丁苯酞對(duì)Aβ-,25-35-誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞損害的保護(hù)作用及其機(jī)制.pdf

1、目的：
　　 阿爾茨海默?。ˋD）是一種進(jìn)展性的神經(jīng)變性性疾病，以腦內(nèi)Aβ聚集而形成的淀粉樣纖維沉積為特征。目前尚無有效地治療辦法來阻止疾病的發(fā)生及進(jìn)展。最近的研究表明，AD患者腦內(nèi)氧化還原失衡和Aβ沉積能夠?qū)е卵趸T導(dǎo)的細(xì)胞凋亡發(fā)生。丁苯酞（NBP）是一種治療缺血性卒中的有效且有前景的藥物，可通過多種作用途徑來影響疾病的病理生理過程。據(jù)此，本試驗(yàn)將探討NBP對(duì)Aβ25-35誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞的作用。因此我們用NBP對(duì)Aβ25-

2、35誘導(dǎo)的PC12細(xì)胞進(jìn)行預(yù)處理，觀察其對(duì)PC12細(xì)胞凋亡的影響及線粒體變化，來探討NBP對(duì)Aβ25-35誘導(dǎo)PC12細(xì)胞是否具有保護(hù)作用及可能機(jī)制。
　　 方法：
　　 對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的PC12細(xì)胞分為3組：正常對(duì)照組、模型組、NBP組。細(xì)胞培養(yǎng)24h后，NBP組加入終濃度為10μmol/L的NBP預(yù)處理2h，再與模型組同時(shí)加入終濃度為10μmol/LAβ25-35，繼續(xù)培養(yǎng)48h收集細(xì)胞檢測(cè)指標(biāo)。采用MTT比色法分析細(xì)胞

3、存活率，HE染色、PI流式細(xì)胞儀檢測(cè)凋亡，用分光光度法檢測(cè)MAD及SOD活性觀察細(xì)胞氧化應(yīng)激，利用電鏡觀察線粒體超微結(jié)構(gòu)的變化，運(yùn)用westernblot檢測(cè)胞漿Cyt-C和Bc1-2蛋白表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 MTT顯示NBP組細(xì)胞存活率明顯高于模型組（P<0.05），并且中劑量存活率最高；HE染色及流式細(xì)胞學(xué)結(jié)果顯示NBP組較模型組細(xì)胞凋亡率明顯下降（P<0.05）；SOD活性NBP組較模型組細(xì)胞明顯增加，而MD

4、A活性降低；電鏡結(jié)果顯示模型組線粒體數(shù)量和形態(tài)發(fā)生了明顯的改變，而NBP組線粒體數(shù)量多，結(jié)構(gòu)比較完整；westernblot顯示：NBP組Bc1-2蛋白表達(dá)增加，而模型組明顯減少（P<0.05）；模型組胞漿Cyt-C表達(dá)最強(qiáng)，而NBP組有較弱的Cyt-C表達(dá)（P<0.05）。
　　 結(jié)論：
　　 NBP可以提高細(xì)胞存活率，降低凋亡率，對(duì)Aβ誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞毒性起保護(hù)作用。NBP對(duì)Aβ誘導(dǎo)神經(jīng)細(xì)胞毒性抗凋亡機(jī)制可能與誘導(dǎo)了神經(jīng)

5、細(xì)胞抗凋亡基因Bc1-2的表達(dá)，穩(wěn)定了線粒體的結(jié)構(gòu)，抑制了線粒體通透性轉(zhuǎn)換孔（PT）的開放，阻止了Cyt-C從線粒體釋放入胞漿有關(guān)，同時(shí)NBP抑制MDA活性，降低脂質(zhì)過氧化，激活SOD清除氧自由基，起到了保護(hù)線粒體的作用。綜上結(jié)果分析表明：NBP治療對(duì)減輕Aβ導(dǎo)致的神經(jīng)細(xì)胞的凋亡、保護(hù)線粒體可能有著積極的作用，合理的NBP治療在一定程度上可減輕癡呆患者的癥狀。隨著對(duì)NBP基礎(chǔ)和臨床研究的深入，NBP將會(huì)開辟治療神經(jīng)系統(tǒng)變性疾病的新途徑。