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文檔簡介
1、目的:
探討重組人IL-12對乳腺癌細胞自噬的影響。
方法:
用一定濃度的重組人 IL-12(rIL-12)分別作用乳腺癌MDA-MB-231和MCF7細胞不同時間,或者用不同濃度的rIL-12對乳腺癌細胞作用一定時間,用免疫蛋白印跡技術(shù)檢測自噬微管相關(guān)蛋白輕鏈3(LC3)的變化,用免疫熒光技術(shù)檢測在乳腺癌細胞中LC3以觀察自噬情況;用透射電鏡觀察 rIL-12處理乳腺癌細胞前后自噬小體的變化。通過Akt通
2、路激活劑IGF-1激活PI3K-Akt通路,檢測p-Akt、Akt蛋白表達以及自噬標志蛋白LC3的變化。
結(jié)果:
兩株乳腺癌細胞經(jīng)rIL-12處理后檢測其自噬標志蛋白LC3結(jié)果顯示,與未處理組相比,rIL-12處理組細胞的自噬標志蛋白表達明顯增高,LC3II/β-actin的值同樣明顯增大,且增加程度呈時間和濃度依賴性;使用免疫熒光觀察自噬體形成的結(jié)果顯示,與未處理組相比,rIL-12處理組的細胞核周點狀聚集的綠色熒
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