肌苷對(duì)損傷大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤(PC12)細(xì)胞的神經(jīng)保護(hù)及突起生長(zhǎng)作用.pdf_第1頁
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1、第四軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文肌苷對(duì)損傷大鼠嗜鉻細(xì)胞瘤(PC12)細(xì)胞的神經(jīng)保護(hù)及突起生長(zhǎng)作用姓名:史明申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別:碩士專業(yè):神經(jīng)生物學(xué)指導(dǎo)教師:鞠躬游思維20020101第lJU車醫(yī)人學(xué)壩l畢業(yè)論上的濃度依賴性。由于Pcl2細(xì)胞中缺乏核苷磷酸化酶(PurineNucleosidePhosphorylasePNP),所以不能催化肌苷通過能量合成的途徑來補(bǔ)充細(xì)胞損傷時(shí)所造成的能量匱乏,因此我們提出肌苷的這種神經(jīng)保護(hù)作用可能是通過核蛋白聚腺苷二

2、磷酸核糖聚合酶(Poly(ADPribose)P01ymerasePARP)來實(shí)現(xiàn)的。在試驗(yàn)的第二部分,我們利用彎頭吸管在培養(yǎng)液中不斷吹打的方法對(duì)Pcl2細(xì)胞造成一種機(jī)械的物理損傷,施加不同濃度肌苷后,11在不同的時(shí)惻點(diǎn)觀察細(xì)胞的形態(tài)學(xué)變化并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行分類計(jì)數(shù):2)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行免疫細(xì)胞化學(xué)染色,研究肌苷對(duì)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白(GroMhAssociatedProtein43,GAP43)和磷酸化促有絲分裂原相關(guān)蛋白激酶(phospho—Mitog

3、enAssociatedProteinKinase,pMAPK)表達(dá)的影響。結(jié)果顯示:不同濃度肌苷可使具有長(zhǎng)突起及分枝突起的Pcl2細(xì)胞數(shù)目顯著增加:明顯提高GAP43和口MAPK免疫細(xì)胞化學(xué)染色的陽性率。因此肌苷促進(jìn)突起生長(zhǎng)的作用機(jī)理可能是通過激活細(xì)胞內(nèi)MAPK來實(shí)現(xiàn)的。通過以上試驗(yàn)我們證實(shí)了肌苷對(duì)損傷神經(jīng)細(xì)胞的重要作用:對(duì)高濃度硫酸鋅誘發(fā)的PCI2細(xì)胞損傷有依賴于劑量的保護(hù)作用,可降低其造成的細(xì)胞死亡;促進(jìn)機(jī)械損傷PCI2細(xì)胞突起的

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