的生物學功能是該研究的目的.為定位該基因,構(gòu)建了SC7A1的一系列亞克隆,通過將這些亞克隆分別轉(zhuǎn)化M145并觀察表型,將目的基因從33kb EcoRI片段,到18kb的Bg/II片段,最后定位在第26個ORF：SC7A1.26上.接著構(gòu)建了SC7A1.
2、26的基因中斷質(zhì)粒pHZ2718,將pHZ2718導入M145后得到兩個SC7A1.26基因中斷菌株YX1和YX2,并用Southern雜交驗證.對YX1和YX2進行抗生素合成的檢測,發(fā)現(xiàn)放線紫紅素、鈣依賴抗生素和次甲基霉素都提前產(chǎn)生并且超量表達;經(jīng)過孢子記數(shù)發(fā)現(xiàn)YX1和YX2的產(chǎn)孢要好于野生形菌株M145,孢子數(shù)是M145的兩倍多.該研究將SC7A1.26命名為nrsB.經(jīng)過數(shù)據(jù)庫檢索發(fā)現(xiàn),天藍色鏈霉菌A3（2）的基因組中還有9個nr
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