人參總皂苷對PC12細胞分化的影響及作用機制的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：研究人參總皂苷(Total saponin of panax ginseng,TSPG)誘導PC12細胞神經(jīng)元性分化的作用。在此基礎(chǔ)上,進一步探討細胞外信號調(diào)節(jié)激酶(extracellular signal regulated kinase,ERK)與TSPG誘導的PC12細胞分化的關(guān)系。
　　 方法：體外培養(yǎng)PC12細胞,觀察其在不同濃度TSPG(0mg/L、10mg/L、20mg/L、40mg/L、80mg/L)作用下

2、,細胞發(fā)生的形態(tài)學改變。藥物作用2d后通過透射電鏡觀察分化細胞間突觸連接形成情況,3d后通過免疫細胞化學法,觀察MAP-2及GAP-43在TSPG誘導分化的PC12細胞中的表達,Western blotting法檢測分化細胞中MAP-2及GAP-43蛋白水平。通過上述檢測以鑒定TSPG誘導的分化細胞。為了探索與TSPG促分化有關(guān)的信號轉(zhuǎn)導途徑,運用Western blotting法觀察經(jīng)不同濃度TSPG作用后,PC12細胞ERK1/2活

3、性的變化。運用ERK1/2特異性的抑制劑PD98059與TSPG共培養(yǎng)PC12細胞,分析ERK1/2信號轉(zhuǎn)導通路在TSPG促PC12細胞神經(jīng)元性分化中的作用。
　　 結(jié)果：⑴TSPG作用后的PC12細胞其突起長度和細胞直徑較對照組增長和增大,各實驗組的細胞分化率明顯提高,這種變化存在著劑量反應關(guān)系,以40mg/L組最為明顯。各濃度組PC12細胞均出現(xiàn)MAP-2、GAP-43標記陽性的分化細胞,且MAP-2、GAP-43蛋白的表達

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