姜黃素對(duì)Aβ25-35至PC12細(xì)胞損傷的保護(hù)作用.pdf

1、目的:本研究采用β-淀粉樣蛋白（Aβ25-35）致鼠腎上腺嗜鉻瘤細(xì)胞PC12(Rat pheochromoeytoma)損傷為AD模型，采用細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察及細(xì)胞活力檢測(cè)，應(yīng)用免疫熒光和免疫印跡技術(shù)檢測(cè)HMGB1在細(xì)胞的表達(dá)情況，探討HMGB1在AD病理過程中的重要性和干預(yù)價(jià)值，為姜黃素進(jìn)一步用于AD患者提供理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　 方法:取對(duì)數(shù)期生長(zhǎng)的PC12細(xì)胞分為5組:正常細(xì)胞組（A組）、Aβ25-35模型組（B組）、姜黃

2、素Cur+Aβ25-35治療組（C組），rHMG1+Aβ25-35損傷組（D組），溶劑對(duì)照組DMSO+Aβ25-35（E組）。(1)A組不做任何處理;(2)B組加入終濃度為20μmol/L的Aβ25-35;(β)C組同時(shí)加入終濃度為20μmol/L的Aβ25-35和終濃度為1μmol/L的Cur共同孵育（姜黃素被溶解于1μl/ml DMSO）。(4)D組同時(shí)加入500ng/ml的HMGB1+20μmol/L的Aβ25-35.(5)E組同

3、時(shí)加入終濃度為20μmol/L的Aβ25-35和1μl/ml的DMSO，孵育24小時(shí)后進(jìn)行細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察，細(xì)胞免疫熒光定性和Westem blot法檢測(cè)HMGB1等蛋白表達(dá)情況。
　　 結(jié)果:
　　 1、姜黃素可以減輕AD細(xì)胞毒性。與A組相比，B、D、E組細(xì)胞活力下降明顯;與B組相比，C組細(xì)胞抑制率降低，B組與D、E組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2、姜黃素能夠降低HMGB1的表達(dá)。Western blot結(jié)果

4、顯示，與A組相比，B、D、E組細(xì)胞內(nèi)HMGB1表達(dá)升高;與B組相比，C組的HMGB1的表達(dá)下降，B組與D、E組相比，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3、姜黃素可能抑制HMGB1的胞外釋放。免疫熒光定性結(jié)果顯示，與A組相比，B組存在大量的HMGB1胞核外釋放情況;和B組相比，C組HMGB1的胞外釋放情況減少。
　　 結(jié)論:Aβ25-35引起PC12細(xì)胞毒性;姜黃素可減輕Aβ25-35引起的PC12細(xì)胞毒性;姜黃素可減少Aβ25-