非洲爪蟾76[＃]新基因完整ORF克隆，生物信息學(xué)分析及其在胚胎發(fā)育中表達(dá)情況的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：通過(guò)對(duì)使用非洲爪蟾重組cDNA表達(dá)文庫(kù)的血清學(xué)分析(Serologial analysis ofrecombinant cDNA expression library，SEREX)技術(shù)所篩選出來(lái)的76[＃]新基因進(jìn)行全長(zhǎng)的分析和克隆，然后進(jìn)行生物信息學(xué)分析和原位雜交觀察基因的表達(dá)情況。最后綜合生物信息學(xué)分析的結(jié)果和基因的表達(dá)情況來(lái)初步預(yù)測(cè)該基因的功能。 方法：本研究對(duì)使用重組cDNA表達(dá)文庫(kù)的血清學(xué)分析(SEREX)技術(shù)所

2、篩選出來(lái)的76[＃]新基因進(jìn)行全長(zhǎng)的分析和克隆，并且進(jìn)行了內(nèi)部剪切、核苷酸測(cè)序、插入片段的生物信息學(xué)分析和基因功能預(yù)測(cè)。這次試驗(yàn)采用了RT-PCR擴(kuò)增并克隆新基因的全長(zhǎng)，后又運(yùn)用全胚胎原位雜交技術(shù)檢測(cè)76[＃]基因在胚胎發(fā)育過(guò)程中的表達(dá)情況，并結(jié)合生物信息學(xué)手段對(duì)其功能進(jìn)行了初步的分析和預(yù)測(cè)。 結(jié)果：運(yùn)用RT-PCR擴(kuò)增并克隆76[＃]新基因的全長(zhǎng)并測(cè)序，首先通過(guò)對(duì)開(kāi)放閱讀框(ORF)分析發(fā)現(xiàn)有289個(gè)堿基，編碼82個(gè)氨基酸。對(duì)