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1、 目的;采用細(xì)胞培養(yǎng)加入谷氨酸的方法造成PC12細(xì)胞興奮毒性損傷模型,研究興奮性毒性損傷后細(xì)胞存活率、自由基生成、細(xì)胞內(nèi)游離鈣含量及相關(guān)蛋白calpainⅡ、caspase-3和Aβ表達(dá)的變化,并探討人參皂苷Rg2對(duì)谷氨酸誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞毒性損傷的干預(yù)機(jī)制?! 》椒ǎ豪肞C12細(xì)胞株,采用細(xì)胞培養(yǎng)的方法,加入含1mmol/L谷氨酸的無(wú)血清培養(yǎng)基培養(yǎng)24h后即造成興奮毒性損傷,給藥組在損傷同時(shí)加入不同濃度的人參皂苷Rg2,并與藥物
2、尼莫地平(鈣拮抗劑)進(jìn)行對(duì)照。用生化方法測(cè)定MTT代謝率、NO(硝酸還原酶法)和MDA(硫酸巴比妥法)含量;Fura-2作為Ca2+指示劑,利用熒光分光光度計(jì)測(cè)定細(xì)胞內(nèi)游離鈣含量;免疫細(xì)胞化學(xué)方法檢測(cè)PC12細(xì)胞內(nèi)calpainⅡ、caspase-3及Aβ的表達(dá)?! 〗Y(jié)論:谷氨酸毒性損傷后,PC12細(xì)胞MTT代謝率降低,并引起細(xì)胞內(nèi)鈣內(nèi)流增多,而導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)鈣超載,誘導(dǎo)calpainⅡ的過(guò)度表達(dá);同時(shí)NO、MDA等自由基產(chǎn)生增多;激活c
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