CD24通過(guò)FAK-PI3K通路影響乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移的研究.pdf

1、本文對(duì)CD24通過(guò)FAK-PI3K通路影響乳腺癌侵襲轉(zhuǎn)移進(jìn)行了研究。本研究分為三個(gè)部分：
　　第一部分：CD24和FAK-PI3K信號(hào)通路相關(guān)蛋白在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中的表達(dá)及其臨床意義。
　　目的：探討CD24和FAK-PI3K信號(hào)通路相關(guān)蛋白在乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌中的表達(dá)及其臨床意義。
　　方法：應(yīng)用免疫組化SP法檢測(cè)乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌組織中CD24、p-FAK、p-AKT的表達(dá)水平，以及與臨床病理參數(shù)之間的相關(guān)性，同時(shí)分

2、析CD24與p-FAK、p-AKT表達(dá)水平的相關(guān)性。
　　結(jié)果：CD24表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、組織學(xué)分級(jí)、Ki-67表達(dá)具有明顯的相關(guān)性（P<0.05），但其表達(dá)與年齡、腫瘤大小、激素受體（ER/PR）、HER-2無(wú)明顯相關(guān)性（p＞0.05）；p-FAK表達(dá)與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Ki-67表達(dá)具有明顯的相關(guān)性（P<0.05），但其表達(dá)與年齡、腫瘤大小、組織學(xué)分級(jí)、激素受體（ER/PR）、HER-2無(wú)明顯相關(guān)性（p＞0.05）；p-AKT表達(dá)與

3、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、Ki-67表達(dá)具有明顯的相關(guān)性（P<0.05），但其表達(dá)與年齡、腫瘤大小、組織學(xué)分級(jí)、激素受體（ER/PR）、HER-2無(wú)明顯相關(guān)性（p＞0.05）。進(jìn)一步研究CD24、p-FAK、p-AKT在乳腺癌組織中的表達(dá)的相關(guān)性發(fā)現(xiàn)CD24表達(dá)水平與p-FAK、p-AKT表達(dá)水平具有明顯的相關(guān)性。
　　結(jié)論：CD24、p-FAK、p-AKT過(guò)表達(dá)與乳腺浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌增殖轉(zhuǎn)移密切相關(guān)，CD24可能通過(guò)激活FAK-PI3K信號(hào)通路影

4、響腫瘤增殖轉(zhuǎn)移。
　　第二部分：抑制CD24表達(dá)對(duì)乳腺癌細(xì)胞MCF-7增殖、侵襲轉(zhuǎn)移能力及對(duì)三苯氧胺處理的影響。
　　目的：探討CD24對(duì)MCF-7細(xì)胞增殖、侵襲轉(zhuǎn)移能力的影響及對(duì)三苯氧胺處理的影響
　　方法：通過(guò)CD24 siRNA抑制MCF-7細(xì)胞CD24的表達(dá)，Western blot檢測(cè)CD24、ER表達(dá)水平，Western blot檢測(cè)不同濃度的TAM處理的MCF-7細(xì)胞CD24、ER表達(dá)水平。通過(guò)MTT、E

5、LISA、TUNEL檢測(cè)CD24 siRNA對(duì)MCF-7細(xì)胞活力、凋亡以及對(duì)三苯氧胺敏感性的影響。通過(guò)劃痕實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)CD24 siRNA轉(zhuǎn)染MCF-7細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。
　　結(jié)果：轉(zhuǎn)染CD24 siRNA顯著抑制CD24的表達(dá)，與對(duì)照細(xì)胞相比，CD24抑制后MCF-7細(xì)胞增殖、侵襲轉(zhuǎn)移能力受到明顯的抑制，凋亡細(xì)胞顯著增加。CD24抑制導(dǎo)致MCF-7細(xì)胞對(duì)TAM敏感性增強(qiáng)。
　　結(jié)論： CD24基因敲低能夠顯著降

6、低乳腺癌MCF-7細(xì)胞增殖、侵襲轉(zhuǎn)移能力，促進(jìn)細(xì)胞凋亡，并且可提高M(jìn)CF-7細(xì)胞對(duì)TAM敏感性。
　　第三部分：CD24通過(guò)FAK-PI3K信號(hào)通路影響乳腺癌細(xì)胞MCF-7增殖、侵襲轉(zhuǎn)移的研究。
　　目的：探討CD24影響乳腺癌細(xì)胞MCF-7增殖、侵襲轉(zhuǎn)移的機(jī)制
　　方法：通過(guò)pCDNA3.1(+)-CD24質(zhì)粒轉(zhuǎn)染乳腺癌MCF-7細(xì)胞，應(yīng)用Western blot檢測(cè)轉(zhuǎn)染效果。應(yīng)用PI3K特異性抑制劑LY294002

7、處理CD24過(guò)表達(dá)MCF-7細(xì)胞，Western blot檢測(cè)CD24、p-FAK、p-AKT表達(dá)水平，通過(guò)劃痕實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)MCF-7細(xì)胞的侵襲轉(zhuǎn)移能力。
　　結(jié)果：與對(duì)照細(xì)胞相比，轉(zhuǎn)染pCDNA3.1(+)-CD24質(zhì)粒顯著增強(qiáng)CD24的表達(dá)，CD24過(guò)表達(dá)后，p-FAK、p-AKT表達(dá)水平明顯升高，細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力明顯的增強(qiáng)。應(yīng)用 PI3K特異性抑制劑 LY294002可降低p-AKT的表達(dá)水平，細(xì)胞侵襲轉(zhuǎn)移能力降低