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文檔簡介
1、目的:
研究芍藥苷對PC12細胞的保護作用,并探討其對自噬-溶酶體通路的影響。
方法:
環(huán)境毒素MPP+誘導PC12細胞損傷,同時給予芍藥苷進行干預,四甲基偶氮唑鹽比色法(MTT)、乳酸脫氫酶(LDH)和流式細胞技術檢測細胞存活率、損傷程度、凋亡率及細胞內游離鈣離子濃度的變化,Western blot檢測細胞內LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ和Lamp2a蛋白表達水平的變化。
結果:
2、 MPP+處理24 h,PC12細胞的存活率顯著降低(P<0.001),漏出至上清液中的LDH較正常對照組顯著增多(P<0.001),同時細胞凋亡率也顯著升高(P<0.001),細胞內鈣離子濃度增加(P<0.01)。芍藥苷(50μmol·L-1)提高了PC12細胞的存活率(P<0.001),減少了LDH的漏出(P<0.001),降低了細胞凋亡率(P<0.001),抑制了鈣內流(P<0.01)。Western blot顯示MPP+處
3、理導致LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ的表達水平顯著降低,分別是正常水平的0.64±0.05倍(P<0.01)和0.58±0.10倍(P<0.01),同時Lamp2a蛋白表達升高至正常水平的1.34±0.14倍(P<0.05),而芍藥苷能夠顯著提高LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ的表達水平(P<0.05),并抑制了Lamp2a的異常激活(P<0.001)
結論:
芍藥苷對PC12細胞具有明顯的保護作用,并能拮抗MPP+對自噬-溶
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