人參皂苷對mpp39;誘導(dǎo)pc12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用篩選研究

1、揚州大學(xué)碩士學(xué)位論文人參皂苷對MPP誘導(dǎo)PC12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用篩選研究姓名：晉亮申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：中藥學(xué)指導(dǎo)教師：葛曉群20070501i f I } 庇：人參‘! f f 對M I ，曠誘甘I ' C 1 2 細(xì)J J ( ! ! 捌1 i j j 的保護(hù)作川篩選研究中文摘要帕?xí)? P a r k i n s o n s d i s e a s e ，P D ) 是- - E ' 常見的中樞神經(jīng)系統(tǒng)退行性

2、疾病，目麗尚無有效的根治該病的藥物。本文以神經(jīng)礴素卜甲基一4 一苯基吡啶( M P P + ) 誘導(dǎo)P C I 2 細(xì)胞損傷建立P D 體外細(xì)胞模型，從9 種人參皂苷中篩選出對多巴胺神經(jīng)元損傷有良好保護(hù)作用的人參皂苷單體，為進(jìn)一步整體動物研究提供體外實驗依據(jù)，從而為丌發(fā)預(yù)防和治療P D 新藥提供可能的藥物候選物。l 、M P P + 抑制P C I 2 細(xì)胞存活率的量效和時效關(guān)系：用M T T 法測定細(xì)胞存活率。M P P + 作用于P

3、 C I 2 細(xì)胞1 2 h 、2 4 h 、4 8 h 后，細(xì)胞的光吸收值逐漸下降，1 2 h 僅在最大劑髓組下降有品著性( P < O ．0 5 ) ，而2 4 h 和4 8 h 下降有極顯著性意義( P < O ．0 0 1 ) 。4 8 h 刪存活率最低。不同濃度M P P + 1 0 0 ，2 0 0 ，3 0 0 ，4 0 0 ，5 0 0 | I m o l ／1 ．作用于P C I 2 細(xì)胞，細(xì)胞存活率隨濃度

4、增加而下降。i 2 h 時，細(xì)胞存活率分別為9 8 ．8％、9 3 ．4 ％、9 1 ．7 ％、9 0 ．7 ％、8 6 ．6 ％：2 4 h 時為9 1 ．6 ％、8 7 ．4 ％、8 4 ．8 ％、7 8 ．2％、7 3 ．7 ％；4 8 h 時為9 1 ．9 ％、8 4 ．4 ％、7 0 ．9 ％、5 6 ．4 ％、5 0 ．2 ％。表明M P P + 能抑制細(xì)胞存活率，造成對細(xì)胞的損傷，這一作用有劑量依賴性和時間依賴性。2 、9

5、 種人參皂苷對M P P ‘誘導(dǎo)P C I 2 細(xì)胞損傷的影響：選擇9 種人參皂苻j 缸體R 9 3 、R 9 2 、．R b 3 、R b 2 、R c 、R d 、R e 、R h l 、R h 2 ，分別給予7 個濃度：0 ．3 1 2 5 、0 ．6 2 5 、1 ．2 5 、2 ．5 、5 、1 0 、2 0 um o l ／L ，然后再給與4 0 0 I I m o l ／L M P P + ，培養(yǎng)4 8 h后測定細(xì)胞光吸收

6、值。模型組4 0 0 p m o l ／L M P P + 使正常細(xì)胞存活率下降到6 2 ．0 ％±1 ．9 ％( P < O ．0 0 1 ) 。與模型組相比，人參皂苷R 9 3 、R b 3 、R 9 2 和R e 能顯著提高細(xì)J 胞存活率，最高存活率E m a x 分別為9 5 ．9 ％、9 2 ．0 ％、7 6 ．5 ％、7 6 ．1 ％，半效濃度E c ”分別為0 ．8 0 6 、0 ．3 0 9 、0 ．8

7、2 7 、1 ．7 0 1um o l ／L 。其余5 種人參皂苷R b 2 、R c 、R d 、R h l 和R h 2 結(jié)果為：R b 2 僅低濃度( O ．3 1 2 5 ，0 ．6 2 5 u m o l ／L ) 有輕度提高存活二卒，的作J f 】：R d 、R h l 、1 { 1 1 2 在0 ．3 1 2 5 ～2 ．5 Hm ( ) 1 幾劑量時卻使存活率顯著下降。R c 在低濃度( 0 ．3 1 2 5 ，0 ．6